两面针镇痛缓释片的提取工艺研究_赵森

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两面针镇痛缓释片的提取工艺研究

赵 森,程 岚,姜 黎,吴世福

1

1

2

3

(1.辽宁中医药大学药学院,辽宁大连116600;2.沈阳市和平区八经社区卫生服务中心,辽宁沈阳110002;

3.沈阳红药制药有限公司,辽宁沈阳110044)

摘 要:目的:对两面针的提取工艺进行优选。方法:采用正交设计实验,以乙醇浓度、乙醇用量、提取时间作为优选因素,以两面针中所含的氯化两面针碱提取量和出膏率为定量指标,确定合理的醇提取工艺。结果:最佳提取工艺条件是:乙醇浓度为70%,加醇量为10.8倍,提取两次,第1次提取60min,第2次提取45min,出膏率及有效成分提取率较高,重现性好。结论:优化得到的提取工艺稳定可行,适合用于两面针镇痛缓释片的制备。

关键词:两面针镇痛缓释片;提取工艺;氯化两面针碱;HPLC

中图分类号:R971.1 文献标识码:A 文章编号:1000-1719(2009)02-0257-02

AStudyonExtractingProcedureofLiangmianzhenAnalgesicSustainedReleasedTabletZHAOSen1,CHENGLan1,JIANGL2i,WUSh-ifu3

(1.PharmaceuticalCollege,LiaoningUniversityofTCM,Dalian116600,Liaoning,China;2.ShenyangHepingBajingCommunityHealthServiceCenter,Shenyang110002,Liaoning,China;

3.ShenyangHongyaoPharmaceuticalCO.LTD.,Shenyang110044,Liaoning,China)

Abstract:Objective:TooptimizetheextractingprocedureofZanthoxylumnitidum(Roxb.)Dc.Methods:Theoptimumextrac-tionprocedurewasselectedwiththeorthogonaltestwhichistakingalcoholconcentration,alcoholvolumeandextractiontimeasthefactors,andtakingtheextractionrateofnitidinechlorideandthecontentofnitidinechloridebyHPLCasevaluationtargets.

Results:Theoptimumexctractionprocedurewasasfollows:Zanthoxylumnitidum(Roxb.)DC.wasextraxtedwith7O%alcoholfortwice,addedtentimesvolumeextractingfor60minutesforthefirsttime,thenaddedeighttimesvolumeextractingfor45minutesforthesecondtime;Conclusion:Theoptimumextractingprocedureisscientific.reasonableandstable.

Keywords:LiangmianzhenanalgesicSustainedreleasedtablet;Extractionprocedure;Nitidinechloride;HPLC

两面针为芸香科花椒属植物两面针Zanthoxylumnitidum(Roxb.)DC.的干燥根,是临床常用中药,为5中国药典6所收载。两面针镇痛片具有清热解毒,理气活血,通络止痛的作用。用于瘀热郁结而致的溃疡病、肠痉挛、胆囊炎、肝癌等引起的腹部疼痛。原提取工艺繁琐,氯化两面针碱提取率低。为改进工艺,采用正交实验法,以氯化两面针碱含量和出膏率为定量指标,对两面针的提取工艺进行优化,为制备缓释剂型提供依据。1 仪器与试药Angilent1100高效液相色谱仪;HPCHEM色谱工作站。METTLERAB135-S十万分之一电子天平;量,结果见表2。表1 阿司匹林加样回收率试验结果(n=6)

取样量(g)0.079320.076670.074240.77140.082630.07123

样品含量(mg)5.01754.84984.69614.87965.22684.5057

4.806对照品加入量

(mg)

实测总量(mg)9.79489.57129.47109.631510.18859.2300

回收率(%)99.4098.2499.3598.87103.2498.30

99.57

1.9

平均值(%)

RSD(%)

AY220万分之一电子天平(日本岛津);DS3120超声清洗机(天津超声技术有限公司);DZF-52旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);SHB-3循环水多用真空泵(郑州杜甫仪器厂);DFT高速粉碎机;RH-4数显恒温水浴锅(江苏省金坛市荣华仪器厂)。氯化两面针碱对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号:848-9901);两面针药材(购于广西省药材公司);甲醇、乙腈为色谱试剂,水为双蒸水,其余试剂均为分析纯。2 方法与结果2.1色谱条件 色谱条件色谱柱:依利特HypersilODS表2 样品含量测定结果

批号070401070402070403

阿司匹林含量(mg/片)21.120.619.6

收稿日期:2008-06-09

作者简介:赵森(1981-),男,辽宁大石桥人,药师,硕士研究生,研究方

向:中药新剂型及新药开发。

通讯作者:程岚,女,副教授,硕士,主要从事中药新剂型及中药新药研究。

3 讨 论中国药典2005年版二部阿司匹林项下采用酸碱滴定法测定其中阿司匹林含量;阿司匹林肠溶胶囊项下采用高效液相色谱法测定阿司匹林含量。由于菊蓝抗流感片为中药制剂,成分复杂,含有其他酸性成分,所以不宜采用滴定法测定含量。由于高效液相色谱法快速、准确、重现性好,因此本质量标准选高效液相色谱法作为阿司匹林含量测定方法。参考文献[1] 复方阿司匹林搽剂标准编号:WS-10001-(HD-1326)-2003.[2] 国家药典委员会.中国药典2005版二部[M].北京:化学工业出

版社,2005.

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(4.6mm@250mm,2.5Lm);柱温:室温;检测波长:328nm;流速:1.0mL/min;流动相:0.02mol/L磷酸二氢钾溶液(加磷酸调pH3.17)-乙腈(55B45);进样量:10LL。2.2 对照品溶液制备 精密称取在120e减压干燥至恒重的氯化两面针碱对照品12.24mg,置50mL容量瓶中,加甲醇适量超声使溶解,放冷,用甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。2.3 供试品溶液的制备 取两面针提取物0.05g,精密称定,定容至100mL容量瓶中,超声20mm,放冷,用微孔滤膜(0.45Lm)滤过,取续滤液作为供试品溶液。2.4 线性关系考察 取氯化两面针碱对照品贮备液配制成0.02448mg/mL的对照品溶液,分别进样2.5、5、10.0、12.5、15.0、20LL,回归方程为Y=233.15X-216.74,r=0.9994,表明进样量在0.0612~0.4896Lg范围内线性关系良好。2.5 精密度试验 取同一供试品,连续进样6次,结果各峰的峰面积和保留时间RSD均小于2.0%(n=6)。表明精密度良好。2.6 稳定性试验 取供试品溶液,分别在0、2、4、6、8h进样测定,结果各峰的峰面积和保留时间的RSD均小于3.0%(n=6)。表明稳定性良好。2.7 重复性试验 取同一样品5份,按照供试品溶液制备方法制备,分别进样测定,结果各峰的峰面积和保留时间RSD均小于3.0%(n=6)。表明重复性良好。2.8 回收率试验 取两面针提取物,研细,过60目筛,精密称取细粉适量(相当于氯化两面针碱016mg)。置于100mL容量瓶里,加入氯化两面针碱对照品(0.2448mg/mL)2.5mL加甲醇适量,超声30min,放冷,甲醇定容至刻度,用微孔滤膜(0.45Lm)滤过,取续滤液,作为供试品溶液,平均回收率为98.6%,RSD小于3.0%(n=6)。2.9 测定法 样品按2.3项下处理后,按上述色谱条件测定。2.10 正交设计和实验结果 两面针的提取工艺为醇提取工艺,通过预实验,发现用少量的酸浸润,提取率增加。本试验以乙醇浓度、乙醇用量、提取时间作为主要影响因素。正交实验因素水平见表1。表1 因素水平表

乙醇浓度(%)

A123

908070

乙醇量(倍)

B

10,88,66,5

提取时间(min)

C

120,9090,6060,45

辽宁中医杂志2009年第36卷第2期

60min,第2次8倍量,提取45min。测定结果见表4。表2 正交试验数据及结果

因素实验

序号123456789K1K2K3极差(R)

A

B

C

氯化两面针碱含量(mg/g)31.755330.557639.449933.504141.640139.065733.646235.014137.0183

出膏率(%)11.4713.0712.468.817.7310.08.6710.2710.74

综合评分0.

0.0.0.0.90.0.0.0.

808784039497752183668717750181888621

乙醇提取

乙醇量

浓度时间1111221332122232313133213320.8660.7700.8330.8200.8320.8180.8100.8940.8450.05

0.124

0.027

表3 方差分析

因素

偏差平方和

自由度(n)

2

22

F比MS5.00023.0002

显著性P<0.051.000

乙醇浓度(A)0.005

乙醇用量(B)0.023提取时间(C)0.001

误差0.00 注:F0.05(2.00。.2)=19批次123

出膏率(%)

8.818.738.92

表4 工艺重现性考察结果

氯化两面针碱含量(mg/g)

40.241.641.1

称取50g药材,粉碎,以0.1mol/L的盐酸浸泡4

1h,按照L9(3)正交实验安排表进行回流提取,以氯化两面针碱提取效率和出膏率为指标,按上述方法测定干膏中氯化两面针碱的含量,结果见表2,方差分析见表3。 综合评分=(氯化两面针碱含量/最大值@0.6+出膏率/最大值@0.4)@100%从正交实验结果的直观分析和方差分析可知,因素影响大小顺序为B>C>A,最佳提取工艺条件是C无显A1B3C3,其中因素B有显著性影响,而因素A、著影响,为降低生产成本,确定最佳提取工艺为:A1B3C1。即用70%的乙醇溶液提取2次,第1次10倍量,提取60min,第2次8倍量,提取45min。2.11 工艺重现性考察 取3份两面针药材,每份50g,用70%的乙醇溶液提取2次,第1次10倍量,提取 结果表明,此方法稳定可行。3讨论与结论为合理选择正交设计各水平,对提取溶剂(0、20%、40%、60%、80%、95%的乙醇)是否加酸进行了预试。80%乙醇提取物中氯化两面针碱的含量最高,且加酸后提取物中氯化两面针碱的含量明显增加,故在正交实验中,设计乙醇浓度的3个水平分别为70%、80%、90%。另外,对提取次数也进行了考察,提取2次,氯化两面针碱转移率达90%。 提取工艺正交考察中结果分析时,如果单纯用有效成分含量为指标不全面,故以有效成分含量与出膏率综合评价得分为评定标准。其中,采用HPLC法测定氯化两面针碱的含量。 确定本次实验的最佳提取工艺是:用70%乙醇,提取2次,第1次以10倍量乙醇提取60min,第2次以8倍量乙醇提取45min,出膏率及有效成分提取率均较高,且重现较好。优选得到的工艺稳定可行,为两面针镇痛缓释片的制备提供可靠依据。参考文献

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