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医学院 《生物化学检验》 课程教案

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****医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 2 教材 生物化学检验 教学目的和要 教 求 学 教学内容 要 教学 求 重点难点 教学媒体 复习旧课 章节 第一章 绪论 补充一 生物化学检验的标本 1、掌握生物化学检验的任务;标本的采集和处理。 2、熟悉生物化学检验的研究领域;影响检验结果的生物学因素。 3、了解临床生物化学检验的发展。 绪论;生物化学检验的标本。 重点:标本的采集和处理。 难点:临床生物化学检验的发展;影响检验结果的生物学因素。 课堂讲授为主,多媒体教学为辅 分析化学、生物化学等概念及其主要内容 一、临床生物化学检验的研究领域 (一)概念: (二)任务:以检验方法、新技术的开发应用和检验质量的保证为主,并对检验结果及其临床意义作出评价,为临床提供正确、有用的实验室信息。二、临床生物化学检验的研究进展。 (三)生物化学检验包括:①普通生化检验;②特殊生化检验;③急诊生化检验;④床旁生化检验。 二、临床生物化学检验的发展 教 学 过 程 讲 授 新 课 三、标本的采集 (一)检验申请单 (二)血液标本的采集:静脉采血法(最常见);动脉采血法;真空采血法。 (三)尿液标本的采集:采集方法;注意事项 (四)特殊标本的采集: 四、标本的处理 (一)抗凝剂;(二)防腐剂;(三)标本的分离储存和转运 五、影响检验结果的生物学因素 (一)生理因素的影响 (二)饮食和药物的影响 课堂常见的采血方法有哪几种? 提问 课堂掌握生物化学检验的任务;标本的采集和处理;熟悉生物化学检验的研究领域;影小节 响检验结果的生物学因素。 布置标本在贮存过程中应该注意哪些事情? 作业 参考张纯洁.生物化学检验.第1版,北京:高等教育出版社,2007 书目李萍.生物化学和生物化学检验.第2版,北京:人民卫生出版社,2002 周新.生物化学和生物化学检验.第3版,北京:人民卫生出版社,2003

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教研室 生化检验 课程 生物化学检验 章节 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 2 教材 生物化学检验 第二章 生物化学检验实验室基本知识 教学1、掌握实验用纯水的三级标准;实验方法的分级、标准品分级及相互之间的联目的系。 和要 2、熟悉纯水的制备方法;实验方法选择的的原则和步骤。 教 求 3、了解水的纯度检查。 学 教学实验用纯水;实验方法的选择。 要 内容 求 教学 重点:掌握实验方法的分级、标准品分级及相互之间的联系。 重点难点 难点:水的纯度检查;方法的分级、标准品分级及相互之间的联系。 教学媒体 复习旧课 讲 教 授 新 学 课 过 程 课堂讲授为主,多媒体教学为辅 生物化学检验标本的采集和处理 一、实验用纯水 (一)纯水的制备方法(电阻率越高越好) 1、蒸馏法:将自来水(或天然水)在蒸馏器中加热汽化,然后冷凝水蒸气即得蒸馏水。蒸馏水在25℃时其电阻率为1×10Ω·cm左右。 离子交换法:25℃时电阻率达5×10Ω·cm以上;3、电渗透法:电阻率一般在10~10Ω·cm 4、炭吸附法;5、超滤膜法;6、混合纯化系统 (二)水的纯度检查 1、电阻率:纯水>2MΩ·cm;2、可溶性硅检验;3、细菌菌落计数;4、实验用纯水标准:CAP标准,美国NCCLS标准 55实验方法的选择 1、实验方法选择的目的: 2、实验方法的分级: ①决定性方法;②参考方法;③常规方法。 3、标准品的分级: ①一级标准品(原级参考物);②二级标准品(次级参考物);③校准品。 4、实验方法选择的原则:实用性;可靠性。 5、实验方法选择的步骤 ①广泛查阅文献; ②选定候选方法; ③候选方法的初步实验:包括标准曲线和重复性;质控血清和新鲜标本的重复实验;分析浓度不同的标本,与公认的参考方法的结果对比。 课堂试举例说明你所知道的某检测指标的决定性方法。 提问 课堂掌握实验用纯水的三级标准;实验方法的分级、标准品分级及相互之间的联系,小节 熟悉纯水的制备方法;实验方法选择的的原则和步骤。 布置试比较决定性方法,参考方法和常规方法具体有哪些不同。 作业 参考张纯洁.生物化学检验.第1版,北京:高等教育出版社,2007 书目周新.生物化学和生物化学检验.第3版,北京:人民卫生出版社,2003 2

***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 章节 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 2 教材 生物化学检验 第二章 生物化学检验实验室基本知识 分类和表示方法,方法评价实验尤其是回收试验和干教学1、 掌握实验误差的定义、扰试验的原理和操作。 目的和要 2、 熟悉方法评价的基本内容和步骤,方法评价的指标。 教 求 3、了解方法性能判断的指标。 学 教学要 内容 实验方法的评价 求 教学 重点:掌握方法评价实验尤其是回收试验和干扰试验的原理和操作。 重点难点 难点:方法性能判断的指标。 教学课堂讲授为主,多媒体教学为辅 媒体 复习实验用纯水;实验方法的选择 旧课 一、实验误差:是量值的给出值与其客观真值之差。 (一)实验误差的分类:1、系统误差:包括恒定系统误差和比例系统误差;2、随机误差 (二)实验误差的表示方法:1、平均误差;2、标准差;3、绝对误差和绝对偏差;4、相对误 差和相对偏差;5、变异系数。 二、方法评价的基本内容和步骤 三、方法评价指标:1、精密度:表示测定结果中随机误差大小程度;2、准确度:是指测定结果与真值接近的程度;3、特异度和干扰;4、检测能力: 四、评价实验 教 讲 (一)重复性实验:1、目的;2、实验形式与方法;3、注意事项。 授 (二)回收试验:1、方法;2、回收率计算;3、注意事项;4、举例。 学 新 (三)干扰试验:1、方法;2、举例;3、注意事项 课 (四)方法比较试验:1、方法;2、比较方法的选择;3、注意事项;4、统计处理。 五、方法性能判断 过 程 (一)方法学性能标准 1、允许分析误差:表示95%标本的允许误差限度,或95%的病人标本其误差应小于这个限度,用EA表示。 2、医学决定水平:为对临床病人的诊疗具有医学判断作用的临界分析物浓度,用XC表示。 (二)方法性能判断指标 1、单值判断指标:计算公式;应用举例。 2、可信区间判断指标(了解) 课堂1、什么叫精密度;2、什么叫准确度?3、什么叫干扰? 提问 课堂掌握方法评价实验尤其是回收试验和干扰试验的原理和操作。 小节 布置简述回收试验和干扰试验的注意事项。 作业 参考安乙敏主编:生化检验学 成都 四川科学技术出版社 1994年第1版 书目张纯洁.生物化学检验.第1版,北京:高等教育出版社,2007 李萍.生物化学和生物化学检验.第2版,北京:人民卫生出版社,2002 周新.生物化学和生物化学检验.第3版,北京:人民卫生出版社,2003

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 章节 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 2 教材 生物化学检验 第二章 生物化学检验实验室基本知识 教学1、掌握诊断性能评价的指标。 目的2、熟悉参考值和医学决定水平的概念。 和要 3、了解受试者工作曲线的应用和用途。 求 教 学 教学实验的诊断性能评价。 内容 要 教学 重点:诊断性能评价的指标和应用。 求 重点难点 难点:受试者工作曲线的应用和用途。 教学媒体 复习旧课 讲 教 授 新 学 课 过 程 课堂讲授为主,多媒体教学为辅 实验方法的评价 一、参考值和医学决定水平 (一)参考值和参考范围 均值(X)即为参考值;以健康人群的95%分布区间((二)医学决定水平 X±2S)即为参考范围。 二、诊断灵敏度、特异度、预测值和似然比 (一)诊断实验和金标准 1、诊断试验:指一般实验检查方法,具有费用低,操作方便,对病人无损害,快速等优点。 2、金标准:指通过活检、尸检、外科手术、随访等所作出的决定性诊断。 (二)诊断敏感度:在金标准诊断为“有病”的患者中用诊断试验检出的阳性百分率,即为真阳性率 (三)诊断特异度:金标准诊断为“无病”的非患病者用诊断试验检出的阴性百分率,为真阴性率 (四)诊断准确度:用诊断试验能准确划分患者和无病者的百分率。 (五)预测值:为一项诊断试验确定或排除某疾病存在与否的诊断概率。 (六)似然比: 帮助医生判断病人患病的可能性。 (七)诊断试验评价指标的应用 三、受试者工作曲线(ROC曲线) 1、ROC曲线的绘制;2、ROC曲线的应用。 课堂方法学性能标准有何意义? 提问 课堂掌握诊断性能评价的指标;熟悉参考值和医学决定水平的概念;了解受试者工小节 作曲线的应用和用途。 布置简述如何进行方法学性能分析。 作业 参考张纯洁.生物化学检验.第1版,北京:高等教育出版社,2007 书目周新.生物化学和生物化学检验.第3版,北京:人民卫生出版社,2003 李艳.生物化学检验一理论与临床.北京:人民卫生出版社,2003

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 章节 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 2 教材 生物化学检验 补充二 生物化学检验的质量控制 教学1、掌握临床生化检验全过程质量控制的主要内容及室内质量控制的主要方法。 目的2、熟悉室内质量控制的任务及失控后的处理和原因分析。 和要 3、了解多规则质控技术。 求 教 教学学 内容 全过程质量控制的主要内容;室内质量控制的主要方法。 要 教学 重点:临床生化检验全面质量控制的主要内容及室内质量控制的主要方法。 求 重点难点 难点:室内质量控制的主要方法。 教学媒体 复习旧课 教 讲 授 学 新 课 过 程 课堂讲授为主,多媒体教学为辅 实验的诊断性能评价 一、全面质量控制的内容及影响测定结果的常见因素: (一)全面质量控制的内容: 1、分析前质量保证:① 人员的素质和稳定性;② 实验室的设置和工作环境;③ 实验仪器的质量保证;④病人准备。⑤ 标本采集和处理。 2、分析中的质量控制:室内质控和结果分析。 3、分析后的质量评估:参加室间质量评价。 二、室内质量控制 (一)室内质量控制的任务:1、人员培训;2、建立标准化操作规程;3、仪器的检定和校准;4、质控品:包括种类、特性、正确使用和保存。 (二)室内质量控制的主要方法: 1、确定质量目标:包括总分析误差目标和分析变异目标。 2、设定靶值和控制限:稳定性较长的质控品;稳定性较短的质控品;特殊情况。 3、绘制Levey-Jennings质控图:a、方法b、结果分析; 4、多规则质控技术:a、方法b、判断规则; 5、失控后处理及原因分析。 课堂临床生化检验质量控制的目的是什么? 提问 课堂临床生化检验全过程质量控制的主要内容及室内质量控制的主要方法;室内质小节 量控制的任务及失控后的处理和原因分析;多规则质控技术。 布置如何设定稳定性较长的质控品的靶值和控制限? 作业 参考书目 张纯洁.生物化学检验.第1版,北京:高等教育出版社,2007 周新.生物化学和生物化学检验.第3版,北京:人民卫生出版社,2003 孙荣武,王鸿利.临床实验诊断学.上海:上海科学技术出版社

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 章节 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 2 教材 生物化学检验 补充二 生物化学检验的质量控制 教学1、掌握室间质量评价的概念和方法,VIS评分法和PT方案的操作和判断指标。 目的2、熟悉试剂盒的选择和评价。 和要 3、了解实验室认可的定义和组成。 教 求 学 教学室间质量评价;实验室认可;试剂盒的选择和评价。 内容 要 教学 重点:室间质量评价的概念和方法;VIS评分法和PT方案的操作。 求 重点难点 难点:VIS评分法和PT方案的判断指标;试剂盒的选择和评价。 教学课堂讲授为主,多媒体教学为辅 媒体 复习全过程质量控制的主要内容;室内质量控制的主要方法。 旧课 一、室间质量评价 (一)室间质量评价的定义:多家实验室分析同一标本,由外部机构收集、分析和反馈实 验室检测结果,评定实验室常规工作的质量,观察试验的准确性,建立起各实验室分析结果 之间的可比性。 (二)室间质评的目的和条件: 1、目的:见书 2、条件:①组织者;②参加单位:需有完善的室内质控制度;③要有良好质控血清作为调查 样本;④调查样本的定值方法要可靠,应有参考实验室作后盾;⑤统一测定方法及校准品。 (三)室间质评的方法: 教 讲 1、能力比对检验,即PT方案:方法、计算、判断指标、失控后处理及用途和意义。 授 新 2、变异指数得分法,即VIS评分法:方法、计算、判断指标和失控后处理。 学 课 二、实验室认可 (一)定义:由权威性专业组织按照一定的标准对实验室或实验室工作人员进行检查、考核,过 认可能够开展或胜任某些工作,并授予资格的过程。 (二)基本组成:1、认可委员会;2、一系列标准及档案;3、经选拔和培训并取得资格的评审程 员。 三、试剂盒的选择和评价 1、生化试剂盒的发展历史 2、试剂盒的选择和评价:a、外包装;b、质量初评;c、性能特征评估(细评):包括准确度、精密度、抗干扰能力、线性范围和稳定性。 课堂评价VIS评分法的优缺点。 提问 课堂室间质量评价的概念和方法,VIS评分法和PT方案的操作和判断指标;实验室小节 认可的定义和组成;试剂盒的选择和评价。 布置描述我国室间质评的标准。 作业 参考张纯洁.生物化学检验.第1版,北京:高等教育出版社,2007 书目周新.生物化学和生物化学检验.第3版,北京:人民卫生出版社,2003 孙荣武,王鸿利.临床实验诊断学.上海:上海科学技术出版社 6

***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 章节 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 2 教材 生物化学检验 第三章 光谱分析技术 教学1、掌握分光光度技术的基本原理及定性和定量方法。 目的2、熟悉分光光度计的的基本结构和操作方法光源检查和波长校正、原子分光光度和要 计的类型和影响荧光分析的因素。 教 求 3、了解其他光谱分析技术的基本原理及在生化检验中的应用。 学 教学光谱分析技术。 要 内容 求 教学 重点:吸收光谱分析法的测定原理 重点难点 难点:发射光谱分析法和散射光谱分析法的原理及应用: 教学课堂讲授为主,多媒体教学为辅 媒体 复习室间质量评价;实验室认可;试剂盒的选择和评价。 旧课 一、光谱检验技术: (一)吸收光谱分析法; 1、 可见-紫外光分光光度法: ① 检测原理; ②分光光度计的基本结构和操作方法; ③分光光度计的光源检查和波长校正:a、光源检查即波长初步检查;b、波长校正 教 学 过 程 讲 授 新 课 ③分光光度技术的定性和定量方法; (二)其它光谱分析技术: 1、火焰光度法基本原理和仪器组成; 2、原子吸收分光光度法的基本原理;仪器组成和特点; 3、荧光光度分析法 ①荧光分析的基本原理; ②影响荧光分析的因素; ③荧光分析技术的应用。 课堂1、光谱检验技术分类的依据是什么? 提问 2、可见光的波长范围是多少? 课堂掌握光谱分析中的对比法、摩尔吸收系数法、荧光法和比浊法测定的方法原理,小节 在生化检验中的应用及注意事项; 布置1、光谱检验技术的分类2、分光光度计的检测原理。 作业 参考沈霞,李定国,等.现代生物化学检验与临床实践.上海:上海科学技术文献出版社,书目1999 陈惠黎.生物化学检验技术.北京:人民卫生出版社,1990年 张纯洁.生物化学检验.第1版,北京:高等教育出版社,2007 7

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教研室 生化检验 课程 生物化学检验 章节 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 2 教材 生物化学检验 第五章 酶学分析技术 教学1、掌握酶活性的国际单位定义,酶活性浓度的表示方法及酶活性单位的计算公目的式。 和要 2、熟悉酶促反应进程;酶促反应底物动力学。 求 3、了解Km值、Vmax值的应用及Km和Vmax的测定。 教 学 教学要 内容 求 教学 重点难点 教学媒体 复习旧课 教 讲 授 学 新 课 过 程 酶活性测定的基本知识。 重点:酶活性的国际单位定义以及酶活性单位的计算公式。 难点:酶活性单位的计算公式。 课堂讲授为主,多媒体教学为辅 光谱分析技术。 一、 酶活性的表示方法 (一)酶活性单位: 酶的国际单位:在特定条件下,1分钟能转化1微摩尔底物(μmol/ min)的酶量为一个国际单位。 Katal单位:即每秒钟转化1个摩尔底物(mol /s)的酶量。 (二)酶活性浓度:每单位体积所含的酶活性单位,以IU/L或U/L来表示。 二、酶活性单位的计算 三、酶促反应进程:包括延滞期、线性期和偏离线性期。 四、酶促反应底物动力学 (一)米氏常数K的定义和应用 (二)Vmax的应用 (三) Km和Vmax的测定 课堂酶含量如何表示? 提问 掌握酶活性的国际单位定义,酶活性浓度的表示方法及酶活性单位的计算公式;课堂熟悉酶促反应进程;酶促反应底物动力学;了解Km值、Vmax值的应用及Km和小节 Vmax的测定。 布置酶活性的国际单位定义是什么? 作业 参考张纯洁.生物化学检验.第1版,北京:高等教育出版社,2007 书目王坤,施前.实用诊断酶学.第2版,上海:上海医科大学出版社,2000 朱立华.实验诊断学.北京:北京医科大学出版社,2002

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 章节 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 2 教材 生物化学检验 第五章 酶学分析技术 1、掌握酶活性测定的连续监测法和定时法的概念、区别和结果的计算方法;酶教学偶联反应的在酶活性测定和酶法分析代谢物中的应用;以NAD(P)H为指示目的系统和色素原底物在酶活性测定中的应用; 和要 2、熟悉酶学分析在临床诊断上的应用。 求 教 3、了解同工酶测定和酶活性测定最适条件的选择。

学 酶活性测定方法及酶学分析的类型;同工酶测定;酶学分析在临床诊断上的应要 教学内容 用;酶活性测定最适条件的选择 求 教学 重点:酶活性测定的连续监测法和定时法的概念、区别和结果的计算方法; 重点难点 难点:酶偶联反应的在酶活性测定和酶法分析代谢物中的应用。 教学媒体 复习旧课 讲 教 授 新 学 课 过 程 课堂讲授为主,多媒体教学为辅 酶活性测定的基本知识。 一、酶催化活性的测定方法 : (一)测定酶促反应速度的两类方法: 1、定时法:有别于终点法(end-point assay)和两点法(two-point assay) 2、连续监测法:典型的酶促反应过程一般包括延滞期(lag phase)、线性期(linear phase)和非线性期(nonlinear phase)。 (二)酶活性测定方法 1、直接法: ①基于NADH或NADPH的反应原理 ;②基于人工合成色素原底物反应原理 ③基于氧的消耗;④其他 2、间接法:①化学法;②酶偶联法。 二、同工酶测定 三、酶学分析在临床诊断上的应用 肝脏:ALT和AST;心梗:AST、LDH和CK统称为心肌酶,CK-MB更好。 胰腺炎:淀粉酶和脂肪酶;骨骼:ALP;骨骼肌:CK-MM;前列腺:ACP。 四、酶活性测定最适条件的选择 课堂连续监测法比定时法好在哪里? 提问 课堂酶活性测定的连续监测法和定时法的概念、区别和结果的计算方法;酶偶联反小节 应的在酶活性测定和酶法分析代谢物中的应用。 布置举例说明酶活性测定原理 作业 参考张纯洁.生物化学检验.第1版,北京:高等教育出版社,2007 书目王坤,施前.实用诊断酶学.第2版,上海:上海医科大学出版社,2000 朱立华.实验诊断学.北京:北京医科大学出版社,2002

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教研室 生化检验 课程 生物化学检验 章节 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 2 教材 生物化学检验 第九章 血浆蛋白质检验 教学1、掌握血浆蛋白质的组成、功能及分类;个别血浆蛋白质(前白蛋白、白蛋白)目的的来源和生理功能;血清总蛋白的测定原理和方法。 和要 2、熟悉急性时相反应蛋白的概念和种类。 教 求 3、了解其他蛋白质的来源和生理功能。 学 教学体液蛋白质的基本情况;血清总蛋白测定。 要 内容 求 教学 重点:血浆蛋白质的组成、功能及分类;血清总蛋白的测定原理和方法。 重点难点 难点:急性时相反应蛋白的概念和种类。 教学媒体 复习旧课 教 讲 授 学 新 课 过 程 课堂讲授为主,多媒体教学为辅 酶活性测定方法及酶学分析的类型 一、血浆蛋白质的组成、功能及分类 (一)血浆蛋白质的组成:血浆蛋白质有500种左右,绝大多数血浆蛋白质由肝脏合成,还有少量由其它组织细胞合成。 (二)血浆蛋白质的功能:①营养作用。②维持血浆的胶体渗透压。③维持血浆的正常pH。④运输作用。⑤免疫与防御功能。⑥催化作用。⑦代谢。⑧凝血、抗凝血及纤溶作用等。 (三)血浆蛋白质的分类:1、盐析法:将血浆蛋白质分为白蛋白和球蛋白两大类;2、醋酸纤维素薄膜电泳:将血浆蛋白质分为白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、纤维蛋白原和γ-球蛋白六部分。 二、个别血浆蛋白质:包括前白蛋白、白蛋白等十一种。 (一)来源 (二)生理功能 三、疾病时的血浆蛋白质 急性时相反应蛋白的概念和种类。 四、血清总蛋白测定 1、凯氏定氮法:是蛋白质测定的参考方法。 2、双缩脲法:是目前临床上最常规的方法。 3、酚试剂法;4、比浊法; 5、染料结合法;6、紫外分光光度法; 7.折光测定法 课堂何为急性时相反应蛋白?课本中介绍的血浆蛋白质哪些属于急性时相反应蛋提问 白? 课堂掌握血浆蛋白质的组成、功能及分类;个别血浆蛋白质(前白蛋白、白蛋白)小节 的来源和生理功能;血清总蛋白的测定原理和方法。 布置简述双缩脲法测定血清总蛋白的原理。 作业 参考张纯洁.生物化学检验.第1版,北京:高等教育出版社,2007 书目周新.生物化学和生物化学检验.第3版,北京:人民卫生出版社,2003

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 章节 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 1 教材 生物化学检验 第九章 血浆蛋白质检验 教学1、掌握血清白蛋白的测定原理和方法。 目的2、熟悉血清球蛋白和纤维蛋白原的测定方法。 和要 3、了解尿液蛋白和脑脊液蛋白的检测。 教 求 学 教学体液蛋白质测定。 内容 要 教学 重点:血清白蛋白的测定原理和方法。 求 重点难点 难点:血清白蛋白的方法学评价。 教学课堂讲授为主,多媒体教学为辅 媒体 复习体液蛋白质的基本情况;总蛋白测定。 旧课 一、体液蛋白质测定 测定方法可概括为:用免疫化学法特异地定量分析个别蛋白质;通过电泳技术 将蛋白质初步分离再半定量;用化学方法对体液蛋白质定性或定量。 (一) 血清白蛋白测定 1、染料结合法:最常用的两种染料是溴甲酚绿(BCG)和溴甲酚紫(BCP)。BCG 法为推荐的方法。 评价:BCP法特异性较高,灵敏度较低,且与非人源性白蛋白结合力弱,不适 合其他动物标本的测定; 特异性较低,30秒内对白蛋白特异,30秒后非特异性增高,教 讲 BCG法灵敏度较高, 授 故应尽量在30秒内完成测定。 新 2、盐析法:高浓度的中性盐可以沉淀水溶液中的蛋白质,是因为大量中性盐破学 课 坏了蛋白质的水化膜,中和其所带的电荷从而使蛋白质分子聚集而沉淀。球蛋 白可被较低浓度的中性盐沉淀,而白蛋白仍留在溶液中,分离后可测定溶液中过 的白蛋白含量。 3、电泳法:醋酸纤维素薄膜电泳或琼脂糖凝胶电泳。 程 4、免疫化学法 (二)血清球蛋白测定:不需单独测定血清球蛋白含量,用总蛋白含量减去白蛋白含量即为血清中球蛋白的含量。 (三)血浆纤维蛋白原测定 (四)尿液蛋白测定 课堂简述溴甲酚绿法测定白蛋白的原理。 提问 课堂血清白蛋白的测定原理和方法。血清球蛋白和纤维蛋白原的测定方法;尿液蛋小节 白和脑脊液蛋白的检测。 布置为什么选择溴甲酚绿(BCG)法作为白蛋白测定的常规方法? 作业 参考张纯洁.生物化学检验.第1版,北京:高等教育出版社,2007 书目周新.生物化学和生物化学检验.第3版,北京:人民卫生出版社,2003

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 章节 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 2 教材 生物化学检验 教学目的和要 求 教 教学学 内容 要 教学 求 重点难点 教学媒体 复习旧课 第十章 血糖及糖复合物检验 1、掌握糖尿病的诊断标准、病因学分型;血糖的测定方法(GOD法和己糖激酶法)。 2、熟悉胰岛素降血糖的主要机制。 3、了解糖代谢紊乱的各种疾病。 1、概述 2、体液葡萄糖测定。(部分) 重点:糖尿病的诊断标准、病因学分型;血糖的测定方法(GOD法和己糖激酶法) 难点:胰岛素降血糖的主要机制。 课堂讲授为主,多媒体教学为辅 体液蛋白质测定 一、 血糖的来源、去路和调节 (一)糖的来源与去路: 1、 来源:①食物;②肝糖原分解;③糖异生作用;④单糖转化 2、 去路:①氧化分解供能;②合成糖原;③转变为非糖物质;④转变成其它糖及糖衍生物 (二)血糖浓度的调节:肝脏、神经系统、激素的调节作用。 二、糖代谢紊乱 (一)概念:高血糖症是指空腹血糖浓度超过7.3mmol/L。 (二)糖尿病的诊断标准 讲 教 授 新 学 课 过 程 症状+随机血浆葡萄糖≥11.1mmol/L(200mg/dl),或空腹血浆葡萄糖≥7.0mmol/L(126mg/dl),或口服糖耐量试验中两小时血浆葡萄糖≥11.1mmol/L(200mg/dl)。 (三)糖尿病的分类 分为:1型糖尿病;2型糖尿病;继发性糖尿病 (四)主要代谢异常:1、糖代谢异常;2、脂类代谢异常 三、血糖测定:按原理可分为3类:无机化学法、有机化学法和酶法。 (一)无机化学法:氧化亚铜法 (二)有机化学法:邻甲苯胺法的原理和方法学评价。 (三)酶法:常规方法是葡萄糖氧化酶法,参考方法是己糖激酶法。 1、己糖激酶法:原理见书;2、葡萄糖氧化酶(GOD)法:原理见书。 课堂糖尿病的最新分型标准是什么? 提问 课堂糖尿病的诊断标准、病因学分型;血糖的测定方法;胰岛素降血糖的主要机制。 小节 糖代谢紊乱的各种疾病。 布置我国临床检验中心推荐的血糖测定常规方法是( ) 作业 A. GOD法 B. 己糖激酶法 C. 邻甲苯胺法 D. 葡萄糖脱氢酶法 参考书目 何戎华.糖尿病现代诊疗.江苏:江苏科学技术出版社,2000 张纯洁.生物化学检验.第1版,北京:高等教育出版社,2007 12

***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 章节 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 1 教材 生物化学检验 第十章 血糖及糖复合物检验 教学1、掌握葡萄糖耐量试验的原理和方法。 目的2、熟悉各种糖尿病监控指标的生理意义和测定方法。 和要 求 3、了解其他体液葡萄糖的测定。 教 教学学 内容 要 求 教学 重点难点 教学媒体 1、葡萄糖耐量试验的原理和方法。 2、各种糖尿病监控指标的生理意义和测定方法。 重点:葡萄糖耐量试验的原理和方法。 难点:葡萄糖耐量试验的原理和方法。 课堂讲授为主,多媒体教学为辅 复习糖尿病的诊断标准、病因学分型;血糖的测定方法;胰岛素降血糖的主要机制。 旧课 上次课选择题答案为A 一、糖耐量试验:口服或注射一定量葡萄糖后,每间隔一定时间测定血糖水平。 (一)口服葡萄糖耐量试验(OGTT) 1、适应症 2、糖耐量试验的标准化 3、临床意义 (1)糖尿病性糖耐量:空腹血糖浓度≥7.0mmol/L,服糖后血糖急剧升高,血糖增高时间仍为30~60分钟,但峰值超过10mmol/L,并出现尿糖;以后血糖浓度恢复缓慢,常常2小时后仍高于空腹水平。 (2)糖耐量受损 空腹血糖浓度<7.8mmol/L,但服糖后60、90分钟的血糖水平≥11.0mmol/L,2小时后血糖水平仍在8~11mmol/L之间,称为亚临床或无症状的糖尿病。 三、血清糖化血红蛋白测定:反映测定前1~2个月内受试者血糖的平均水平。 四、血清糖化白蛋白测定:反映患者过去1~2周内平均血糖水平。 五、其他指标的测定:包括C肽、尿糖和脑脊液糖测定等。 讲 授 教 新 课 学 过 程 课堂OGTT对糖尿病相关状态的判定标准是什么? 提问 如何鉴别糖尿病酮症酸中毒和高渗性昏迷? 课堂葡萄糖耐量试验的原理和方法;各种糖尿病监控指标的生理意义和测定方法;其小节 他体液葡萄糖的测定。 糖尿病性糖耐量的OGTT结果包括( ) 布置A、空腹血糖在6~6.7mmol/l B、口服葡萄糖2h达最高峰 作业 C、血中葡萄糖峰值大于10mmol/l D、以上均不是 参考书目 何戎华.糖尿病现代诊疗.江苏:江苏科学技术出版社,2000 张纯洁.生物化学检验.第1版,北京:高等教育出版社,2007

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 章节 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 2 教材 生物化学检验 教学目的和要 教 求 学 教学内容 要 教学 求 重点难点 教学媒体 第十一章 血脂及血浆脂蛋白检验 1、掌握脂蛋白的分类及其主要功能;高脂血症的分型及血液生化特点 2、熟悉各种脂蛋白的组成与结构要点;异常脂蛋白血症的原因 3、了解载脂蛋白的种类与生理功能 1、概述。 重点:脂蛋白的分类及其主要功能;高脂血症的分型及血液生化特点。 难点:各种脂蛋白的代谢途径、高脂血症的发病机理。 课堂讲授为主,多媒体教学为辅 复习血糖的测定方法(GOD法和己糖激酶法);葡萄糖耐量试验的原理和方法 旧课 上次课选择题答案为C 一、血脂及血浆脂蛋白 (一)脂蛋白的分类 1、超速离心法:可分为乳糜微粒(CM)、极低密度脂蛋白(VLDL)、中间密度 脂蛋白(IDL)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)五大类。 3、 电泳法:可分为CM、β脂蛋白、前β脂蛋白和α脂蛋白。 讲 教 授 新 课 学 过 程 (二)脂蛋白的组成与结构 (三)载脂蛋白的种类和功能 (四)血浆脂蛋白代谢 二、脂蛋白代谢紊乱 (一)高脂蛋白血症的概念:指血浆中胆固醇或/和甘油三酯水平升高。采用脂质异常血症(dyslipidemia)能更全面准确地反映血脂代谢紊乱状态。 (二)高脂蛋白血症的分类 1、按表型分类 (1)WHO分型:1970年WHO以临床表型为基础将高脂血症分为Ⅰ、Ⅱa、Ⅱb、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ型。 (2)简易分型:简单分为高胆固醇血症、高甘油三酯血症、混合型高脂血症。 2、按是否继发于全身性疾病可分为:原发性和继发性高脂血症两种。 课堂电泳分类法与超速离心法两种分类方法的对应关系是怎样的? 提问 课堂脂蛋白的分类方法及各种脂蛋白的主要功能;高脂血症的分型及原发性、继发性 小节 高脂血症的特点。 布置下列哪项被称为富含TG的脂蛋白( ) 作业 A.CM和VLDL B.CM和Lp(a) C.LDL和HDL D.HDL和Lp(a) 参考书目 高东升,董殿阶.临床心血管疾病. 山东:山东科学技术出版社,2000 周新.生物化学和生物化学检验.第3版,北京:人民卫生出版社,2003

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 章节 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 2 教材 生物化学检验 教学目的和要 求 教 学 教学内容 要 教学 求 重点难点 教学媒体 第十一章 血脂及血浆脂蛋白检验 1、掌握血脂、脂蛋白和载脂蛋白测定的原理和方法。 2、熟悉血脂检查前应注意的问题。 3、了解各个检验项目的临床意义和应用。 血脂、脂蛋白和载脂蛋白测定。 重点:血脂检查前应注意的问题 难点:脂蛋白紊乱与致动脉粥样硬化关系 课堂讲授为主,多媒体教学为辅 复习脂蛋白的分类及其主要功能;高脂血症的分型及血液生化特点 旧课 上次课选择题答案为A 一、血脂测定项目:包括 TC、TG、HDL及其亚类胆固醇、LDL-C、Lp(a)以及部分载脂蛋白如ApoAI、ApoB等。其中TC、TG、HDL-C、LDL-C测定是血脂测定的四个基本指标。 二、血脂检查前应注意的问题(1~6点) 三、血清静置试验 四、TC测定:省去毛地黄皂苷沉淀纯化步骤的化学抽提法—ALBK法为参考方法;胆固醇氧化酶-过氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法(CHOD-PAP法)为常规方法。 五、 TG测定:无公认的参考方法。甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法(GPO-PAP 法)为常规方法。 六、 血清脂蛋白测定(因为脂蛋白中胆固醇含量恒定,故用脂蛋白-C间接代表脂蛋白含量) 1、 血清脂蛋白电泳:琼脂糖凝胶电泳最为常用。 2、 HDL-C测定:超速离心结合ALBK法为参考方法;双试剂的直接匀相测定法为常规方法。 3、 LDL-C测定 4、 脂蛋白(a)测定 七、其他载脂蛋白的测定(包括 Lp(a)、apoA1和apoB):常用免疫浊度法,包括免疫散射比浊法(INA)和免疫透射比浊法(ITA)。 讲 教 授 新 学 课 过 程 课堂代谢综合征的诊断标准是什么? 提问 课堂动脉粥样硬化(AS)的概念及发病机制;致AS和抗AS的因素;代谢综合征;血脂小节 检查前应注意的问题和测定项目的合理选择。 布置下列哪种不是致动脉粥样硬化的脂蛋白( ) 作业 A. 脂蛋白残粒 B. 小而密的LDL C. Lp(a ) D. HDL 参考书目

高东升,董殿阶.临床心血管疾病. 山东:山东科学技术出版社,2000 周新.生物化学和生物化学检验.第3版,北京:人民卫生出版社,2003

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 章节 +++专业(层次) 医学检验(专科) 学时 2 教材 生物化学检验 教学目的和要 教 求 教学学 内容 要 教学 求 重点难点 第十二章 钠、钾、氯和酸碱平衡紊乱 1、掌握K、Na、Cl测定的方法学、评价及注意事项。 2、熟悉水盐平衡紊乱生化机理。 +++3、了解K、Na、Cl、水正常代谢及调节。 钠、钾、氯代谢及其检测 重点:K、Na、Cl测定的方法学、评价及注意事项。 难点:水盐平衡紊乱生化机理。 +++教学课堂讲授为主,多媒体教学为辅 媒体 复习分析化学、生物化学等概念及其主要内容 旧课 上次课选择题答案为D 一、电解质平衡紊乱 +++(一) K、Na、Cl、水正常代谢及调节 (二)平衡紊乱 1、水平衡紊乱:包括脱水(总体水过少)和水肿(总体水过多)。引起脱水和水肿的原因。 ++2、钠平衡紊乱:低钠血症(血浆中Na<130mmol/L);高钠血症(血浆中Na>150 mmol/L) 3、钾平衡紊乱:低钾血症(血清钾低于3.5mmol/L);高钾血症(血清钾高于5.5mmol/L) 二、钾、钠、氯测定 (一)钠、钾测定 1、离子选择电极法 2、分光光度法:(1)酶法;(2)大环发色团显色法 (二)氯的测定 1、分光光度法:(1)硫氰酸汞法;(2)酶法 2、离子选择电极法 讲 授 教 新 课 学 过 程 课堂硫氰酸汞法测定氯的原理是什么? 提问 课堂K、Na、Cl、水正常代谢及调节,水盐平衡紊乱的生化机理;钾、钠、氯常用小节 的测定方法、评价及注意事项。 下列关于血钾测定正确的是( ) 布置A.血浆和血清结果一样 B.全血标本冷藏对结果没有什么影响 作业 C.酸中毒时会使结果偏低 D.全血标本放置室温血钾会降低 参考书目+++ 张纯洁.生物化学检验.第1版,北京:高等教育出版社,2007 杨惠玲,潘景轩,吴伟康.高级病理生理学.第2版,北京:科学出版社,2000

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 章节 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 2 教材 生物化学检验 第十二章 钠、钾、氯和酸碱平衡紊乱 教学目的1、 掌握血气分析指标(pH、PaCO2、PaO2)测定的方法学、评价及注意事项 和要 2、 熟悉气体在血液中的运输。 教 求 学 教学内容 要 教学 求 重点难点 教学媒体 1、气体在血液中的运输。 2、血气分析的测定原理及方法。 重点:血气分析指标(pH、PaCO2、PaO2)测定的方法学、评价及注意事项。 难点:血气分析仪的结构、操作 课堂讲授为主,多媒体教学为辅 复习分析化学、生物化学等概念及其主要内容 旧课 上次课选择题答案为D 一、气体在血液中的运输 (一)血液中的气体分压 气体分压强=混合气体总压强×该气体容积百分比 (二)氧的运输 1、氧的运输与氧解离曲线 2、影响氧解离曲线的主要因素:(1)H浓度和PCO2;(2)2,3-二磷酸甘油酸 +讲 教 授 新 学 课 过 程 (三)CO2的运输 1、CO2从组织进入血液后的变化过程 2、CO2由肺呼出的变化过程 二、血气分析的测定原理及方法 (一)血液pH、PaCO2、PaO2电极的基本结构及工作原理 1、血液pH电极;2、血液PCO2电极;3、血液PO2电极 (二)血气分析测量方法: 1、血液标本的采集和处理 2、标本的测定 (三)血气分析的质量控制 课堂为什么氧解离曲线呈S型而不是抛物线型? 提问 课堂气体在血液中的运输;血气分析指标的测定原理及方法,各电极的基本结构及工小节 作原理, 血气分析仪不能直接测定的指标是( ) 布置-A. pH B. HCO3 C. PaCO2 D. PaO2 作业 参考书目 张纯洁.生物化学检验.第1版,北京:高等教育出版社,2007 杨惠玲,潘景轩,吴伟康.高级病理生理学.第2版,北京:科学出版社,2000

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 章节 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 2 教材 生物化学检验 教学目的和要 求 教 教学学 内容 第十二章 钠、钾、氯和酸碱平衡紊乱 1、掌握血气分析常用指标与参数。 2、熟悉各型酸碱平衡紊乱的分类和判断。 3、了解各个检验项目的临床意义和应用。 1、血气分析常用指标与参数。 2、各型酸碱平衡紊乱的分类和判断。 要 教学 重点:血气分析常用指标与参数。 求 重点难点 难点:各型酸碱平衡紊乱的分类和判断。 教学课堂讲授为主,多媒体教学为辅 媒体 复习分析化学、生物化学等概念及其主要内容 旧课 上次课选择题答案为B 一、血气分析常用指标与参数 1、酸碱度(pH):动脉血pH参考值为7.35~7.45。 2、二氧化碳分压:是酸碱平衡中反映呼吸因素的重要指标。PaCO2参考值:35~45mmHg(4.67~6.0kPa)。 3、氧分压:参考值为75~100mmHg(10.0~13.3kPa) 讲 教 授 新 课 学 过 程 4、氧饱和度:参考值为95%~98%。 5、肺泡—动脉氧分压差(A-aDO2) 6、实际碳酸氢盐与标准碳酸氢盐(AB) 7、缓冲碱(BB) 8、碱剩余(BE) 9、阴离子隙(AG) 二、酸碱平衡紊乱的类型 1、代谢性酸中毒;2、呼吸性酸中毒;3、代谢性碱中毒;4、呼吸性碱中毒 三、酸碱平衡紊乱的判断 酸碱紊乱的判断一定要结合病史、血气及电解质测定和临床有关资料综合分析。 ―课堂患者腹泻4天,动脉血气分析: pH=7.49,PaCO2=47 mmHg,HCO3=37 mmol/L,提问 Na+=130 mmol/L,K+=2.5 mmol/L,Cl―=92 mmol/L。给出诊断。 课堂血气分析常用指标与参数,血气分析对呼吸功能的判断。 小节 布置单纯性代谢性酸中毒时( ) 作业 A.AB > SB B.AB < SB C.AB↑ = SB↑ D.AB↓ = SB↓ E.AG肯定升高 参考书目 张纯洁.生物化学检验.第1版,北京:高等教育出版社,2007 杨惠玲,潘景轩,吴伟康.高级病理生理学.第2版,北京:科学出版社,2000

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 章节 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 2 教材 生物化学检验 教学目的和要 求 教 教学学 内容 要 教学 求 重点难点 教学媒体 第十三章 钙、磷、镁和微量元素检验 1、掌握血清钙、磷、镁的测定及方法学评价。 2、熟悉微量元素的生理作用。 3、了解微量元素过多或缺乏的影响。 1、概述。 2、钙、磷、镁和微量元素测定。(部分) 重点:血清钙、磷、镁的测定及方法学评价。 难点:微量元素的生理作用。 课堂讲授为主,多媒体教学为辅 复习分析化学、生物化学等概念及其主要内容 旧课 上次课选择题答案为D 一、钙、磷代谢和调节 二、镁代谢和生理功能 三、微量元素与疾病的关系 1、微量元素的概念:指占人体总重量1/10000以下,每人每日需要量在100mg以下的元素。 2、微量元素对人体各种生命活动的影响 3、微量元素测定在疾病诊断中的应用 4、重要微量元素的生物学作用及代谢 讲 授 教 新 课 学 过 程 二、钙、磷、镁和微量元素测定(部分) (一)血清钙的测定 1、离子钙的测定:主要以离子选择性电极法为主。 2、总钙测定:决定性方法为同位素稀释质谱法(IDMS),参考方法为原子吸收分光光度法。世界卫生组织(WHO)推荐的常规钙测定方法为邻甲酚酞络合酮法(O-CPC)。 (二)血清磷测定 1、磷钼酸还原法;2、磷钼酸非还原法;3、酶法 课堂邻甲酚酞络合酮法测定血清钙的原理是什么? 提问 课堂微量元素的概念和生理功能,几种主要微量元素的测定方法。 小节 下列关于微量元素正确的是( ) 布置A.小于体重的十万分之一 B.参与激素和维生素的合成 作业 C.必需微量元素摄入越多越好 D.克山病是由于锌的缺乏引起 参考书目 朱忠勇.实用医学检验学.北京:人民军医出版社,1998 李艳.生物化学检验一理论与临床.北京:人民卫生出版社,2003 张纯洁.生物化学检验.第1版,北京:高等教育出版社,2007

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 章节 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 1 教材 生物化学检验 教学目的和要 教 求 教学学 内容 要 教学 求 重点难点 教学媒体 第十三章 钙、磷、镁和微量元素检验 1、掌握镁、铁、铜、锌的测定方法及评价。 2、了解尿液钙、磷、镁的测定。 镁、铁、铜、锌的测定方法及评价。 重点:镁、铁、铜、锌的测定方法及评价。 难点:镁、铁、铜、锌的测定方法及评价。 课堂讲授为主,多媒体教学为辅 复习分析化学、生物化学等概念及其主要内容 旧课 上次课选择题答案为B 一、血清镁的测定 1、原子吸收分光光度法:为镁测定的参考方法。 2、甲基麝香草酚蓝比色法:国家卫生部临床检验中心推荐为测定镁的常规方法。 3、 Calmagite比色法 4、达旦黄比色法 讲 教 授 新 课 学 过 程 二、尿液钙、镁、磷的测定(了解) 三、铁、铜和锌测定 (一)铁的测定: 血样中的铁常用血清铁和血清总铁结合力表示。血清铁与总铁结合力的百分比称为铁饱和度。 (二)铜的测定: 常用铜测定方法有原子吸收分光光度法和血清铜比色法。 (三)锌的测定 常用的锌测定方法是原子吸收分光光度和吡啶偶氮萘酚比色法。 课堂甲基麝香草酚蓝比色法测定血清镁的原理是什么? 提问 课堂镁、铁、铜、锌的测定方法及评价。 小节 血清锌测定方法有( ) 布置A 离子选择电极法 B 化学比色法 作业 C 火焰发射分光光度法 D 原子吸收分光光度法 参考书目 朱忠勇.实用医学检验学.北京:人民军医出版社,1998 李艳.生物化学检验一理论与临床.北京:人民卫生出版社,2003 张纯洁.生物化学检验.第1版,北京:高等教育出版社,2007

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 章节 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 2 教材 生物化学检验 教学目的和要 求 教 教学学 内容 要 教学 求 重点难点 第十四章 肝脏功能检验 1、掌握黄疸的发生机理和各型黄疸的代谢特点及实验室鉴别诊断要点 2、熟悉肝脏的生物化学功能,胆红素代谢。 3、了解肝脏的基本机构。 肝脏的结构;肝脏的生物化学功能;肝脏疾病的生化改变。 重点:黄疸的发生机理和各型黄疸的代谢特点及实验室鉴别诊断要点。 难点:胆汁酸代谢、胆红素代谢。 教学课堂讲授为主,多媒体教学为辅 媒体 复习生物化学等概念及其主要内容 旧课 上次课选择题答案为C 一、肝脏结构 1、解剖学特点;2、肝脏的显微结构特点;3、肝细胞的再生 二、肝脏的生物化学功能 (一)排泄功能:1、胆汁酸代谢;2、胆红素代谢:包括未结合胆红素(间接反应胆红素)和结合胆红素(直接反应胆红素),此外还有一种δ-胆红素(与血清白蛋白结合)。3、血氨代谢 (二)物质代谢功能:1、营养物质代谢;2、激素及维生素代谢 (三)肝脏的生物转化:机体对许多外源性或内源性非营养物质进行化学转变,增加其水溶性(或极性),使其易随胆汁、尿排出,这种体内变化过程称生物转化。 三、肝脏疾病的生化改变 (一)胆红素代谢障碍(黄疸) 1、黄疸的概念与分类 2、黄疸的发生机制:胆红素形成过多、肝细胞处理胆红素的能力下降和胆红素在肝外的排泄障碍。 3、黄疸的实验室诊断 (1)各型黄疸的胆红素代谢特点:分溶血性、肝细胞性和梗阻性三种类型分别讲述。 (二)胆汁酸代谢障碍(了解) (三)血浆酶异常 (四)血浆蛋白异常 教 学 过 程 讲 授 新 课 课堂梗阻性黄疸的发生机制是怎样的? 提问 课堂肝脏的结构;肝脏的生物化学功能;肝脏疾病的生化改变。 小节 布置血中哪一种胆红素增加会在尿中出现( ) 作业 A.未结合胆红素 B.结合胆红素 C.间接胆红素 D.与白蛋白结合的胆红素 参考书目 张纯洁.生物化学检验.第1版,北京:高等教育出版社,2007 陈灏珠.实用内科学.第10版,北京:人民卫生出版社,1998 21

***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 章节 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 2 教材 生物化学检验 教学目的和要 求 教 教学学 内容 要 教学 求 重点难点 教学媒体 第十四章 肝脏功能检验 1、掌握肝功能实验生化检查指标的种类和重点项目的测定方法及评价。 2、熟悉各测定项目的临床意义。 3、了解肝功能实验项目选择的原则。 1、肝功能试验。 2、肝功能实验项目选择的原则。 重点:肝功能实验生化检查指标的种类和重点项目的测定方法及评价。 难点:各测定项目的临床意义。 课堂讲授为主,多媒体教学为辅 复习分析化学、生物化学等概念及其主要内容 旧课 上次课选择题答案为A 一、血清(浆)蛋白测定 (一)总蛋白、白蛋白、及白蛋白/球蛋白(A/G)比值测定 (二)其他:包括纤维蛋白原、甲胎蛋白、铜蓝蛋白和转铁蛋白的测定 二、血清酶测定 (一)氨基转移酶(ALT、AST)测定 赖氏法和连续监测法测定ALT和AST的原理:见书。 (二)ALP测定:金氏法和连续监测法测定ALT的原理 (三)GGT测定 (四)MAO测定 三、血清胆红素测定 主要方法是改良Jendrassile和Grof方法(改良J—G法)和胆红素氧化酶法。 四、胆汁酸测定:气相色谱法、高效液相色谱法、放射免疫分析法和酶学方法等。 五、血氨测定 目前应用最多的方法是酶法和基于离子选择电极的血氨测定仪分析法。 六、肝功能实验项目选择的原则 补充:病例分析(慢性肝病) 讲 教 授 新 学 课 过 程 课堂肝功能实验项目的选择原则是什么? 提问 课堂肝功能实验生化检查指标的种类和重点项目的测定方法及评价。 小节 布置AST/ALT﹥1可见于下列哪几种情况( ) 作业 A.急性病毒性肝炎 B.重症肝炎 C.乙醇性肝炎 D.肝癌 参考书目 张纯洁.生物化学检验.第1版,北京:高等教育出版社,2007 陈灏珠.实用内科学.第10版,北京:人民卫生出版社,1998

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 章节 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 2 教材 生物化学检验 第十五章 肾脏功能检验 教学1、掌握血清尿素的测定方法及评价。 目的2、熟悉肾脏的功能。 和要 求 3、了解肾脏的基本结构。 教 教学学 内容 要 求 教学 重点难点 1、概述。 2、肾脏功能试验。(部分) 重点:血清尿素的测定方法及评价。 难点:肾脏的功能。 教学课堂讲授为主,多媒体教学为辅 媒体 复习分析化学、生物化学等概念及其主要内容 旧课 上次课选择题答案为BD 一、肾脏的基本结构 (一)肾脏的解剖学结构 (二)肾脏的组织学结构 (三)肾脏的血液供应 二、肾脏的功能 (一)尿液的生成:1、肾小球滤过;2、肾小管重吸收;3、肾小管与集合管分泌 (二)肾脏的内分泌功能 1、肾素-血管紧张素-醛固酮系统;2、激肽释放酶-激肽-前列腺素系统 3、促红细胞生成素;4、1α,25-二羟维生素D3 二、肾脏功能试验 (一)血清尿素的测定:血清尿素水平在一定程度上反映了肾小球的滤过能力。 1、测定方法: (1)二乙酰一肟法(直接法) (2)脲酶法(间接法) 2、方法学评价 讲 教 授 新 课 学 过 程 课堂简述尿液的生成过程? 提问 课堂肾脏的基本结构;肾脏的功能;血清尿素的测定方法及评价。 小节 布置选择性蛋白尿是以哪一种蛋白尿为主( ) 作业 A.白蛋白 B.IgG C.转铁蛋白 D.β2-微球蛋白 E.B-J蛋白 参考书目 张纯洁.生物化学检验.第1版,北京:高等教育出版社,2007 陈灏珠.实用内科学.第10版,北京:人民卫生出版社,1998

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 章节 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 1 教材 生物化学检验 教学目的和要 求 教 教学学 内容 要 教学 求 重点难点 第十五章 肾脏功能检验 1、掌握肾功能试验中常用的内生肌酐清除试验、肌酐及尿酸测定等。 2、了解尿液总蛋白、微量蛋白的测定;肾脏功能试验的选择原则与应用。 肾脏功能试验。(部分) 重点:肾功能试验中常用的内生肌酐清除试验、肌酐及尿酸测定等。 难点:肾脏功能试验的选择原则与应用。 教学课堂讲授为主,多媒体教学为辅 媒体 复习分析化学、生物化学等概念及其主要内容 旧课 上次课选择题答案为A 一、、血清肌酐的测定:判断肾小球滤过功能损害程度,无法用于肾病的早期诊断。 (一)测定方法: 1、Jaffe反应法(苦味酸法):肌酐与碱性苦味酸作用,生成黄红色化合物,在510nm处比色分析。 2、酶偶联速率法 (二)方法学评价 (三)内生肌酐清除率:临床上通过内生肌酐清除率近似地反映肾小球滤过功能 1、测定方法 2、方法学评价 二、血清尿酸的测定:反映早期肾小球滤过功能损伤较为敏感。 (一)测定方法:包括磷钨酸法和尿酸酶法两大类。 (二)方法学评价 讲 授 教 新 课 学 过 程 课堂反映肾小球滤过率GFR的检测指标有哪些? 提问 课堂肾小管和集合管功能试验的常见实验指标;血肌酐及尿酸测定的方法及临床意义。 小节 选择性蛋白尿主要用于检查( ) 布置A 肾小球滤过率改变 B 肾小管重吸收功能障碍 作业 C 肾小球病变程度 D 肾小管病变程度 参考书目

张纯洁.生物化学检验.第1版,北京:高等教育出版社,2007 陈灏珠.实用内科学.第10版,北京:人民卫生出版社,1998

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 章节 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 2 教材 生物化学检验 教学目的和要 求 教 教学学 内容 要 教学 求 重点难点 教学媒体 第十六章 心肌损伤标志物检验 1、掌握AMI的诊断标准;心脏标志物的测定及方法学评价。 2、熟悉心脏标志物的选择原则和评价。 3、了解心脏的结构和功能。 1、心脏标志物的测定及方法学评价。 2、心脏标志物的选择原则。 重点:心脏标志物的测定及方法学评价。 难点:心脏标志物的选择原则。 课堂讲授为主,多媒体教学为辅 复习分析化学、生物化学等概念及其主要内容 旧课 上次课选择题答案为C 一、概述 (一)心脏的结构和功能 (二)心脏疾病的诊断 AMI的诊断标准(2000年修改版):①②③④ 二、心脏标志物的测定 (一)酶类标志物 1、AMI血清中酶活性改变的机制 2、AMI的酶类标志物 (1)肌酸激酶;(2)乳酸脱氢酶;(3)AST;(4)AST、LDH、CK的特异性比较 3、AMI后心肌酶的时相变化 4、心肌酶的生理变异 5、心肌酶的测定:AST、LDH、CK的测定原理 (二)蛋白类标志物 1、肌红蛋白:主要采用免疫化学法。 2、心肌肌钙蛋白(cTn):cTn的测定主要采用双抗体(捕获抗体、标记抗体)夹心的免疫学方法,如ELISA分析法、化学发光法等。 三、心脏标志物的选择原则 教 学 过 程 讲 授 新 课 课堂急性心肌梗死(AMI)的诊断标准是什么? 提问 课堂心脏标志物的测定及方法学评价;心脏标志物的选择原则。 小节 布置用于AMI早期诊断的确证标志物是( ) 作业 A.CK B.LDH C.CK—MB D.cTn 参考书目 宋国杰.分子心脏病学.天津:天津科学技术出版社,2001 高东升,董殿阶.临床心血管疾病. 山东:山东科学技术出版社,2000 张纯洁.生物化学检验.第1版,北京:高等教育出版社,2007 25

***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 章节 生物化学检验 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 3 教材 生物化学检验 实验一 分光光度计性能检测 教学目的1、 掌握分光光度计的性能检测,包括波长检测、杂光检测以及比色皿配对。 和要 2、 掌握分光光度计的使用方法。 教 求 学 教学分光光度计性能检测 内容 要 教学 重点:比色皿配对与分光光度计的使用方法。 求 重点难点 难点:分光光度计波长的粗测、细测,杂光的检测。 教学学生动手操作为主,课堂演示为辅 媒体 复习理论课第五章内容 旧课 一、 原理 1、波长检测: ⑴可见光区域的黄光波段比较狭窄,适用于光度计波长的粗测; ⑵镨钕滤光片在529nm±1~2nm处有较好的吸收峰,适用于光度计波长的细测。 2、杂光检测:镨钕滤光片在585nm处吸光度A最大,透光率T最小,所产生的透光与 杂光成正比,因此可用其透光率表示杂光的大小。 3、比色皿配对:一套比色皿之间的材质、厚薄、色泽、空白吸收等应该一致,误差小于 0.5%才能配套使用。 二、 操作 1、波长检测 讲 (1)粗测:调仪器波长旋纽至580nm处,打开遮光板,在比色槽中光路经过处放一白纸条,教 授 观察是否有均匀的黄光。 (2)细测:调波长至529nm处,打开遮光板,调0%T,盖上遮光板以空气调100%T,将镨新 学 课 钕滤光片插入光路,测出A值。再在529nm附近每隔1~2nm,各测其A值。 2、杂光检测 (1)调波长为585nm,盖上遮光板,用黑纸挡住比色皿光路,调0%T。 过 (2)盖上遮光板,用空气作空白调100%T。 (3)插入镨钕滤光片,盖上遮光板,测出585nm时的T%,即为杂光水平。 程 3、比色皿配套 (1)选取几支大小、材质、色泽相同的比色皿,洗净,装入占比色皿体积2/3的蒸馏水(D.W.),擦干,放入比色槽。 (2)在585nm处,调第1支比色皿透光度为100%T,依次测出其他几支比色皿的T%。 不合格的需反复剔除极端值,或重新配对,直至有2个以上的比色皿合格。 三、结果及其讨论 课堂何谓杂光?何谓最大吸收峰?分光光度计如何得到单色光? 提问 课堂分光光度计的性能检测。 小节 分光光度计的使用方法。 布置简述722型分光光度计的使用时的注意事项。 作业 简述杂光检测与比色皿配套的注意事项。 参考书目 钱士匀主编.临床生物化学和生物化学检验实验指导.第2版,北京:人民卫生出版社,2003

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 专业(层次) 医学检验(专科) 教材 生物化学检验 章节 实验二 方法学评价试验(1)——线性范围试验 学时 3 教学1、掌握线性范围试验的原理及方法。 目的2、掌握葡萄糖氧化酶-过氧化物酶(GOD-POD)法测定葡萄糖(Glu)。 和要 3、熟悉分光光度计的使用。 教 求 学 教学方法学评价试验(1)——线性范围试验 内容 要 教学 重点:GOD-POD 法测Glu,线性范围试验的原理及方法 求 重点难点 难点: A-C曲线的绘制 教学学生动手操作为主,课堂演示为辅 媒体 复习分光光度计性能检测 旧课 一、原理 使用不同浓度的葡萄糖标准溶液,用GOD-POD法试剂测定各自的吸光度, 以标准浓度为横坐标,以其对应的吸光度为纵坐标,在方格纸上作图,即可绘 制出一条直线,即剂量反应曲线。一般测定方法的线性范围要求能覆盖临床上 的参考值和常见疾病的医学决定水平,以减少标本稀释重测的机会。 二、操作 (一)样品的处理与测定 1、原始的葡萄糖标准溶液浓度为110mmol/L,设为第1号管,将其稀释后得到教 讲 2种高浓度的葡萄糖标准溶液管:第2、3号管,浓度分别为73.335mmol/L、 授 55mmol/L。注意稀释后要混匀。 学 新 2 、再将第2、3号管分别取50μl,加D.W.50μl依次作等倍稀释(各4管), 课 得到8种较低浓度的葡萄糖标准溶液。 3、取12支试管,其中1号为空白管,按加样:试剂比=10μl:1.5ml,37℃水浴过 15min,505nm,测定出TP标准液的吸光度As和样本的吸光度Ai。对应的标准 浓度分别为0 mmol/L、110 mmol/L、73.33 mmol/L、55 mmol/L、36.67 mmol/L、程 27.5 mmol/L、18.33 mmol/L、13.75 mmol/L、9.17 mmol/L、6.88 mmol/L、4.58 mmol/L、3.44mmol/L (二)绘制A-C曲线 在坐标纸上,以吸光度A为纵坐标,葡萄糖浓度C为横坐标绘制A-C曲线。 三、结果及讨论 课堂何谓线性范围?如何进行倍比稀释? 提问 课堂线性范围试验的原理及方法;GOD-POD 法测葡萄糖。 小节 布置线性范围测定的注意事项。 作业 GOD-POD 法测葡萄糖的注意事项。 参考书目 钱士匀主编.临床生物化学和生物化学检验实验指导.第2版,北京:人民卫生出版社,2003

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 专业(层次) 医学检验(专科) 教材 生物化学检验 章节 实验三 方法学评价试验(2)——重复性试验 学时 3 教学目的1、掌握批内重复性试验的原理及操作方法。 和要 2、了解双缩脲法测定总蛋白TP的操作方法。 教 求 学 教学方法学评价试验(2)——重复性试验 内容 要 教学 重点:双缩脲法测 TP,重复性试验的原理与操作; 求 重点难点 难点:重复性试验中的计算。 教学学生动手操作为主,课堂演示为辅 媒体 复习线性范围试验 旧课 一、原理 “五同一短”:同一方法、同一人、同一器材、同一实验室、同一测定条件 (标本、标准品和试剂相同,温度、湿度、pH等相同)下,短期内重复测定。 指标用批内CV来评价。 二、操作: 采用双缩脲法,设置标准和空白,同一标本用对比法测定10份(n=10)。讲 教 授 按加样:试剂比=50μl:2.5ml,37℃水浴10min,0nm,测定出TP标准液的 新 学 课 吸光度As和样本的吸光度Ai。 过 程 三、计算: 据XiAiXS计算出样本中TP浓度Xi。 ASn(s =xi2i1xi)2i1nnn11,xni1nxi,CV=s100% x四、结果及其讨论: 课堂双缩脲方法名称的由来?重复性试验的意义是什么? 提问 课堂重复性试验的原理; 小节 双缩脲法测 TP。 布置双缩脲测总蛋白的原理及方法评价; 作业 重复性实验的注意事项。 参考书目 钱士匀主编.临床生物化学和生物化学检验实验指导.第2版,北京:人民卫生出版社,2003

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 教材 生物化学检验 课程 章节 生物化学检验 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 3 实验四、方法学评价试验(3)——回收试验 教学目的1、掌握回收试验的原理及操作方法。 和要 2、掌握GOD-POD 法测Glu的原理。 教 求 学 教学方法学评价试验(3)——回收试验 内容 要 教学 重点:掌握GOD-POD 法测Glu, 求 重点难点 难点:回收试验的原理与操作; 教学学生动手操作为主,课堂演示为辅 媒体 复习重复性试验 旧课 一、原理 回收是指候选方法准确测定加入常规分析标本的纯分析物的能力,用回收率表示。将被测物标准液加入病人标本中,成为分析标本;原病人标本中加入等量的无被测物的溶剂作基础标本;然后用候选方法测定并得到各自浓度。 回收浓度=分析标本测得浓度-基础标本测得浓度。 加入浓度=标准液量ml 标准液浓度病人样品量ml标准液量ml 回收率(%)=回收浓度100 加入浓度讲 教 授 新 学 课 过 程 二、 操作 (一)样品的处理(已制备) 1、基础血清管 = 原血清0.9ml+蒸馏水0.1ml 2、回收管 = 原血清0.9ml+相应的Glu标准液 回1 = 原血清0.9ml+ 11.1mmol/L的Glu标准液0.1ml 回2 = 原血清0.9ml+33.3mmol/L的Glu标准液0.1ml 回3 = 原血清0.9ml+111mmol/L的Glu标准液0.1ml (二)操作与计算 三、结果及其讨论 课堂何谓回收试验?其目的是什么? 提问 课堂回收试验的原理;GOD-POD 法测Glu 小节 布置简述回收试验的原理及注意事项。 作业 参考钱士匀主编.临床生物化学和生物化学检验实验指导.第2版,北京:人民卫生出书目版社,2003

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 专业(层次) 医学检验(专科) 教生物化学检验 章节 实验五 方法学评价试验(4)—— 干扰试验 学时 3 材 教学目的1、 掌握干扰试验的原理及操作方法。 和要 2、 掌握GOD-POD法测Glu的原理。 教 求 学 教学方法学评价试验(4)—— 干扰试验 内容 要 教学 重点:掌握GOD-POD 法测Glu; 求 重点难点 难点:干扰试验的原理与操作。 教学学生动手操作为主,课堂演示为辅 媒体 复习回收试验 旧课 讲 授 新 课 一、原理 干扰试验是测定特异性和干扰二者引起的误差。在具体方法学评价实验中,首先要确定被试可疑物质是否引起误差;若能引起误差,再进一步探讨其误差的来源是因为方法特性差还是干扰。若加入的物质本身和分析试剂反应并产生读数,这是特异性差;若加入的物质并不与分析试剂反应,但它改变了分析物和分析试剂间的反应,这是干扰。本实验选用尿酸做GOD-POD法测血糖的干扰试验,尿酸可以和GOD反应生成的H2O2反应,使部分H2O2不能参与第二步POD的偶联反应,从而降低显色强度,产生负的测定误差。因此,尿酸对该反应有干扰,但不是尿酸被测定。 二、操作 (一)样品的处理(已制备) 1、基础血清管 = 原血清0.9ml+蒸馏水(D.W.)0.1ml 2、干扰管 = 原血清0.9ml+相应的维生素C干扰液0.1ml 干1 = 原血清0.9ml+10 mmol/LVC干扰液0.1ml 干2 = 原血清0.9ml+20mmol/L VC干扰液0.1ml (二)操作与计算 教学过程 三、结果及其讨论 课堂何谓干扰试验?其目的是什么? 提问 课堂干扰试验的原理及操作方法,GOD-POD法测Glu 小节 布置简述干扰试验的原理及注意事项。 作业 参考钱士匀主编.临床生物化学和生物化学检验实验指导.第2版,北京:人民卫生出书目版社,2003

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 章节 生物化学检验 专业(层次) 医学检验(专科) 教材 生物化学检验 实验六 方法学评价试验(4)——对比试验 学时 3 教学目的1、掌握方法对比试验的原理及操作步骤; 和要 2、掌握用双缩脲法及折射率法测定血清TP。 教 求 学 教学方法学评价试验(4)——对比试验 内容 要 教学 重点:掌握双缩脲法及折射率法测定血清TP; 求 重点难点 难点:对比试验的原理与操作。 教学学生动手操作为主,课堂演示为辅 媒体 复习干扰试验 旧课 一、原理 方法对比试验是将候选方法与准确度已知的方法(如参比方法)作对比分析,以评价候 选方法的准确度,是考核候选方法是否可被采用的重要试验。方法对比试验是用于检测候选 方法系统误差的大小包括恒定误差和比例误差,如对适当的数据进行分析,也可以提供误差的性质。 二、操作 (一)样品处理 1~10号样本:质控血清+不同体积的蒸馏水(4.5ml、4.0ml、3.7ml、3.5ml、3.2ml、3.0ml、 2.7ml、2.5ml、2.2ml、2.0ml),混匀。 (二)样品测定 1、双缩脲法:设置标准和空白,用对比法测定。按加样:试剂比=50μl:2.5ml,37℃水讲 教 授 浴10min,0nm,测定出TP标准液的吸光度As和样本的吸光度Ai,并据Xi=Ai/As×Cs计算 新 出样本中TP浓度Xi。 2、折射率法:先调标,再测样本中TP浓度Yi 学 课 过 程 三、统计学检验 1、 相关与回归:计算出a、b、r及t值,进行r的t检验;2、配对t检验 四、结果及其讨论 比较双缩脲法与折射率法测TP的相互关系; 注意相关与配对的区别、r的t检验与配对t检验的区别。 课堂何谓对比试验?其目的是什么? 提问 课堂方法对比试验的原理及操作步骤; 小节 用双缩脲法及折射率法测定血清TP。 布置简述对比试验的原理及注意事项。 作业 参考钱士匀主编.临床生物化学和生物化学检验实验指导.第2版,北京:人民卫生书目出版社,2003

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 章节 生物化学检验 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 3 教材 生物化学检验 实验七 双缩脲试剂的制备与鉴定(1) 教学目的1、掌握双缩脲试剂的制备原理。 和要 2、熟悉重量分析与容量分析的基本操作。 教 求 学 教学双缩脲试剂的制备 内容 要 教学 重点:双缩脲试剂的制备方法; 求 重点难点 难点:重量分析与容量分析的基本操作。 教学学生动手操作为主,课堂演示为辅 媒体 复习对比试验 旧课 一、原理: 准确称取一定量的物质,溶解后,定量转移到容量瓶中,稀释至一定体积, 根据称取物质的质量和容量瓶的体积,即可算出溶液中该物质的准确浓度。 二、操作 双缩脲试剂的制备 讲 1、NaOH溶液的制备 教 授 用两支干净的塑料试管配平天平后,称取2.4gNaOH于试管中用少许 新 学 课 D.W.溶解。 2、双缩脲试剂的制备 过 称取硫酸铜结晶(CuSO4•5H2O)0.3g于烧杯中用D.W.溶解后,加入酒程 石酸钾钠(NaKC4H4O6•4H2O)0.9g,用D.W.溶解后,再加入碘化钾(KI)0.5g,加D.W.溶解,再边搅拌边加入已配好的NaOH溶液,用D.W.定容至100ml容量瓶中。 三、 结果及其讨论: 课堂双缩脲反应的原理,天平称量时的注意事项 提问 课堂双缩脲试剂的制备方法 小节 布置简述重量分析与容量分析时的注意事项、操作 作业 参考钱士匀主编.临床生物化学和生物化学检验实验指导.第2版,北京:人民卫生书目出版社,2003

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 章节 生物化学检验 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 3 教材 生物化学检验 实验八 双缩脲试剂的制备与鉴定(2) 教学目的1、 掌握双缩脲试剂的鉴定方法; 和要 2、 熟悉双缩脲试剂测定总蛋白的原理及操作。 教 求 学 教学双缩脲试剂的鉴定 内容 要 教学 重点:双缩脲试剂的鉴定方法; 求 重点难点 难点:双缩脲试剂空白吸光度及定值血清的测定。 教学学生动手操作为主,课堂演示为辅 媒体 复习双缩脲试剂的制备 旧课 一、原理: 1、蛋白质中的肽键(―CONH―)在碱性条件下与Cu2+络合成紫红色复合物, 产生的颜色强度在一定范围内与蛋白质含量成正比。此反应和二分子尿素缩合 后的产物双缩脲 (H2N―CO―NH―CO―NH2)与碱性铜溶液作用形成紫红色 的反应相似,故称为双缩脲反应。 2、合格的双缩脲试剂应为均一的天蓝色溶液,不呈胶体状、无沉淀。试剂空白 吸光度约在0.070,对定值血清的测定值应在许可范围内。 二、操作 讲 双缩脲试剂的鉴定 授 教 1、理学检查:均一的天蓝色溶液,不呈胶体状、无沉淀。 新 学 课 2、试剂空白吸光度及定值血清的测定(校准液浓度:50 g/L) 过 程 样 品(μL) 校准液(μL) D.W.(μL) 试剂R1(μL) 度 空白(B) -- -- 50 2500 校准(C) -- 50 -- 2500 测定(U) 50 -- -- 2500 混匀,37℃水浴10min,0nm,0.5cm的比色皿,D.W.调0,测定3管的吸光 三、结果及其讨论: 试剂空白吸光度约在0.070,定值血清的测定值应在许可范围内。 课堂双缩脲反应的原理,酒石酸钾钠在试剂中起着什么作用? 提问 课堂双缩脲试剂的鉴定方法; 小节 双缩脲试剂测定总蛋白的原理及操作。 布置简述双缩脲试剂鉴定的注意事项。 作业 参考钱士匀主编.临床生物化学和生物化学检验实验指导.第2版,北京:人民卫生书目出版社,2003

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 生物化学检验 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 3 教材 生物化学检验 章节 实验九 溴甲酚绿法 测定白蛋白 教学目的1、掌握溴甲酚绿法测定白蛋白的原理及操作; 和要 2、了解测定白蛋白的临床意义 教 求 学 教学溴甲酚绿法测定白蛋白 内容 要 教学 重点:掌握溴甲酚绿法测定白蛋白的原理 求 重点难点 难点:测定白蛋白的临床意义 教学学生动手操作为主,课堂演示为辅 媒体 复习双缩脲试剂的制备与鉴定 旧课 一、原理 血清白蛋白在pH4.2的缓冲液中带正电荷,在有非离子型表面活性剂存在 时,可与带负电的染料溴甲酚绿(BCG)结合形成蓝绿色复合物,在波长630nm 处有吸收峰,其颜色深浅与白蛋白浓度呈正比,与同样处理的白蛋白标准比较, 可得到血清中白蛋白含量。 二、操作 (一)样品处理 取洁净试管3支,按下表操作 讲 加入物(ml) 空白管标准管测定管教 授 (B) (S) (T) 新 血清 -- -- 0.02 学 课 Alb标准液 -- 0.02 -- D.W. 0.02 -- -- 过 BCG试剂 4.0 4.0 4.0 (二)样品测定 程 在波长630nm处用空白管调零,用定量加液器加BCG试剂;混匀,立即在30s±3s内测定吸光度。 三、计算 血清白蛋白(g/L)=(测定管吸光度/标准管吸光度)×白蛋白标准液浓度 四、结果及其讨论 课堂白蛋白的性质及理化特点;BCP与BCG在测定白蛋白时有何区别? 提问 课堂溴甲酚绿法测定白蛋白的原理; 小节 测定白蛋白的临床意义 布置简述测定白蛋白的注意事项; 作业 测定白蛋白的临床意义。 参考书目 钱士匀主编.临床生物化学和生物化学检验实验指导.第2版,北京:人民卫生出版社,2003

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 章节 生物化学检验 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 3 实验十 血浆脂类测定(1) ——GPO-PAP法测定甘油三酯 教材 生物化学检验 教学目的1、掌握GOD-PAP法的检测原理。 和要 2、掌握用GOD-PAP法检测甘油三酯的操作步骤。 教 求 学 教学GPO-PAP法测定甘油三酯 内容 要 教学 重点:掌握GPO-PAP法测定甘油三酯的原理和操作方法。 求 重点难点 难点:测定原理。 教学学生动手操作为主,课堂演示为辅 媒体 复习甘油三脂测定方法 旧课 一、原理 脂蛋白脂肪酶 甘油三酯 + H2O 甘油 + 脂肪酸 甘油激酶 讲 教 授 新 学 课 过 程 甘油 + ATP 3-磷酸甘油 + ADP 甘油磷酸氧化酶 3-磷酸甘油 + O2 磷酸二羟丙酮 + H2O2 过氧化物酶 H2O2 + 4AAP + phenol 醌亚胺 + H2O (红色,500nm) 二、操作 样 品(μL) 校准液(μL) D.W. (μL) 工作液(μL) 空白(B) -- -- 10 1000 校准(C) -- 10 -- 1000 测定(U) 10 -- -- 1000 混匀,37℃水浴10min,505nm波长,以空白管调0,测定各管吸光度。 A三、计算:CTTCS, 其中 CS=2.26mmol/L AS四、结果及讨论 课堂本法容易受到哪些物质的干扰?如何消除游离甘油的干扰? 提问 课堂GPO-PAP法测定甘油三酯的原理和操作方法。 小节 布置简述GPO-PAP法测定甘油三酯的注意事项。 作业 参考钱士匀主编.临床生物化学和生物化学检验实验指导.第2版,北京:人民卫生书目出版社,2003

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 章节 生物化学检验 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 3 实验十一 血浆脂类测定(2) ——免疫透射比浊法测定载脂蛋白A1 教材 生物化学检验 教学目的掌握免疫透射比浊法测定载脂蛋白A1的原理及操作方法。 和要 教 求 学 教学免疫透射比浊法测定载脂蛋白A1 内容 要 教学 重点:掌握免疫透射比浊法测定载脂蛋白A1的原理和操作方法。 求 重点难点 难点:数据处理方式。 教学学生动手操作为主,课堂演示为辅 媒体 复习载脂蛋白A1测定方法 旧课 一、样品处理 将4瓶含ApoA1的混合校准血清冻干粉分别用0.5 ml D.W.或去离子水 复溶,再将其中的最高浓度管作对倍稀释,共形成5种浓度梯度,见下表: 编号 1 2 3 4 5 ApoA1(g/L) 0.42 0.78 1.05 1.33 2.10 对ApoA1按下表操作: 空白(B) 校准(S) 测定(T) 讲 样 品(μL) -- -- 20 教 授 校准液(μL) -- 20 -- 新 D.W.(μL) 20 -- -- 学 课 试剂R(μL) 2000 2000 2000 二、样品测定 过 混匀,37℃水浴10分钟,主波长340nm,副波长700nm,空白管调0,测 定各管吸光度。 程 三、数据处理 ⑴校准曲线法 ⑵三次方程法 ⑶Log-Logit4p法 四、结果及讨论 课堂本法为何不直接采用单点定标的方法而要采用标准曲线法? 提问 课堂免疫透射比浊法测定载脂蛋白A1的原理和操作方法。 小节 布置简述免疫透射比浊法测定载脂蛋白A1的原理。 作业 参考钱士匀主编.临床生物化学和生物化学检验实验指导.第2版,北京:人民卫生书目出版社,2003

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 章节 生物化学检验 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 3 实验十二 含氮化合物测定(1) ——两点法测定肌酐 教材 生物化学检验 教学目的掌握两点法测定肌酐的原理及操作方法。 和要 教 求 学 教学两点法测定肌酐 内容 要 教学 重点:掌握两点法测定肌酐的原理及操作方法。 求 重点难点 难点:把握反应时间。 教学学生动手操作为主,课堂演示为辅 媒体 复习肌酐测定方法 旧课 一、原理 肌酐与碱性苦味酸试剂反应生成黄红色络合物,在500nm 处选择线性较好 的两个吸光度值,与通过同样处理的标准液比较,即可计算出血中肌酐含量。 二、标准液吸光度变化值的测定:按加样:试剂=0.20ml :2.00ml,混合均匀, 倒入干净比色皿中,立刻记时,在20秒钟时,510nm处读取吸光度值AS1,在 第60秒时,再读取吸光度值AS2 。得到△AS = AS2 — AS1。 教 讲 三、样品吸光度变化值的测定:同上,得到△AT = AT2 — AT1 授 四、计算 △AT 新 学 肌酐浓度CT = ×CS (133μmol/L) 课 △AS 过 五、结果及讨论 程 课堂两点法测定肌酐为什么要严格把握反应时间? 提问 课堂两点法测定肌酐的原理及操作方法。 小节 布置简述两点法测定肌酐的注意事项。 作业 参考钱士匀主编.临床生物化学和生物化学检验实验指导.第2版,北京:人民卫生书目出版社,2003

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 章节 生物化学检验 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 3 实验十三 含氮化合物测定(2) ——尿酸酶-过氧化物酶法测定尿酸 教材 生物化学检验 教学目的掌握尿酸酶-过氧化物酶法测定尿酸的原理及操作方法。 和要 教 求 学 教学尿酸酶-过氧化物酶法测定尿酸 内容 要 教学 重点:尿酸酶-过氧化物酶法测定尿酸的原理及操作方法。 求 重点难点 难点:尿酸测定的影响因素。 教学学生动手操作为主,课堂演示为辅 媒体 复习尿酸测定方法 旧课 一、原理 尿酸在尿酸酶的催化下,氧化生成尿囊素 和 H2O2,H2O2通过Trinder反应, 生成的醌亚胺在520nm处有最大吸收,其程度与血清中尿酸含量成正比,与同 样处理的尿酸标准液比较,可求出血清中尿酸的含量。反应式如下: 尿酸酶 尿囊素 + CO2 + 2 H2O2 尿酸 + O2 + 2 H2O H2O2 + 4-氨基安替比林 + 3,5-二氯-2-羟基苯磺酸 过氧化物酶 醌亚胺 + 2 H2O 二、操作 讲 按下表操作: 教 授 加入物 空白管(B) 标准管(S) 测定管 新 (T) 学 课 样本μl — — 25 标准液μl — 25 — 过 试剂ml 1.0 1.0 1.0 混匀,37℃水浴10分钟,取出冷却至室温,垫好比色皿,520nm处空白管调程 零,测定吸光度AS、AT。 三、计算 ACTTCS, 其中 CS=297μmol/L AS四、结果及讨论 课堂体内尿酸是哪种物质的最终代谢产物?过高会导致哪种疾病? 提问 课堂尿酸酶-过氧化物酶法测定尿酸的原理及操作方法。 小节 布置简述尿酸的测定方法可分为哪几种? 作业 参考钱士匀主编.临床生物化学和生物化学检验实验指导.第2版,北京:人民卫生书目出版社,2003

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 章节 生物化学检验 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 3 实验十四 无机离子测定(1) ——火焰光度法测定钾、钠 教材 生物化学检验 教学++目的1、掌握火焰光度法测K、Na的原理及操作方法。 和要 2、了解测定K+、Na+的临床意义。 教 求 学 教学火焰光度法测定钾、钠 内容 要 教学 ++重点:掌握火焰光度法测K、Na的原理及方法。 求 重点难点 难点:调节火焰与冲洗管道。 教学学生动手操作为主,课堂演示为辅 媒体 复习K、Na测定方法 旧课 一、原理 火焰发射光谱法(FES)是一种原子发射光谱分析技术,利用火焰的热能使 原子被激发而发射出特异的光谱进行分析。钠的特征谱线为5nm(黄色);钾的 特征谱线为767nm(深红色);样品溶液中钠、钾浓度与发射光谱强度成正比。 用已知含量的标准溶液与待测标本相比,即可计算出血清、尿液中的钠钾浓度。 二、预处理 样品与标准均做1:100的稀释(已制备) 三、含量测定 讲 1、打开空气泵,调空气压为0.4kg/cm2 (0.04Mpa) 教 授 2、打开测定开关及燃气压开关,适当调大煤气量 新 3、点火,调节火焰呈淡蓝色 学 课 4、测K+: (1)打开测K+开关 (2)用去离子水调零 过 (3)用k+标准液(4mmol/L)调标至检流计刻度为40,即k+的标准读数 (4)测样品,读刻度 程 测定读数4mmol/L 标准读数5、测Na+:测Na+标准液(140mmol/L)同上,调刻度为70。 测定读数 血清Na浓度140mmol/L 标准读数四、结果及结果分析 (5)计算:血清K浓度课堂++本法测定K、Na的优缺点有哪些?? 提问 课堂++火焰光度法测K、Na的原理及操作方法。 小节 布置简述火焰光度法测定钾、钠的原理。 作业 参考钱士匀主编.临床生物化学和生物化学检验实验指导.第2版,北京:人民卫生书目出版社,2003

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 章节 生物化学检验 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 3 实验十五 无机离子测定(2) ——硫氰酸铁比色法测定氯 教材 生物化学检验 教学目的掌握硫氰酸汞比色法测定氯的原理及操作方法。 和要 教 求 学 教学硫氰酸汞比色法测定氯 内容 要 教学 重点:掌握硫氰酸汞比色法测定氯的原理及操作方法。 求 重点难点 难点:硫氰酸汞比色法影响因素的排除。 教学学生动手操作为主,课堂演示为辅 媒体 复习血清氯测定方法 旧课 一、原理 — 血清中的氯离子与试剂中的硫氰酸汞反应,生成SCN及溶解又不解离的—3+— HgCl2,SCN与试剂中的Fe形成红褐色的Fe(SCN)3,其颜色深浅与CI浓度成正 比,在波长480nm处测定吸光度,与通过同样处理的标准液比较,从而可求出 血清氯的含量。 —— 2CI+ Hg(SCN)2 → HgCI2+2SCN —3+ 3SCN+ Fe→ Fe(SCN)3 二、操作 讲 教 授 加入物(ml) 空白管标准管样品管 新 (B) (C) (U) 学 课 样 品 -- -- 0.01 标准液 -- 0.01 -- 过 工作液 2.0 2.0 2.0 混合均匀,室温反应5min,在波长480nm处,空白管调0,测定各管吸光程 度。 三、计算 血清氯含量(mmol/L)=四、结果及讨论 课堂血清氯测定的临床意义是什么? 提问 课堂硫氰酸汞比色法测定氯的原理及操作方法。 小节 布置简述硫氰酸汞比色法测定氯的原理。 作业 参考钱士匀主编.临床生物化学和生物化学检验实验指导.第2版,北京:人民卫生书目出版社,2003 Au×100 Ac

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 章节 生物化学检验 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 3 教材 生物化学检验 实验十六 底物对酶促反应速度的影响 教学目的1、掌握酶促反应速度随底物浓度变化的原因。 和要 2、掌握底物对酶促反应速度影响的测定方法。 教 求 学 教学底物对酶促反应速度的影响 内容 要 教学 重点:掌握酶促反应速度随底物浓度的变化关系。 求 重点难点 难点:把握水浴时间,准确加样。 教学学生动手操作为主,课堂演示为辅 媒体 复习GOD-POD 法测Glu的原理。 旧课 一、原理 不同浓度的底物占据酶活性中心的程度不同,影响酶促反应的速度就不同。 根据中间产物学说,在酶的活性中心被完全饱和以前,底物浓度越大,酶和底 物生成的中间产物就越多,酶促反应速度就越大。但当酶的活性中心被完全饱 和以后,溶液中没有多余的酶,即使增加底物浓度也不会有更多的中间产物生 成,此时酶促反应速度与底物无关,达到最大反应速度。 配制不同浓度的葡萄糖标准溶液,在葡萄糖氧化酶-过氧化物酶 (GOD-POD)催化下进行反应,测定反应完成时(15分钟)的吸光度A,从而教 讲 观察反应速度的动态变化。 授 以葡萄糖浓度C为横坐标,吸光度A为纵坐标,绘制出A-C标准曲线(又称校学 新 准曲线、剂量工作曲线)。曲线中呈线性的浓度范围为线性范围。 课 二、样品的处理与测定 过 同实验二。 三、绘制A-C曲线 程 同实验二。 四、结果及讨论 课堂酶促反应速度随底物浓度的变化关系是怎样的? 提问 课堂掌握酶促反应速度随底物浓度的变化关系;GOD-POD 法测Glu的原理。 小节 布置简述GOD-POD 法测Glu的原理。 作业 参考钱士匀主编.临床生物化学和生物化学检验实验指导.第2版,北京:人民卫生书目出版社,2003

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 章节 生物化学检验 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 3 实验十七 速率法测定酶活性 ——连续监测法测定碱性磷酸酶 教材 生物化学检验 教学目的掌握连续监测法测定血清碱性磷酸酶(ALP)的原理及方法。 和要 教 求 学 教学连续监测法测定碱性磷酸酶 内容 要 教学 重点:连续监测法测定血清碱性磷酸酶(ALP)原理及方法。 求 重点难点 难点:把握测定时间。 教学学生动手操作为主,课堂演示为辅 媒体 复习碱性磷酸酶测定方法 旧课 一、操作(如下表) 空白管(B) 测定管(T) 血清(ml) / 0.02 D.W.(ml) 0.02 / 4NPP试剂(ml) 1.0 1.0 混匀,室温405nm处,立即用0.5cm的比色皿分别在第1、2、3、4分钟时,以D.W. 调零,测定各吸光度值A1、A2、A3、A4 ,并计算出△A2、△A3、△A4 A1 A2;△A2=A2-A1 教 讲 A3;△A3=A3-A2 授 A4;△A4=A4-A3 学 新 △A/min=(△A2+△A3+△A4)/3 课 过 程 二、计算:ALP(U/L) = ( △AT/min — △AB/min) ×Factor V103Factor=TmlV=5514 其中,△A/min:线性期内每分钟吸光度变化值;l:比色杯光径(0.5cm); V:血清或D.W.体积,VT:反应液总体积(血清或D.W.+试剂);mε:生色物毫摩尔吸光系数=18.5 L·mmol-1·cm-1。 三、结果及结果分析 课堂对硝基苯磷酸二钠比色法测定碱性磷酸酶的原理是什么? 提问 课堂连续监测法测定血清碱性磷酸酶(ALP)原理及方法。 小节 布置简述酶活性单位计算公式各个指标的意义。 作业 参考钱士匀主编.临床生物化学和生物化学检验实验指导.第2版,北京:人民卫生出书目版社,2003

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***医学院 《生物化学检验》 课程教案 教研室 生化检验 课程 章节 生物化学检验 专业(层次) 医学检验(专科) 学时 3 实验十八 标准曲线法测定酶活性 ——赖氏法测定ALT 教材 生物化学检验 教学目的1、掌握赖氏法测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)的原理及操作; 和要 2、了解测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)的临床意义。 教 求 学 教学赖氏法测定ALT 内容 要 教学 重点:掌握赖氏法测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)的原理及操作方法。 求 重点难点 难点:标准曲线与样本测定条件的一致性。 教学学生动手操作为主,课堂演示为辅 媒体 复习丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定方法 旧课 一、原理 ALT 讲 教 授 新 学 课 过 程 L–丙氨酸 + α- 酮戊二酸 α- 丙氨酸 + L–谷氨酸 碱性条件下 α–丙酮酸 + 2,4 - 二硝基苯肼 2,4 - 二硝基苯腙 2,4 - 二硝基苯腙为红棕色化合物,λmax =505nm。利用比色分析原理将样品显色与丙酮酸标准品配成的标准液比较,即可求出样品中ALT活性。 二、操作:取两只试管,按下表量加入各溶液: 加入物(ml) 空白管(B) 测定管(T) 血清 0.1 0.1 基质缓冲液 / 0.5 混匀,37℃水浴30分钟 2、4-二硝苯肼溶液 0.5 0.5 基质缓冲液 0.5 / 混匀,37℃水浴20分钟 0.4mol/L NaOH 5.0 5.0 混匀,室温放置10分钟,以D.W.调零,在505nm处测定AB、AT,以AT-AB值查标准曲线,得血清ALT卡门氏单位值。 三、结果及结果分析 课堂血清ALT测定的临床意义是什么? 提问 课堂赖氏法测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)的原理及操作。 小节 布置简述赖氏法测定ALT的方法学评价。 作业 参考钱士匀主编.临床生物化学和生物化学检验实验指导.第2版,北京:人民卫生书目出版社,2003

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