一种鸡肝降解专用复合酶制剂与应用[发明专利]

(12)发明专利申请

(10)申请公布号 CN 109022400 A(43)申请公布日 2018.12.18

(21)申请号 201810950125.9(22)申请日 2018.08.20

(71)申请人 山东隆科特酶制剂有限公司

地址 2700 山东省临沂市沂水县城北工

业园文诚路北首西

申请人 济南正隆生物科技有限公司(72)发明人 陈华彬　王亮亮　王克芬　王兴吉　

张杰　(74)专利代理机构 济南竹森知识产权代理事务

所(普通合伙) 37270

代理人 朱家富(51)Int.Cl.

C12N 9/50(2006.01)C12N 9/48(2006.01)A23L 33/175(2016.01)

权利要求书1页 说明书4页

A23L 33/18(2016.01)A23L 33/10(2016.01)

()发明名称

一种鸡肝降解专用复合酶制剂与应用(57)摘要

本发明涉及一种鸡肝降解专用复合酶制剂与应用。一种鸡肝降解专用复合酶制剂，组份如下，均为重量份：碱性蛋白酶9～11份、风味蛋白酶3～4份；或者，碱性蛋白酶12～18份、氨肽酶4～6份。本发明首次公开了通过将特定比例的碱性蛋白酶、风味蛋白酶或者碱性蛋白酶、氨肽酶复配制得的复合酶制剂在降解鸡肝的过程中不

从而提高了降解产品的观会导致鸡肝颜色变深，

感和品质，增加了产品的应用领域。

CN 109022400 ACN 109022400 A

权　利　要　求　书

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1.一种鸡肝降解专用复合酶制剂，其特征在于，组份如下，均为重量份：碱性蛋白酶9～11份、风味蛋白酶3～4份；或者，碱性蛋白酶12～18份、氨肽酶4～6份。

2.如权利要求1所述的鸡肝降解专用复合酶制剂，其特征在于，所述碱性蛋白酶酶活为45～55万U/g。

3.如权利要求1所述的鸡肝降解专用复合酶制剂，其特征在于，所述风味蛋白酶酶活为8～12万U/g。

4.如权利要求1所述的鸡肝降解专用复合酶制剂，其特征在于，所述氨肽酶酶活为12～18万U/g。

5.权利要求1所述鸡肝降解专用复合酶制剂在降解鸡肝生产中的应用。6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，步骤如下：(1)将预处理后的鸡肝打碎，pH自然，制得鸡肝泥；

(2)将步骤(1)制得的鸡肝泥与上述鸡肝降解专用复合酶制剂混合后，在温度55℃～65℃的条件下酶解，制得酶解液；

当鸡肝降解专用复合酶制剂的组份为碱性蛋白酶、风味蛋白酶时，添加量为鸡肝泥质量的0.12％～0.15％，酶解时间2～5h；当鸡肝降解专用复合酶制剂的组份为碱性蛋白酶、氨肽酶时，添加量为鸡肝泥质量的0.21％～0.22％，酶解时间3～5h；

(3)将步骤(2)制得的酶解液经灭酶活，制得鸡肝降解液。7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述步骤(1)中，预处理为将鸡肝中的胆囊和脂肪去除，然后洗净污血。

8.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述步骤(3)中，灭酶活的条件为90℃～100℃保持10～15min。

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CN 109022400 A

说　明　书

一种鸡肝降解专用复合酶制剂与应用

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技术领域

[0001]本发明涉及一种鸡肝降解专用复合酶制剂与应用，属于复合酶制剂技术领域。背景技术

[0002]水解蛋白是一种优质的蛋白资源，蛋白水解物主要是氨基酸和多肽，具有较高的营养价值。利用廉价的动物余料制备蛋白水解物也越来越受到研究者的关注。[0003]2017年全球鸡肉产量近九千万吨，中国鸡肉产量超过1200万吨，占全球鸡肉总产量的14％。鸡肝占每羽鸡体重的2.0％～2.5％，因此，我国每年鸡肝产量达几十万吨。鸡肝中蛋白质含量占鸡肝干重的70％～80％，而且含有丰富的蛋白质、钙、磷、铁、锌、维生素A及B族维生素。虽然在食品、药用、饲料方面得到一定的应用，但由于鸡肝腥味较重且胆固醇含量较高，市场消费量不大，鸡肝中有价值成分未得到充分利用。前人利用蛋白酶水解鸡肝较好地解决了腥味重和胆固醇高的问题，但是由于酶解后鸡肝颜色变深，影响产品的观感，在市场上受到诸多，针对酶解后颜色加深的问题目前为止还没有相关的研究报道。[0004]技术文献《酶法水解鸡肝的工艺研究》(鞠红英等，《福州大学学报》，2010年4月，文章编号：1000-2243(2010)02-0297-06)公开了分别采用Alcalase、Neutrase、Protamex、Flavourzyme以及木瓜蛋白酶水解鸡肝的工艺条件，综合比较酶解产物水解度、氮回收率、感官质量和胆固醇含量。

[0005]中国专利文献CN101717807A(申请号200910309871.0)公开了一种酶法制备鸡肝水解蛋白的工艺方法，解决了鸡肝因腥味重、胆固醇含量高而利用率不高的问题，本发明以鸡肝为主要原料，选取5种蛋白酶，以水解度为指标，采用单因素实验，考察了原料预处理方法、酶解温度、pH、酶用量(E/S)、底物浓度及酶解时间对各酶水解能力的影响，比较各酶在最佳条件下的酶解效果。并通过优化双酶复合酶解的条件以得到水解效果及风味均较佳的高蛋白酶解产物。本发明通过酶解制备水解蛋白，产品的主要成分是氨基酸和小分子多肽等，无苦味，经检测不含胆固醇，且具有一定抗氧化活性。[0006]上述文献依然未解决酶解后鸡肝颜色变深的问题。

发明内容

[0007]本发明针对现有技术的不足，提供一种鸡肝降解专用复合酶制剂与应用。[0008]术语说明

[0009]酶活力单位(U)：在特定条件下，1分钟内转化1微摩尔底物所需的酶量为一个酶活力单位(U)。

[0010]本发明的技术方案如下：

[0011]一种鸡肝降解专用复合酶制剂，组份如下，均为重量份：[0012]碱性蛋白酶9～11份、风味蛋白酶3～4份；[0013]或者，碱性蛋白酶12～18份、氨肽酶4～6份。[0014]根据本发明优选的，所述碱性蛋白酶酶活为45～55万U/g。

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CN 109022400 A[0015]

说　明　书

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根据本发明优选的，所述风味蛋白酶酶活为8～12万U/g。

[0016]根据本发明优选的，所述氨肽酶酶活为12～18万U/g。

[0017]上述鸡肝降解专用复合酶制剂在降解鸡肝生产中的应用。[0018]上述应用，步骤如下：[0019](1)将预处理后的鸡肝打碎，pH自然，制得鸡肝泥；[0020](2)将步骤(1)制得的鸡肝泥与上述鸡肝降解专用复合酶制剂混合后，在温度55℃～65℃的条件下酶解，制得酶解液；

[0021]当鸡肝降解专用复合酶制剂的组份为碱性蛋白酶、风味蛋白酶时，添加量为鸡肝泥质量的0.12％～0.15％，酶解时间2～5h；当鸡肝降解专用复合酶制剂的组份为碱性蛋白酶、氨肽酶时，添加量为鸡肝泥质量的0.21％～0.22％，酶解时间3～5h；[0022](3)将步骤(2)制得的酶解液经灭酶活，制得鸡肝降解液。[0023]根据本发明优选的，所述步骤(1)中，预处理为将鸡肝中的胆囊和脂肪去除，然后洗净污血。

[0024]根据本发明优选的，所述步骤(3)中，灭酶活的条件为90℃～100℃保持10～15min。

[0025]有益效果[0026]1、本发明首次公开了通过将特定比例的碱性蛋白酶、风味蛋白酶或者碱性蛋白酶、氨肽酶复配制得的复合酶制剂在降解鸡肝的过程中不会导致鸡肝颜色变深，从而提高了降解产品的观感和品质，增加了产品的应用领域；[0027]2、采用本发明所述的复合酶制剂降解鸡肝后获得的水解产物，主要成分是氨基酸、多肽、呈味核苷酸等，显著提高了产品的营养价值。具体实施方式

[0028]下面结合实施例对本发明的技术方案做进一步阐述，但本发明所保护范围不限于此。

[0029]原料来源

[0030]实施例中所述碱性蛋白酶(Alcalase)50万U/g、中性蛋白酶(Neutralprotease)30万U/g、风味蛋白酶(Flavourzyme)10万U/g、氨肽酶(Aminopeptidase)15万U/g均购自隆科特酶制剂有限公司市售产品；其他试剂等均为国产分析纯。[0031]检测方法[0032]1、游离氨基氮含量测定[0033]显色剂：称取10.0g磷酸氢二钠、6.0磷酸二氢钠、0.5g水合茚三酮、0.3g果糖，用水溶解后定容至100ml。[0034]稀释溶液：2g碘酸钾溶于600ml水中，再加入400ml的96％的乙醇。[0035]标准溶液：称取10.72mg甘氨酸溶与1000ml水中得到标准溶液，该溶液中含有氨态氮200mg/ml

[0036]将制得的产物匀浆后6000rpm离心5min，取离心后的上清液用去离子水稀释2000倍后得到待测样，取水、标准甘氨酸溶液、待测样各2.0ml放入比色管中，各比色管分别加入1.0ml显色剂，摇匀。在沸水中加热16min后放入冷水中冷却20min，加入5.0ml的碘酸钾稀释

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CN 109022400 A

说　明　书

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溶液，摇匀，在30min内于570nm处测定吸光值，与标准溶液对比后得到氨基氮的浓度。[0037]2、吸光值测定

[0038]取离心后的上清液使用pH 6.0的磷酸盐缓冲液稀释50倍，使用分光光度计在可见光范围内，吸光值最高的波长(410nm)处测定吸光值。[0039]3、干物质含量测定[0040]取离心后的上清液，使用手持式折光仪计测定上清液中干物质含量。[0041]实施例1

[0042]一种鸡肝降解专用复合酶制剂，组份如下，均为重量份：[0043]碱性蛋白酶9份、风味蛋白酶4份。[0044]实施例2

[0045]一种鸡肝降解专用复合酶制剂，组份如下，均为重量份：[0046]碱性蛋白酶11份、风味蛋白酶3份。[0047]实施例3

[0048]一种鸡肝降解专用复合酶制剂，组份如下，均为重量份：[0049]碱性蛋白酶10份、风味蛋白酶3份。[0050]实施例4

[0051]一种鸡肝降解专用复合酶制剂，组份如下，均为重量份：[0052]碱性蛋白酶12份、氨肽酶5份。[0053]实施例5

[00]一种鸡肝降解专用复合酶制剂，组份如下，均为重量份：[0055]碱性蛋白酶18份、氨肽酶6份。[0056]实施例6

[0057]一种鸡肝降解专用复合酶制剂，组份如下，均为重量份：[0058]碱性蛋白酶15份、氨肽酶4份。[0059]对比例1

[0060]复合酶制剂，组份如下，均为重量份：[0061]碱性蛋白酶1份、风味蛋白酶1份。[0062]对比例2

[0063]复合酶制剂，组份如下，均为重量份：[00]中性蛋白酶10份、风味蛋白酶3份。[0065]对比例3

[0066]复合酶制剂，组份如下，均为重量份：[0067]中性蛋白酶12份、氨肽酶5份。[0068]实验例1

[0069]一种鸡肝降解蛋白液，步骤如下：[0070](1)将鸡肝中的胆囊和脂肪去除，然后洗净污血，打碎，pH自然，制得鸡肝泥；[0071](2)将步骤(1)制得的鸡肝泥分别与实施例1～3及对比例1～3制得的复合酶制剂混合，分别标记为实验组1～6，复合酶制剂的添加比例为鸡肝泥质量的0.12％，在温度60℃的条件下酶解5h，制得酶解液；

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CN 109022400 A[0072]

说　明　书

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(3)将步骤(2)制得的酶解液经95℃保持12min灭酶活，制得鸡肝降解液。

[0073]经检测，实施例1～3在上清液中干物质含量和氨基氮含量、410nm处吸光值全面优于对比例1～3。说明相比对比例1～3，实施例对于鸡肝的水解度高，且在410nm处吸光值较低，色泽鲜艳悦目，解决水解后颜色变深的问题。[0074]表1实验组1-6水解后上清液中干物质含量、410nm处吸光值和氨基氮含量

[0075]

实验例2

[0077]一种鸡肝降解蛋白液，步骤如下：[0078](1)将鸡肝中的胆囊和脂肪去除，然后洗净污血，打碎，pH自然，制得鸡肝泥；[0079](2)将步骤(1)制得的鸡肝泥分别与实施例4～6及对比例1～3制得的复合酶制剂混合，分别标记为实验组7～12，复合酶制剂的添加比例为鸡肝泥质量的0.22％，在温度60℃的条件下酶解5h，制得酶解液；[0080](3)将步骤(2)制得的酶解液经95℃保持12min灭酶活，制得鸡肝降解液。[0081]经检测，实施例4～6在上清液中干物质含量和氨基氮含量、410nm处吸光值全面优于对比例1、对比例2和对比例3，说明相比对比例1～3，实施例4～6对于鸡肝的水解度高且在410nm处吸光值较低，色泽鲜艳悦目，解决水解后颜色变深的问题。[0082]表2实验组7-12水解后上清液干物质含量、410nm处吸光值和氨基氮含量

[0083]

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