第２７卷第２期 应用化学 Ｖｏ１．２７ Ｎｏ．２ ２０１０年２月 ＣＨＩＮＥＳＥ ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＡＰＰＬＩＥＤ ＣＨＥＭＩＳＴＲＹ Ｆｅｂ．２０１０ ；＼ ｌ５研究论文Ｉ５ （曼 ；、 软骨藻酸分子印迹聚合物的制备及其固相萃取应用 李丽丽。 周文辉 李 永 林黎明 朱校斌。 杨黄浩” 王小如 。 （ 中国科学院海洋研究所青岛； 中国海洋大学化学化工学院青岛； 国家海洋局第一海洋研究所青岛２６６０６１； 山东出入境检验检疫局技术中心青岛） 摘要 以贝毒一软骨藻酸的结构类似物１，３，５－戊烷三羧酸为模板分子，４．乙烯基吡啶为功能单体，乙二醇二 甲基双丙烯酸酯为交联剂，合成了对软骨藻酸具有较好选择性的分子印迹聚合物。经索氏提取去除模板分子 后，在聚合物内部形成了与模板分子１，３，５－戊烷三羧酸以及结构类似物软骨藻酸尺寸、形状以及活性基团互 补的结合位点。通过静态平衡结合实验研究了该聚合物的结合能力和选择性能，与化学组成相同的相应非印 迹聚合物相比，１，３，５－戊烷三羧酸的分子印迹聚合物对软骨藻酸具有较高的吸附性能和选择性。用１５０ ｍｇ印 迹聚合物填充于１．０ ｍＬ玻璃注射器制成的分子印迹固相萃取柱，采用离线模式，并结合高效液相色谱实现紫 贻贝和海水中软骨藻酸的分离与检测。对于加标２ ｍｇ／Ｌ的紫贻贝和海水样品，回收率分别达到（９３．４± ４．９）％和（８９．７±３．２）％（ｎ＝３）。 关键词 软骨藻酸，分子印迹聚合物，记忆缺失性贝毒，固相萃取 中图分类号：０６５８ 文献标识码：Ａ 文章编号：１０００－０５１８（２０１０）０２－０１３２－０５ ＤＯＩ：１０．３７２４／ＳＰ．Ｊ．１０９５．２０１０．９０１ １４ 记忆缺失性贝毒（Ａｍｎｅｓｉａ Ｓｈｅｌｌｉｆｓｈ Ｐｏｉｓｏｎｉｎｇ，ＡＳＰ）一软骨藻酸（Ｄｏｍｏｉｃ Ａｃｉｄ，ＤＡ）…是谷氨酸的一 种异构体，能够与控制细胞膜Ｎａ 通道的神经递质谷氨酸受体紧密结合，提高ｃａ 的渗透性，使神经细 胞长时间处于去极化的兴奋状态，最终导致细胞死亡，并可能对中枢神经系统海马区和丘脑区造成损 伤，从而导致记忆力丧失 。目前，测定海产品中软骨藻酸的方法主要有小白鼠生物学试验法 、毛细 管电泳法＿４］、高效液相色谱法（ＨＰＬＣ） 等，其中ＨＰＬＣ在软骨藻酸的管理与研究中的应用最为广 泛 Ｊ，但是因为实际样品基质较为复杂，一般需辅助质谱进行分析，导致分析成本大幅上升。 固相萃取（Ｓｏｌｉｄ ｐｈａｓｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ＳＰＥ）由于具有回收率高、有机溶剂用量少、能处理小体积试样、操 作简单等优点 而成为最常用的样品前处理方法之一 Ｊ，然而传统固相萃取存在着选择性差的严重不 足。分子印迹是制备对特定分子具有专一性结合能力的技术，分子印迹聚合物（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｙ Ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ Ｐｏｌｙｍｅｒｓ，ＭＩＰｓ）具有很好的选择性，高度的稳定性和长的使用寿命，已在分离提纯和传感器等方面显示 出广阔的应用前景 ’ｍ］。Ｓｅｌｌｅｒｇｒｅｎ等¨¨首次报道了以ＭＩＰｓ作为固相萃取材料的固相萃取，选择性较 高且几乎不存在杂质干扰，显示了分子印迹固相萃取的优越性。 Ｌｏｔｉｅｒｚｏ等¨副首次报道了采用光接枝（ｐｈｏｔｏ．ｇｒａｆｔｉｎｇ），在表面等离子体共振（ｓｕｒｆａｃｅ ｐｌａｓｍｏｎ ｒｅｓｏｎａｎｃｅ，ＳＰＲ）芯片的金电极上合成了软骨藻酸的分子印迹传感膜，并实现了软骨藻酸的ＳＰＲ检测，但 制备成本和毒性了此方法的推广与应用。Ｋｕｂｏ等＿】 以邻苯二甲酸及其异构体为模板分子采用两 步溶胀聚合法（ｔｗｏ—ｓｔｅｐ ｓｗｅｌｌｉｎｇ ｐｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ），实现了软骨藻酸分子印迹聚合物的无毒、低成本制备， 但是印迹聚合物的制备过程依然较为繁琐。本文采用本体聚合法，以软骨藻酸的结构类似物１，３，５一戊 烷三羧酸为模板分子模拟软骨藻酸分子合成了对软骨藻酸具有特异性识别能力的分子印迹聚合物，制 备过程简单无毒，适于推广与应用。并尝试将该印迹聚合物用作固相萃取剂，结合高效液相色谱法用于 贝类和海水样品中软骨藻酸的分离、富集与检测。 ２００９￣２－１９收稿，２ｏｏ９ ５＿２１修回 国家自然科学基金（２０７７５０１９）、国家“八六三”计划（２００６ＡＡ０９Ｚ１６８）、山东省自然科学基金（Ｙ２００６Ｂ０１）、青岛市自然科学基金（Ｏ８－ １０－３２－ＪＣＨ）和国家海洋局青年基金（２００７６０１）资助项目 通讯联系人：杨黄浩，男，教授，博士生导师；Ｅ－ｍａｉｌ：ｈｈｙａｎｇ＠ｒｉｏ．ｏｒｇ．ｃｎ；研究方向：污染物检测新技术 第２期 李丽丽等：软骨藻酸分子印迹聚合物的制备及其固相萃取应用 １３３ １ 实验部分 １．１仪器和试剂 １１００型高效液相色谱仪（美国Ａｇｉｌｅｎｔ公司），配备Ｇ１３１２Ａ二元泵、Ｇ１３１４Ａ ＶＷＤ检测器；Ａｇｅｌａ Ｖｅｎｕｓｉｌ ＸＢＰ—Ｃ１８柱（２５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ，５ Ｉ．ｚｍ），色谱流动相为Ｖ（乙腈）： （水）：Ｖ（三氟乙酸）＝ ２５０：７５０：１；流速０．６ ｍＬ／ｍｉｎ；进样量２０ ｔｘＬ；柱温为室温；检测波长２４２ ｎｍ；ＵＶ ２１０２ ＰＣＳ型紫外可见分 光光度计（上海尤尼柯仪器有限公司）；ＤＺＦ－６０２０型真空干燥箱；ＴＧＬ一１６Ｇ型离心机；ＴＨ－３００Ａ型梯度混 合器；ＦＷ１００型均质器。 软骨藻酸（Ｄｏｍｏｉｃ Ａｃｉｄ，ＤＡ）（瑞士Ａｌｅｘｉｓ公司），１，３，５－戊烷三羧酸（１，３，５－Ｐｅｎｔａｎｅｔｒｉｅａｒｂｏｘｙｌｉｃ Ａｃｉｄ）（日本ＴＣＩ公司），４．乙烯基吡啶（４一Ｖｉｎｙｌ Ｐｙｒｉｄｉｎｅ，４－ＶＰ）、乙二醇二甲基丙烯酸酯（Ｅｔｈｙｌｅｎｅ Ｇｌｙｃｏｌ Ｄｉｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ，ＥＧＤＭＡ）（美国Ａｌｆａ Ａｅｓａｒ公司），乙腈、甲醇为色谱纯，偶氮二异丁腈（Ａｚｏｂｉｓｉｓｏｂｕｔｙｒｏｎｉ． ｔｒｉｌｅ，ＡＩＢＮ）、三氟乙酸（Ｔｒｉｌｆｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ Ａｃｉｄ，ＴＦＡ）及其它试剂均为分析纯。紫贻贝（俗称海红）（青岛当 地水产市场），采用人工配制海水，配方如表１。实验用水为超纯水。 表１人工海水配方 Ｔａｂｌｅ １ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ ｓｅａｗａｔｅｒ １．２分子印迹聚合物的制备 ０．３ ｍｍｏｌ（６１ ｍｇ）模板分子１，３，５－戊烷三羧酸、６ ｍｍｏ］（６３５ ｔｘＬ）功能单体４一乙烯基吡啶、３０ ｍｍｏｌ （５ ６７０ ＩｘＬ）交联剂乙二醇二甲基双丙烯酸酯、０．２５ ｍｍｏｌ（４１ ｍｇ）引发剂偶氮二异丁腈分散于５ ｍＬ甲苯 中，超声分散１０ ｍｉｎ，Ｎ 气吹除氧１５ ｍｉｎ，密封反应器，在Ｎ：气保护下油浴５５℃反应２４ ｈ。得到的块状 聚合物经研钵研磨，过０．０３７～０．０７４ ｍｍ孔筛，得到粒径３７—７４ ｍ的聚合物颗粒。用体积分数为 ２０％的乙酸甲醇溶液在索氏提取器中提取４８ ｈ，除去模板分子及未反应的化合物。用乙腈洗涤除去残 留的乙酸和甲醇，聚合物颗粒经丙酮反复沉降，除去细颗粒后，５Ｏ℃真空干燥至恒重，即得分子印迹聚 合物。 空白聚合物制备方法除不加入１，３，５一戊烷三羧酸之外，其它步骤同上。 １．３分子印迹聚合物分子识别性能 取５ ｍｇ上述分子印迹聚合物（或空白聚合物）加入５ ｍＬ质量浓度在０．５—２５ ｍｇ／Ｌ范围内的软骨 藻酸乙腈溶液中。室温振荡反应７ ｈ后高速离心，取上清液，用紫外可见分光光度计在２４２ ｎｍ波长下检 测上清液中软骨藻酸的含量（标准曲线法），最后根据溶液的浓度变化计算印迹聚合物（或空白聚合物） 对软骨藻酸的吸附量。 １．４软骨藻酸的固相萃取 １．４．１ 固相萃取柱的灌装与活化１ ｍＬ玻璃注射器底端用脱脂棉作为筛板，防止印迹聚合物颗粒的 流失。取１５０ ｍｇ分子印迹聚合物填充，以乙腈为匀浆液湿法装柱，Ｎ 气吹干柱子制得印迹聚合物固相 萃取小柱，依次用２ ｍＬ水、２ ｍＬ乙腈活化，最终用Ｎ，气吹干备用。 １．４．２ 贝类样品中软骨藻酸的固相萃取 切开新鲜带壳的紫贻贝的闭壳肌取出贝肉，放在金属网上沥水５ ｍｉｎ，切细混合，以均质器进行均质 处理。取均质样品５ ｇ，加入 （甲醇）： （水）＝１：１的混合液５ ｍＬ，漩涡振荡１ ｍｉｎ，超声提取５ ｍｉｎ，以 １０ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心５ ｒａｉｎ，取出上清液。于上清液中添加２ ｍｇ／Ｌ的软骨藻酸即为贝类样品加标液。 １ ｍＬ贝类样品加标液以０．２５ ｍＬ／ｍｉｎ的速度滴入固相萃取小柱，并用Ｎ 气吹干，依次用１ ｍＬ水、 １ ｍＬ乙腈淋洗固相萃取小柱，流速为０．２５ ｍＬ／ｍｉｎ，并用Ｎ 气吹干固相萃取小柱。最后用３ ｍＬ含５％醋 酸的乙腈洗脱，流速为０．２５ ｍＬ／ｍｉｎ，收集洗脱液。洗脱液Ｎ 气浓缩至干，用乙腈定容至１ ｍＬ，得到洗脱 液。 应用化学 第２７卷 用高效液相色谱仪测定加标液和洗脱液中软骨藻酸的含量。 １．４．３ 海水中软骨藻酸的固相萃取海水中直接添加２ ｍｇ／Ｌ的软骨藻酸，固相萃取过程同上。 ２结果与讨论 ２．１提取溶剂的选择 早期对贝类中软骨藻酸（ＤＡ）的提取采用与麻痹性贝毒素相同的酸性水溶液，后来发现ＤＡ在酸性 条件下易分解Ｌ１ ，不利于批量分析和痕量水平检测，而改用 （甲醇）：Ｖ（水）＝１：１的溶剂作提取液，效 果不错。本文以此混合液作提取溶剂，配合自制的ＭＩＰ ＳＰＥ柱¨ 净化，避免了贝类样品中大量复杂基 质的干扰。 ２．２．色谱条件的选择 软骨藻酸属于三元有机酸，极性较大，在反相Ｃ 柱上的保留值较小，测定软骨藻酸常采用极性的流 动相，但是软骨藻酸在流动相中的电离导致色谱峰峰形较差，拖尾严重。本文 （乙腈）：Ｖ（水）：Ｖ（三氟 乙酸）＝２５０：７５０：１为流动相，在０．６ ｍＬ／ｍｉｎ的流速下获得了较好的分离效果。软骨藻酸标准溶液的 紫外光谱在２４２ ｎｍ处有较大吸收峰，并且干扰较少，因此，以此作为检测波长。图１为５ ｍｇ／Ｌ软骨藻 酸标准溶液的ＨＰＬＣ色谱图。 ３０ ＿ ＿ 八 ０ ２ ４ ６ ８ ｌ０ １２ ｌ４ Ｔｉｍｅ／ｍｉｎ ｃ（ｔｅｍｐｌａｔｅ）／（ｍｇ’Ｌ ） 图１ ５ ｍｇ／Ｌ软骨藻酸标准溶液ＨＰＬＣ色谱图 图２ ＭＩＰ（Ⅱ）和ＮＩＰ（ｂ）对软骨藻酸的吸附 Ｆｉｇ．１ ＨＰＬＣ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｏｆ ５ ｍｇ／Ｌ ｄｏｍｏｉｃ Ｆｉｇ．２ Ａｍｏｕｎｔｓ ｏｆ ｄｏｍｏｉｃ ａｃｉｄ ｂｏｕｎｄ ｂｙ（Ⅱ）ＭＩＰ ａｎｄ（６）ＮＩＰ ２．３印迹聚合物的分子识别性能 静态平衡法测定的印迹聚合物对不同浓度软骨藻酸的等温吸附曲线如图２所示。从图中可以看 出，印迹聚合物对软骨藻酸的吸附容量随着体系中软骨藻酸初始浓度的增加而增加。在相同初始浓度 Ｔｉｍｅ／ｍｉｎ Ｔｉｍｅ／ｍｉｎ 图３添加２ ｍｇ／Ｌ软骨藻酸的贝类样品提取液（ａ）和经ＭＩＰ—ＳＰＥ柱萃取后洗脱液（ｂ）ＨＰＬＣ色谱图 Ｆｉｇ．３ ＨＰＬＣ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ ｏｆ（ｎ）ｍｙｔｉｌｕｓ ｅｄｕｌｉｓ ｅｘｔｒａｃｔ ａｆｔｅｒ ａｄｄｉｔｉｏｎ ｏｆ（ａ）２ ｍｇ／Ｌ ｄｏｍｏｉｃ ａｃｉｄ ａｎｄ（ｂ）ａｆｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｎ ＭＩＰ—ＳＰＥ ｃｏｌｕｍｎ 第２期 李丽丽等：软骨藻酸分子印迹聚合物的制备及其固相萃取应用 １ ２ ３ ４ ５ １３５ 下，印迹聚合物对软骨藻酸分子的吸附容量明显高于非印迹聚合物，这表明印迹聚合物具有对软骨藻酸 分子的特异性分子识别能力，与以软骨藻酸为模板分子制备的印迹聚合物吸附性能相当，优于以邻苯二 甲酸为模板分子制备的印迹聚合物的吸附性能 ＇”】。由于１，３，５－戊烷三酸和软骨藻酸分子结构中均有 ３个羧基可以参与分子识别，而邻苯而甲酸仅有２个羧基参与分子识别，说明了三点识别优于两点识 别。 ２．４海产品中软骨藻酸的分离与分析 图３ｏ为添加２ ｍｇ／Ｌ软骨藻酸的紫贻贝提取液的ＨＰＬＣ色谱图。从图中可以看出，贝类样品提取 液的基质非常复杂，对软骨藻酸的定量检测有很大干扰。图３６为经ＭＩＰ・ＳＰＥ柱萃取后洗脱液的ＨＰＬＣ 色谱图。从图中可以看出，贝类样品提取液中的复 杂基质背景基本去除，软骨藻酸得到了选择性的分 离与富集。这表明ＭＩＰ．ＳＰＥ柱可以用于贝类样品提 取液中软骨藻酸的快速分离检测。采用该方法检测 添加２ ｍｇ／Ｌ软骨藻酸的紫贻贝提取液，回收率为 ９３．４％，相对标准偏差（ｎ＝３）为４．９％。 ２．５海水中软骨藻酸的分离与分析 图４为添加２ ｍｇ／Ｌ软骨藻酸的海水溶液经 ＭＩＰ．ＳＰＥ柱萃取后洗脱液的ＨＰＬＣ色谱图。从图中 可以看出，海水溶液与紫贻贝提取液的固相萃取结 果相似。海水中的复杂基质已被去除，软骨藻酸得 图４添加２ ｍｇ／Ｌ软骨藻酸的海水样品经ＭＩＰ—ＳＰＥ柱 到了选择性的分离与富集。结果表明，ＭＩＰ—ＳＰＥ柱 萃取后洗脱液ＨＰＬＣ色谱图 Ｆｉｇ．４ ＨＰＬＣ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｏｆ ａｒｔｉｉｆｃｉａｌ ｓｅａｗａｔｅｒ ａｄｄｉｔｉｏｎ 可以用于海水中软骨藻酸的快速分离检测。用该方 ｏｆ ２ ｍｇ／Ｌ ｄｏｍｏｉｃ ａｃｉｄ ａｆｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｎ 法检测添加２ ｍｇ／Ｌ软骨藻酸的海水溶液的回收率 ＭＩＰ—ＳＰＥ ｃｏｌｕｍｎ 为８９．７％，低于贝类样品提取液，可能与海水ｐＨ值 以及盐的影响有关。 参考文献 Ｑｕｉｌｌｉａｍ Ｍ Ａ，Ｗｒｉｇｈｔ Ｊ Ｌ Ｃ．Ａｎａｌ Ｃｈｅｍ［Ｊ］，１９８９，６１（１８）：１ ０５３Ａ Ｈａｍｐｓ０ｎ Ｄ Ｒ，Ｈｕａｎｇ Ｘ Ｐ，Ｗｅｌｌｓ Ｊ Ｗ，Ｗａｌｔｅｒ Ｊ Ａ，Ｗｒｉｇｈｔ Ｊ Ｌ Ｃ．Ｅｕｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ［Ｊ］，１９９２，２１８（１）：１ Ｉｖｅｒｓｏｎ Ｆ，Ｔｒｕｅｌｏｖｅ Ｊ，Ｎｅｒａ Ｅ，Ｔｒｙｐｈｏｎａｓ Ｌ，Ｃａｍｐｂｅｌｌ Ｌ，Ｌｏｋ Ｅ．Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ Ｔｏｘｉｃｏｌ［Ｊ］，１９８９，２７（６）：３７７ Ｎｇｕｙｅｎ Ａ Ｌ，Ｌｕｏｎｇ Ｊ Ｈ Ｔ，Ｍａｓｓｏｎ Ｃ．Ａｎａｌ Ｌｅｔｔ［Ｊ］，１９９０，２３（９）：１ ６２１ Ｌａｗｒｅｎｃｅ Ｊ Ｆ，Ｃｈａｒｂｏｎｎｅａｕ Ｃ Ｆ，Ｍｅｎａｒｄ Ｃ．Ｊ Ａｓｓｏｃ ＯｆｆＡｎａｌ Ｃｈｅｍ［Ｊ］，１９９１，７４（１）：６８ Ｇａｇｏ—Ｍａｒｔｍｅｚ Ａ，Ｐｉｉｆｅｉｒｏ Ｎ，Ａｇｕｅｔｅ Ｅ Ｃ，Ｖａｑｕｅｒｏ Ｅ，Ｎｏｇｕｅｉｒａｓ Ｍ，Ｌｅａｏ Ｊ Ｍ，Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ—Ｖ￣ｚｑｕｅｚ Ｊ Ａ，Ｄａｂｅｋ—Ｚｌｏｔｏｒｚｙｎｓｋａ Ｅ．Ｊ ＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙＡ［Ｊ］，２００３，９９２（１—２）：１５９ Ｐｏｏｌｅ Ｃ Ｆ．Ｔｒｅｎｄｓ Ａｎａｌ Ｃｈｅｍ Ｊ Ｊ），２００３，２２（６）：３６２ ＣＡＩ Ｙａ—Ｑｉ（蔡亚岐），ＭＯＵ Ｓｈｉ—Ｆｅｎ（牟世芬）．ＪＩｎｓｔｒｕｍＡｎａｌ（分析测试学报）［Ｊ］，２００５，２４（５）：１１６ Ｈａｕｐｔ Ｋ．Ａｎａｌ Ｃｈｅｍ［Ｊ］，２００３，７５（１７）：３７６Ａ ＬＡＩ Ｊｉａ—Ｐｉｎｇ（赖家平），ＨＥ Ｘｉ—Ｗｅｎ（何锡文），ＧＵＯ Ｈｏｎｇ—Ｓｈｅｎｇ（郭洪声），ＬＩＡＮＧ Ｈｏｎｇ（梁宏）．Ｃｈｉｎｅｓｅ ＪＡｎａｌ Ｃｈｅｍ （分析化学）［Ｊ］，２００１，２９（７）：８３６ Ｓｅｌｌｅｒｇｒｅｎ Ｂ．Ａｎａｌ Ｃｈｅｍ［Ｊ］，１９９４，６６（９）：１ ５７８ Ｌｏｔｉｅｒｚｏ Ｍ，Ｈｅｎｒｙ Ｏ Ｙ Ｆ，Ｐｉｌｅｔｓｋｙ Ｓ，Ｔｏｔｈｉｌｌ Ｉ，Ｃｕｌｌｅｎ Ｄ，Ｋａｎｉａ Ｍ，Ｈｏｃｋ Ｂ，Ｔｕｒｎｅｒ Ａ Ｐ Ｆ．Ｂｉｏｓｅｎｓ Ｂｉｏｅｌｅｃｔｒｏｎ［Ｊ］，２００４， ２０：１４５ Ｋｕｂｏ Ｔ，Ｎｏｍａｃｈｉ Ｍ，Ｎｅｍｏｔｏ Ｋ，Ｓａｎｏ Ｔ，Ｈｏｓｏｙａ Ｋ，Ｔａｎａｋａ Ｎ，Ｋａｙａ Ｋ．Ａｎａｌ Ｃｈｉｍ Ａｃｔａ［Ｊ］，２００６，５７７：１ Ｂａｔｅｓ Ｓ Ｓ，Ｌ６ｇｅｒ Ｃ，Ｗｅｌｌｓ Ｍ Ｌ，Ｈａｒｄｙ Ｋ．Ｃａｎ Ｔｅｃｈｎｏｌ Ｒｅｐ Ｆｉｓｈ Ａｑｕａｔ Ｓｃｉ［Ｒ］，２００３，２ ４９８：３０ Ｑｉａｏ Ｆ Ｘ，Ｓｕｎ Ｈ Ｗ，Ｙａｎ Ｈ Ｙ，Ｒｏｗ Ｈ ０．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉａ［Ｊ］，２００６，６４：６２５ １３６ 应用化学 第２７卷 Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ Ｄｏｍｏｉｃ Ａｃｉｄ Ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ Ｐｏｌｙｍｅｒ ａｎｄ Ｉｔｓ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ＬＩ Ｌｉ．Ｌｉ“，ＺＨＯＵ Ｗｅｎ．Ｈｕｉ ， ，ＬＩ Ｙｏｎｇ ，ＬＩＮ Ｌｉ—Ｍｉｎｇ ，ＺＨＵ Ｘｉａｏ—Ｂｉｎ。， ＹＡＮＧ Ｈｕａｎｇ．Ｈａｏ ，ＷＡＮＧ Ｘｉａｏ—Ｒｕ ， （。Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆＯｃｅａｎｏｌｏｇｙ，ＣＡＳ，Ｑｉｎｇｄａｏ； Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｏｃｅａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｆｏ Ｃｈｉｎａ，Ｑｉｎｇｄａｏ； 。Ｔｈｅ Ｆｉｒｓｔ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｏｃｅａｎｏｇｒａｐｈｙ，ＳＯＡ，Ｑｉｎｇｄａｏ ２６６０６１； Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｅｎｔｅｒ．Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ｅｎｔｒｙ—Ｅｘｉｔ Ｉｎｓｐｅｃｔｉｏｎ＆Ｑｕａｒａｎｔｉｎｅ Ｂｕｒｅａｕ，Ｑｉｎｇｄａｏ） Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｄｏｍｏｉｃ ａｃｉｄ（ＤＡ）ｗａｓ ｕｓｅｄ ａｓ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｃｏｍｐｏｕｎｄ，ｉｔｓ ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ａｎａｌｏｇ １，３，５－ｐｅｎｔａｎｅｔｒｉ－ ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ ｗａｓ ｕｓｅｄ ａｓ ｔｅｍｐｌａｔｅ ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，４一ｖｉｎｙｌ ｐｙｒｉｄｉｎｅ ａｓ ｔｈｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｍｏｎｏｍｅｒ ａｎｄ ｅｔｈｙｌｅｎｅ ｇｌｙｃｏｌ ｄｉｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ ａｓ ｔｈｅ ｃｒｏｓｓ—ｌｉｎｋｉｎｇ ａｇｅｎｔ ｆｏｒ ｔｈｅ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｙ ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ ｐｏｌｙｍｅｒｓ （ＭＩＰｓ）．Ａｆｔｅｒ Ｓｏｘｈｌｅｔ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｔｅｍｐｌａｔｅ １，３，５－ｐｅｎｔａｎｅｔｒｉｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ，ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅｓ ｗｅｒｅ ｆｏｒｍｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｐｏｌｙｍｅｒ ｗｉｔｈ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｙ ｓｉｚｅ，ｓｈａｐｅ，ａｎｄ ｐｏｓｉｔｉｏｎｉｎｇ ｏｆ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ ｔｏ １，３，５’ ｐｅｎｔａｎｅｔｒｉｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ ａｎｄ ａｌｓｏ ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ａｎａｌｏｇ ｄｏｍｏｉｃ ａｃｉｄ．Ｔｈｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｙ ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ ｐｏｌｙｍｅｒ ｗａｓ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ａｉｄ ｏｆ ｅｑｕｉｌｉｂｒｉｕｍ ｂｉｎｄｉｎｇ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｂｉｎｄｉｎｇ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ｔｈｅ ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ ｐｏｌｙｍｅｒ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗ ｔｈａｔ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｎｏｎ－ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ ｐｏｌｙｍｅｒ，ｔｈｅ ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ Ｄｏｌｙｍｅｒ ｅｘｈｉｂｉｔｓ ａ ｍｕｃｈ ｈｉｇｈｅｒ ａｆｆｉｎｉｔｙ ｆｏｒ ｄｏｍｏｉｃ ａｃｉｄ．Ｔｈｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｙ ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ ｓｏｌｉｄ—ｐｈａｓｅ ｅｘｔｒａｃｔｉ０ｎ（ＭＩＳＰＥ）ｃ０ｌｕｍｎｓ ｗｅｒｅ ｐｒｅｐａｒｅｄ ｆｒｏｍ ａ １．０ ｍＬ ｇｌａｓｓ ｓｙｒｉｎｇｅ ｐａｃｋｅｄ ｗｉｔｈ １５０ ｍｇ ｏｆ ｔｈｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｙ Ｄｏｌｙｍｅｒ．Ｔｈｅ ＭＩＳＰＥ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｉｎ ａｎ ｏｆｆ－ｌｉｎｅ ｍｏｄｅ ｃｏｕｐｌｅｄ ｗｉｔｈ ｒｅｖｅｒｓｅｄ－ｐｈａｓｅ ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｖ ｗａｓ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ｔｏ ｅｘｔｒａｃｔ ｄｏｍｏｉｃ ａｃｉｄ ｆｒｏｍ Ｍｙｔｉｌｕｓ ｅｄｕｌｉｓ ａｎｄ ｓｅａｗａｔｅｒ ｓａｍｐｌｅｓ．Ｔｈｅ ｍｅａｎ Ｉ．ｅｃｏｖｅｒｉｅｓ ｏｆ ｄｏｍｏｉｃ ａｃｉｄ ｆｒｏｍ Ｍｙｔｉｌｕｓ ｅｄｕｌｉｓ ａｎｄ ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ ｓｅａｗａｔｅｒ ｓｐｉｋｅｄ ｗｉｔｈ ２ ｍｇ／Ｌ ｄｏｍｏｉｃ ａｃｉｄ ｗｅｒｅ（９３．４±４．９）％ａｎｄ（８９．７±３．２）％（ ＝３），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ ｄｏｍ０ｉｃ ａｃｉｄ．ｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｙ ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ ｐｏｌｙｍｅｒ，ａｍｎｅｓｉａ ｓｈｅｌｌｉｆｓｈ ｐｏｉｓｏｎｉｎｇ（ＡＳＰ），ｓｏｌｉｄ－ｐｈａｓｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
