医药导报２０１３年６月第３２卷第６期 ・７９１・ 盐酸格拉司琼注射液中光降解产物的含量测定 林丽琴 ，石云峰 （１．杭州市药品检验所，杭州摘要目的３１００１７；２．浙江省食品药品检验研究院，杭州３１０００４） 考察盐酸格拉司琼注射液中光降解产物含量。方法采用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法测定不同厂家 ２２批盐酸格拉司琼注射液中光降解产物。结果２２批盐酸格拉司琼注射液中光降解产物的含量为０．０１％一０．９０％。 结论应增加盐酸格拉司琼注射液中光降解产物的检查，以保证临床用药安全有效。 关键词盐酸格拉司琼；光降解产物；含量测定 中图分类号１１９７５．４；Ｒ９１７ 文献标识码Ａ 盐酸格拉司琼是一种高选择性的５一羟色胺（５－ ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ，５－ＨＴ３）受体拮抗药，通过拮抗中枢 化学感受区及外周神经末梢的５－ＨＴ，受体，从而抑制 恶心、呕吐…。盐酸格拉司琼注射液标准已收载于 《中华人民共和国药典））２０１０年版中 ，标准中有关物 质检查仅控制总杂质含量，未对单个杂质进行限定，查 阅有关资料 得知，盐酸格拉司琼在光照射下，会产 生光降解产物Ⅳ一［（１Ｒ，３Ｒ，５Ｓ）－９一ａｚａｂｉｃｙｃｌｏ［３．３．１］ ｎｏｎ一３．ｖ１］．１ ｍｅｔｈｙ１．１Ｈ—ｉｎｄａｚｏｌｅ－３一ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ。药品检 验中发现，由于没有单个杂质的控制指标，各个厂家光 降解产物含量差别很大。为了考察该药品质量，采用 高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法对国内ｌ０家药品生产企业 的２２批样品（２种规格）中光降解产物进行了考察。 １仪器与试剂 岛津ＬＣ．２０ＡＤ高效液相色谱仪、二极管阵列检测 器（日本岛津仪器有限公司）；盐酸格拉司琼对照品 （中国食品药品检定研究院，批号：１００５５８．２００３０１）； 盐酸格拉司琼注射液（国内１０家企业共２２批样品）； 甲醇，色谱纯；三乙胺、冰醋酸、无水乙酸钠均为分析 纯；二次纯化水。 ２方法与结果 ２．１ 色谱条件 色谱柱：Ａｇｉｌｅｎｔ ＺＯＲＢＡＸ ＣＮ柱 （２５０ ｍｉｎｘ４．６ ｍｍ，５ ｍ），流动相：０．２５％三乙胺的 ０．０５ ｍｏｌ・Ｌ 醋酸钠溶液（用冰醋酸调节ｐＨ至６．０）一 甲醇（５０：５０）；流速：１．０ ｍＬ・ｍｉｎ～；检测波长： ３０２ ｎｍ；进样量：２０ ＩｘＬ；柱温：室温 Ｊ。 ２．２样品配制 ２．２．１ 供试品溶液的配制 取供试品５．０ ｍＬ，置 １０ ｍＬ量瓶中，加流动相稀释至刻度，作为供试品溶液。 收稿日期２０１２－０９—０５修回日期２０１２—１１—１６ 作者简介林丽琴（１９７９一），女，福建福州人，主管药师，硕 士，主要从事药品检验与药品质量标准研究。电话：０５７１— ８５４６３８８９，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｉｎｌｉｑｉｎ２０００＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ。 文章编号１００４－０７８１（２０１３）０６－０７９１－０２ ２．２．２ 对照溶液的制备 精密吸取供试品溶液 １ ｍＬ，置１００ ｍＬ量瓶中，用流动相稀释至刻度，作为 对照溶液。 ２．２．３对照品溶液的制备取盐酸格拉司琼对照品 约１Ｏ ｍｇ，精密称定，用流动相稀释成５ ｇ・ｍＬ 的溶 液作为对照品溶液。 ２．２。４空白辅料溶液的制备盐酸格拉司琼注射液 中的辅料主要为氯化钠或枸橼酸钠，按照各个厂家不 同处方比例称取，按供试品溶液的制备方法制成空白 辅料溶液。 ２．２．５系统适用性溶液的制备取盐酸格拉司琼对 照品适量，加溶剂（取磷酸０．１６ ｍＬ，加水至８０ ｍＬ，加 乙腈２０ ｍＬ，混匀，加己胺０．１ ｍＬ，用三乙胺调节ｐＨ 至７．５）溶解并稀释制成每毫升中约含盐酸格拉司琼 ０．５ ｍｇ的溶液，取适量，置试管中，密塞，在Ｅｌ光下照 射，相对保留时间约为０．９ ｍｉｎ光降解产物含 量＞０．３％，作为系统适用性试液。 ２．３ 系统适用性实验分别吸取系统适用性溶液和 空白辅料溶液各２０ ，按照上述色谱条件，注入液相 色谱仪，记录色谱图。可见盐酸格拉司琼的保留时间 约为１５ ｍｉｎ，光降解产物的保留时间约为１３ ｍｉｎ，二者 之间分离度为３．０，阴性对照对测定无干扰，理论板数 以盐酸格拉司琼计算为４ ０００。 ２．４ 方法专属性 分别取本品溶液５份（批号： ０８１１０１７２），每份５．０ ｍＬ，置１０ ｍＬ棕色量瓶中，分别 加入３ ｔｏｏｌ・Ｌ 盐酸溶液１ ｍＬ，放置８ ｈ，中和后作为 酸破坏供试品溶液；加入３ ｔｏｏｌ・Ｌ 氢氧化钠溶液 １ ｍＬ，放置８ ｈ，作为碱破坏供试品溶液；加入３０％过 氧化氢溶液０．５ ｍＬ，放置３ ｈ，作为氧化破坏供试品溶 液；在Ｅｔ光下放置８ ｈ，作为光破坏供试品溶液；在 ８０ ｃＩ＝水浴中加热２４ ｈ，作为热破坏供试品溶液。上述 酸、碱供试品溶液分别中和后与其余样品均用流动相 稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为测定液并记录 色谱图。实验表明光照对样品的影响最大，光降解产 ・７９２・ Ｈｅｒａｌｄ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｖｏ１．３２ Ｎｏ．６ Ｊｕｎｅ ２０ １ ３ 物是最主要的杂质。 ２．５检测限实验取“２．２．３”项下对照品溶液，逐级 表１盐酸格拉司琼注射液有关物质测定结果 ％ 稀释，制成０．１ ｔｘｇ・ｍＬ 溶液，作为检测限溶液，进样 测定，信噪比（Ｓ／Ｎ）为４．３。 ２．６ 稳定性实验 取批号为０９０４０１的样品，按 “２．２．１”项下制备供试品溶液，避光放置，分别在０，１， ２，４，８，１２ ｈ时进样测定，结果单个最大杂质在 ０．１０６％一０．１１４％范围内，总杂质在０．１５０％一 ０．１５７％范围内，均无显著性变化，表明供试品溶液在 １２ ｈ内稳定。 ２．７样品测定分别吸取对照溶液和供试品溶液各 ２０ ，按照“２．１”项色谱条件，注入液相色谱仪，测 定，计算。结果见表１。 ３讨论 盐酸格拉司琼注射液有关物质测定系统采用盐酸 格拉司琼与其光降解产物之间的分离度来控制，其光 降解产物的产生与日光的强度有较大关联，因此在冬 季与夏季光照下相同时间产生的光降解产物含量相差 极大，在冬季按照《中华人民共和国药典）２０１０年版标 准规定操作光降解产物常常无法产生，必须增加光照 时间才能达到要求，现行《中华人民共和国药典）２０１０ 年版未考虑到季节对实验的影响，建议完善药品质量 标准，在标准中删去光照时间，通过光降解产物的含量 来控制液相系统。 按上述液相条件对所收集到的２２批样品进行检 验，发现所收集的所有样品中均能检出光降解产物，且 为主要杂质。光降解产物与盐酸格拉司琼相对响应因 子为１．０，可以采用自身对照法对其进行控制 。检 验结果显示，不同厂家生产的产品中光降解产物含量 有很大区别，从０．０１％一０．９０％不等，由于其药理作 用尚不明确，所以要对其进行控制。建议药品监督管 理部门完善药品质量标准，增加盐酸格拉司琼注射液 的单个杂质的控制，保证用药安全有效。 参考文献 ［１］ 李江，郭勇，赵建国，等．ＨＰＬＣ测定盐酸格拉司琼葡萄糖 注射液中盐酸格拉司琼含量及有关物质［Ｊ］．应用化工， ２０１１，４０（４）：７１１－７１３． ［２］ 国家药典委员会．中华人民共和国药典（二部）［Ｍ］．北 京：中国医药科技出版社，２０１０：７６４． ［３］ Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ．Ｂｒｉｔｉｓｈ ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ ｆ Ｍ］．Ｌｏｎｄｏｎ：ｔｈｅ Ｓｔａｔｉｏｎｅｒｙ Ｏｆｉｆｃｅ，２００９：９７１—９７３． ［４］ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ．Ｅｕｒｏｐｅａｎ ｐｈａｒｍａｃｏ— ｐｏｅｉａ［Ｍ］．Ｓｔｒａｓｂｏｕｒｇ：Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｄｉｒｅｃｔｏｒａｔｅ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｑｕａｌｉｔｙ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ＆Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ．２０１０：２１２４－２１２６． ＤＯＩ １０．３８７０／ｙｙｄｂ．２０１３．０６．０３４
