westernblot曝光得到的图片，到底是要分析灰度值还是密度值？

值？

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一般WB的分析都是测量积分光密度，也就是IOD。这个值一般IOD=area x density(mean)

......

一、利用ImagJ对WB条带进行灰度分析 1、File——》open 打开WB片子

2、把图片转化成灰度图片 image——》type——》8-bit 3、消除背景影响 process——》subtract background 选择50基本可以

4、设置定量参数 analyze——》set measurements，点击面积，平均密度和灰度值及Integrated Density

5、设置单位 analyze——》set scale ，在“unit of length”的方框里输入“pixels”

6、把图片转换成亮带，Edit——》invert

7、选择Freehand Selection，尽量把条带圈起来，点击键盘m，出来IntDen灰度值

8、复制数据IntDen进行分析

二、利用ImagJ对WB条带进行密度分析 1、File——》open 打开WB片子 2、如条带不正，需修正

image——》transform——》rotate 调节angle值，直到条带水平为止

3、选中矩形选项，圈中第一个条带，然后 analyze——》gels——》select first lane（快捷键ctrl+1），然后移动第一个条带上的矩形到第二个条带上，analyze——》gels——》select second lane（快捷键 ctrl+2），最后analyze——》gels——》plot lanes

4、选中直线工具，将开口的波峰关闭

5、选中魔棒工具，点击波峰可以显示波峰下面积，即条带的密度值

6、以第一个数值为基数，其他数值与第一个数值的比值为相对密度

这是我在网上查到的，用ImagJ分析WB条带的方法

到底要选第一种呢？还是第二种呢？