瓣 蠹 ｉ 镰 …。 燃触惑 爨 色谱法测定食品、饮料中的诱惑红 袁书荣，刘宏科 （广州市花都质量技术监督检测所，广东广州５１０８００） 摘要：建立了一种简单、准确的高效液相色谱测定食品中诱惑红含量的方法。用ｃ 。柱梯度洗脱使诱惑红与柠檬黄、苋菜 红、胭脂红、日落黄、亮蓝等良好分离。结果显示ＲＳＤ小于３％，回收率为９５．４％～１００．７％，线性相关系数Ｏ．９９９。该法前处 理简单，回收率高，操作简便，测定结果令人满意。 关键词：高效液相色谱法；诱惑红；食品 中图分类号：０６５７．７２ 文献标识码：Ａ 人工合成色素与我们的生活关系越来越密切， １．２．１柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、亮蓝 广泛用于各类食品的生产、加工中，以诱惑红为例， 标准液：５００Ｉｘｇ／ｍｌ，国家标准物质中心。 在ＧＢ ２７６０－２００７（１￣品添加剂使用卫生标准》中，诱 １．２．２诱惑红含量８０％。 惑红用于糖果包衣最大使用量为０．３ｇ／ｋｇ、糕点上 １．２．３诱惑红储备液称取０．０６２５ｇ诱惑红，用高 彩装为０．Ｏ５ｇ／ｋｇ、饮料类为０．１ｇ／ｋｇ、冷冻饮品为 纯水溶解，转移至１００ｍｌ容量瓶中，定容至刻度， ０．０７ｇ／ｋｇ、果冻为０．０２５ ｋｇ、干果类为０．０７ｇ／ｋｇ、 此溶液浓度为５００ｐ￣ｇ／ｒ￣ａ。 膨化食品为０．Ｉｇ／ｋｇ……有研究显示长期摄入诱惑 １．２．４标准中间液分别吸取５．ＯＯｍｌ柠檬黄、苋 红、柠檬黄、日落黄、胭脂红、喹啉黄等人工合 菜红、胭脂红、日落黄、亮蓝标准液，８．０ｍｌ诱惑 成色素会影响儿童的智力，严重时可导致儿童的 红标准液于５０ｍｌ－Ｗ量瓶中，用高纯水定容至刻 ＩＱ值下降５．５分，因此，建立快捷、准确的测定 度，此溶液含柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、 方法很有必要。 亮蓝浓度为５０Ｉｘｇ／ｍｌ，含诱惑红８０ｐ，ｇ／ｉｒｄ。 目前，国标法测定食品中诱惑红采用纸层色 １．２．５标准工作液吸取上述标准中间液１Ｏｒａｌ于 谱光度法ＩｌＩ，但该法较为繁琐，难于掌握，利用高 ５０ｍｌ容量瓶中，用高纯水定容至刻度，此溶液含 效液相色谱仪测定食品中诱惑红的报道并不多见。 柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、亮蓝浓度为 本文提出用高效液相色谱法测定食品中的诱惑红， １０ｉｘｇ／ｍｌ，含诱惑红１６１ｘｇ／ｍｌ。 利用梯度洗脱，使诱惑红与柠檬黄、苋菜红、胭脂 其它与ＧＢ／Ｔ５００９．１４１—２００３相同。 红、日落黄、亮蓝得到良好的分离，一次进样，同时 １．３色谱条件 出峰。该方法在我所计量认证审查认可的盲样考核 色谱柱：Ａｋａｓｉｌ—Ｃ１８（４．６ｍｍｘ２５０ｍｍ，１０１．￣ｍ）、 分析中，分析结果（１．９６ ｇ，ｍ１）与标准值（２．０Ｉ￣ｇ／ｍ１） 柱温４０ｑＣ、检测波长２５４ｎｍ、进样量１０１．ｔ，１； 非常吻合，并已用于实际样品的分析测定。 流动相Ａ：０．０２ｍｏｌ／Ｌ乙酸铵溶液（ｐＨ＝４）； 流动相Ｂ：甲醇（色谱纯）； １实验部分 梯度洗脱条件：甲醇：１５％－３５％，５％／ｍｉｎ；３５％－ １．１仪器 ９８％．９％／ｍｉｎ，持续１ｍｉｎ；１５％持续４．５ｍｉｎ。 岛津ＬＣ一２０１０Ａ高效液相色谱仪、紫外检测器、 １．４实验方法 自动进样系统、ＬＣｓｏｌｕｔｉｏｎ数据处理系统、ＨＳ一２３— １．４．１液体饮料称取约５ｇ样品，加水至５１３ｍ￣左 ０２６超声波清洗器。 右，用柠檬酸溶液（２００ｇ／Ｌ）调至ｐＨ＝４左右后，加 １．２试齐Ｕ １００～２００目的聚酰胺粉１ｇ，搅拌片刻，静置５ｒａｉｎ， 【收稿日期１ ２００８—０７—０９ 【作者简介】袁书荣（１９６４一），男，汉，工程师，华东地质学院工业分析系（现东华理工大学）毕业，主要从事食品化工检验。 ０ｏ∞Ｂｏｔ ｅｃｔ ｉｏ ｎ＆Ａ ｎ ａｌｙｓｓ ． ．． ．量 ．通过Ｇ３砂芯漏斗过滤，用ｐＨ＝６温度为６Ｏ℃的热 水洗３～５次，每次约１Ｏｒａｌ，再用甲醇甲酸混合液 （６０：４０）洗３～５次，每次约１Ｏｒａｌ，蒸馏水洗至中性， 然后用乙醇一氨水一水混合液（７０：２０：２０）洗脱色素， 洗脱液水浴上蒸发至２～３ｍｌ，取下，定容至５ｍｌ， 通过Ｏ．４５ ｍ滤膜过滤后上机测定。外标法定量计 算。 １．４．２固体饮料称取约５ｇ样品，加热水浸泡后 分离，反复提取色素至试样无色素为止，合并色 素漂洗液为试样液。以下按“用柠檬酸溶液（２ｏｌ３ ｇ／Ｌ） 调至ｐＨ＝４左右后”操作。 图１ ６种合成色素谱图 ２结果与讨论 ２．５精密度和回收率实验（表１） ２．１通过试验，证明方法可以使诱惑红与其它５ 本法对样品进行加标回收率试验，结果表明 种色素可以同时出峰且分离良好，简化了测定步 回收率在９５．４％～１００．７％之间，ＲＳＤ为２．７６％，回 骤。 收率和标准偏差结果满意。 ２．２ 吸附酸度的选择 按照ＧＢ／Ｔ ５００９．３５—２００３ 表１回收率和相对标准偏差 《食品中合成着色剂的测定》的吸附酸度进行吸附闭， 发现聚酰胺粉对合成色素的吸附率不高，通过试 验，发现当ｐＨ约为４时，吸附率可达到９９％以 上，故选择ｐＨ＝４左右作为吸附酸度。 ２．３本法固体饮料样品液处理采用热水浸泡后， 离心取上清液，离心目的是为了防止样品溶液在 抽滤是堵塞Ｇ３漏斗。 参考文献 ２．４标准曲线（图１） 实验表明，诱惑红浓度在０～１Ｏ０ｌａ，ｇ／ｍｌ范围内， ［１］ＧＢ／Ｔ ５００９．１４１—２００３．食品中诱惑红的测定【Ｓ】． 色谱峰面积与浓度呈线性关系，检出限为０．Ｏ１ Ｉ－￣ｇ／ｍｌ。 ［２］ＧＢ／Ｔ ５００９．３５～２００３．食品中合成着色剂的测定ＩＳ］ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｆａｎｃｙ Ｒｅｄ ｉｎ ｆｏｏｄ ａｎｄ ｂｅｖｅｒａｇｅｓ ｂｙ ＨＰＬＣ ＹＵＡＮ Ｓｈｕ－ｒｏｎｇ，ＬＩＵ Ｈｏｎｇ—ｋｅ （Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｈｕａｄｕ Ｑｕａｌｉｔｙ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｓｕｐｅｒｖｉｓｉｏｎ ａｎｄ Ｔｅｓｔｉｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５］０８００，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａ ｓｉｍｐｌｅ ａｎｄ ａｃｃｕｒａｔｅ ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｆａｎｃｙ Ｒｅｄ ｉｎ ｆｏｏｄ．Ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｏｎ ａ Ｃｌ８ ｃｏｌｕｍｎ ｔｏ ｓｅｐａｒａｔｅ Ｆａｎｃｙ Ｒｅｄ ｆｏｒｍ ｔａｒｔｒａｚｉｎｅ，ａｍａｒａｎｔｈ，Ｐｏｎｃｅａｕ ４Ｒ，Ｓｕｎｓｅｔ Ｙｅｌｌｏｗ ａｎｄ Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ Ｂｌｕｅ ｂｙ ｇｒａｄｉｅｎｔ ｅｌｕｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ＲＳＤ ｗａｓ ｌｅｓｓ ｔｈａｎ ３％，ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗａｓ ９５．４％～１００．７％．ａｎｄ ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｒｅｌ— ａｔｉｖｅ ｃｏｅｆｉｆｃｉｅｎｔ ｗａｓ Ｏ．９９９．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄ ｂｙ ｓｉｍｐｌｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ｈｉｇｈ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ａｎｄ ｅａｓｙ ｏｐｅｒａｔｉｏｎ，ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｃｏｕｌｄ ｇｉｖｅ ｓａｔｉｓｆａｃ— ｔｏｒｙ ｒｅｓｕｌｔｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ＨＰＬＣ；Ｆａｎｃｙ Ｒｅｄ；ｆｏｏｄ —ｌｉ， ｌ ６０Ｏａｒｌ一左右。在价格方面，“迷你”包装 的饮料并不比普通装便宜 ｏ０∞
