一种内含肽介导的对重组蛋白定点聚乙二醇修饰的方法[发明专利]

来源：华佗健康网

专利内容由知识产权出版社提供

专利名称：一种内含肽介导的对重组蛋白定点聚乙二醇修饰的

方法

专利类型：发明专利发明人：刘海峰,王怡,刘沙申请号：CN201510219701.9申请日：20150504公开号：CN104774862A公开日：20150715

摘要：本发明公开了一种内含肽介导的对重组蛋白进行定点聚乙二醇修饰的方法，该方法包含：1、合成重组蛋白基因片段；2、构建重组蛋白基因-GyrA融合基因片段，并在GyrA基因C端加纯化标签，通过双酶切构建入表达载体中，并导入宿主细胞；3、发酵宿主细胞获得包含重组蛋白、内含肽和纯化标签的融合蛋白产物；4、在聚乙二醇(PEG)修饰物NH-PEG-COOH的氨基端合成加入一个半胱氨酸(Cys)，得到PEG活化修饰物；5、纯化步骤3所得的融合蛋白产物，用切割液于4℃进行切割；6、加入PEG活化修饰物进行PEG修饰；7、纯化PEG修饰的重组蛋白。本发明制备的PEG修饰蛋白，成分均一，纯度高，活性损失小。

申请人：武汉康复得生物科技股份有限公司

地址：430075 湖北省武汉市东湖开发区高新大道858号生物医药园A7展示中心

国籍：CN

代理机构：武汉智权专利代理事务所(特殊普通合伙)

代理人：尤会明

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