嗜酸乳杆菌的体外抑菌研究

维普资讯 http://www.cqvip.com 安徽农业科学，Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＡｎｈｕｉ　Ａ　．Ｓｃｉ．２００８，３６（７）：２６２９—２６３０，２６３５　责任编辑庆珞责任校对马君叶　嗜酸乳杆菌的体外抑菌研究　董锡文　，一，孙晶２，杜春梅２，汪景宽　（１，沈阳农业大学土地与环境学院，辽宁沈阳１１０１６１；２．佳木斯大学生命科学学院，黑龙江佳木斯１５４００７）　摘要［目的］为研究嗜酸乳杆菌的抑茵机理提供一个好的途径。［方法］以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为指示菌株，用ＭＲＳ培养基培养　分离纯化嗜酸乳杆菌，利用单层琼脂平板扩散法检测嗜酸乳杆菌在不同ｐＨ值条件下对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑茵作用。［结果］　在３７℃的恒温箱中培养２４　ｈ后，通过测量抑茵圈大小，可以得知嗜酸乳杆菌对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌有明显的抑茵作用。在适宜　的酸性条件下，嗜酸乳杆菌对大肠杆菌的抑制作用明显，且随着酸度的增强其抑茵效果愈加明显。嗜酸乳杆菌对金黄色葡萄球菌有明　显的抑制作用，但ｐＨ值的变化对其抑茵效果影响不大。［结论］在适宜的生长条件下，嗜酸乳杆菌对一些致病茵具有抑制作用。　关键词　嗜酸乳杆菌；抑茵作用；抑茵圈　中图分类号Ｑ９３９．９７　文献标识码Ａ　文章编号０５１７—６６ｌ１（２００８）０７—０２６２９—０２　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｏｉｌ　ｔｈｅ／ｎ　Ｖ／ｔｒｏ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｓｔａｓｉｓ　ｏｆ　ＬａｃｔｏｂａｃＵ／ｕｓ　ａｃ￣ｌａｔｕｓ　Ｉ］ＯＮＧ　Ｘｉ－ｗｅｎ　ｅｔ　ａｌ（Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆＩａｎｄ　ａｎｄ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ　Ａｇｒｉｃｕｌ￣ａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ，Ｌｉｏｏ￣ｇ　１１０１６１）　Ａｂｓｔｒａｃｔ［Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ］Ｔｈｅ　ｐｕｒｐｏｓｅｗａｓｔｏ　ｓｕｐｐｌｙ　ａｇｏｏｄ　ａｐｐｒｏａｃｈｆｏｒ　ｓｔｕｄｙｉｎｇｔｈｅ　ｂａｃｔｅｒｉｏｓｔａｔｉｃｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　Ｌａｃｔｏｂａｃ／／／ｕｓ∞　口　．［Ｍｅｔｈｏｄ］Ｗｉｔｈ　Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　ａｎｄ　Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　ａｓ　ｉｎｄｉｃａｔｉｖｅ　ｓｔｒａｉｎｓ，ＭＲＳ　ｍｅｄｉａ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｃｕｌｔｕｒｅ，ｉｓｏｌａｔｅ　ｎｄ　ｐｕｒａｉｆｙ　Ｌ．ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ．Ｔｈｅ　ｍｏｎｏｌａｙｅｒａｇａｒ　ｐｌａｔｅ　ｄｉｆｕｓｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ　Ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｃｔ　ｔｈｅ　ｂａｃｔｅｒｉｏｓｔａｓｉｓ　ｏｆ　Ｌ．ａｃ／ｄｏｐｈ／ｌｕｓ　ｏｎ　Ｅ．ｃｏｌｉ　ｎｄ　ａＳ．ａ／ｘ／ｅ／￣ｕｎｄｅｒ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｐＨ　ｖａｌｕｅｓ．［Ｒｅｓｌｕｔ］Ａｆｔｅｒ　ｃｕｌｔｕｒ　ｉｎｇ　ｉｎ　ｃａｌｏｒｓｔａｔ　ａｔ　３７℃ｆｏｒ２４　ｈ，ｉｔ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｋｎｏｗｎ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｍｅａｓｕｒｉｇ　ｔｎｈｅ　ｓｉｚｅｓ　ｆｂａｏｃｔｅｒｉｏｓｔａｔｉｃ　ｃｉｒｃｌｅｓ　ｔｈａｔ　Ｌ．ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ　ｈａｄ　ｏｂｖｉｏｕｓ　ｂａｃｔｅｒｉｏｓｔａｓｉｓ　Ｏｉｌ　Ｅ．ｃｏｌｉ　ａｎｄ　Ｓ．０“　．Ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ｓｕｉｔａｂｌｅ　ａｃｉｄｉｃ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ．ｔｈｅ　ｂａｃｔｅｒｉｏｓｔａｔｉｃ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｌ．ａｄｄｏｐｈｉ￣ｓ　ｏｎ　Ｅ．ｃｏｌｉ　ｗａｓ　ｏｂｖｉｏｕｓ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｂａｃｔｅｒｉｏｓｔａｔｉｃ　ｅｌ－　ｆｅｅｔ　Ｗａｓ　ｉｎ　ｅｖｉｄｅｎｃｅ　ｉｎｃｒｅａｓｅ　ａｌｏｎｇｗｉｈ　ｔｈｅ　ｉｔｎｃｒｅｍｅｎｔ　ｏｆａｃｉｉｔｄｙ．Ｌ．ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ　ｈａｄ　ｏｂｖｉｏｕｓ　ｂａｃｔｅｒｉｏｓｔａｓｉｓ　ｏｎ　Ｓ．ｎ“，ｅ　。ｂｕｔ　ｔｈｅ　ｃｈａｎｇｅ　ｏｆｐＨ　ｖａｌｕｅ　ｈａｄ　ｌｉｔｔｌｅ　ｉｎｌｆｕｅｎｃｅ　ｏｎ　ｉｔｓ　ｂａｃｔｅｉｆｏｓｔａｉｆｃ　ｅｆｆｃｔｅ．［Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ］Ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ｓｕｉｔａｂｌｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ，Ｌ．ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ　ｈａｄ　ｂａｃｔｅｒｉｏｓｔｓｉａｓ　ｏｎ　ｓｏｉｎｅ　ｐａｈｔｏｇｅｎｉｃ　ｂａｃｔｅｒｉａ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ　Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ；Ｂａｃｔｅｒｉｏｓｔｓｉａｓ；Ｂａｃｔｅｒｉｏｓｔａｔｉｃ　ｃｉｒｃｌｅ　嗜酸乳杆菌（Ｌａｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）是一种常见的益生　菌…１，对其在食品、医学、农业中的影响研究较多ｌ２～１１］ｏ把它　械厂；标准型双人超净工作台，苏净集团苏州安泰空气技术　有限公司；　ＸＢ．Ｋ－２５型血球计数板，上海市求精生化试剂仪器　有限公司。　１．２试验方法　加入饲料中，在提高畜禽生长速度、增强机体免疫力、预防和　治疗流行性腹泻、提高幼龄动物成活率、改善饲料利用率等　方面发挥着显著的作用，其作用机理的研究已越来越受到人　们的重视。对其进行体外抑菌的试验，可以为嗜酸乳杆菌的　抑菌机理研究提供一个良好的途径。　１材料与方法　１．１试验材料　１．２．１嗜酸乳杆菌菌株的鉴定。取含益生菌的盒装蒙牛酸　牛奶１盒。置于３７℃恒温箱中４８　ｈ，盒体膨胀后取出，无菌　吸管吸取少量并用无菌水进行适当稀释，制片，用碱性美兰　染液染色、镜检，可以看到视野中有杆状，两端圆、球杆状等，　排列呈栅栏状、链状等出现的嗜酸乳杆菌，以单杆或双杆状　出现的保加利亚杆菌和球状呈链出现的嗜热链球菌，再通过　生化试验和培养基和培养基颜色变化试验进行进一步鉴定　确认［１２］。　１．１．１菌株。抑制菌：嗜酸乳杆菌Ｌａｔｏｂａｅｉｌｌｕｓ　ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ（由　蒙牛酸牛奶中分离纯化得到）；指示菌：大肠埃希氏菌　．　ｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ、金黄色葡萄球菌Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｕｓ　ａｉｌｒｅｌｌｓ（由佳木斯大　学微生物室提供）。　１．１．２培养基。①ＭＲＳ液体培养基：用于培养嗜酸乳杆菌。　１．２．２　嗜酸乳杆菌的初次分离。吸取１　ｍｌ酸牛奶制成稀释　度为１０　的菌悬液，混匀。分别制成１０＿。、１０～、１０～、１０　的　蛋白胨１０　ｇ，牛肉膏１０　ｇ，酵母膏５　ｇ，Ｋ２ＨＰＯ４　２　ｇ，醋酸钠５　ｇ，　柠檬酸铵２　ｇ，葡萄糖２０　ｇ，吐温．８０　１　ｍｌ，硫酸镁０．５８　ｇ，硫酸　锰０．２５　ｇ，蒸馏水加至１　０００ｍｌ，调ｐＨ至６．０。②ＭＲＳ固体培　养基：用于培养嗜酸乳杆菌。在制好的ＭＲＳ液体培养基中　加入１．５％～２．０％的琼脂。③牛肉膏蛋白胨培养基：用于培　菌悬液。分别用血球计数板计数，将浓度为１　个／ｍｌ的菌　悬液用划线分离法在ＭＲＳ固体平板培养基上分离。置于　３７℃恒温箱中培养２４　ｈ。　１．２．３　嗜酸乳杆菌分离纯化。初次分离后的平板上长出２　个较大的菌苔经过划线分离后得到３个形态迥异的菌落。　其中菌落呈圆形，隆起，乳白色，光滑，直径１～２　ｍｉｌｌ，经镜检　养大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。牛肉膏０．３　ｇ，蛋白胨１．０　ｇ，　氯化钠０．５　ｇ，琼脂１．５　ｇ，蒸馏水加至１　０００　ｍｌ，调ｐＨ至７．２　～均为杆状，两端圆。以呈细长杆状、较粗杆状、球杆状等，排　列呈栅栏状、链状等存在，即为试验所用抑制菌嗜酸乳杆菌。　７．６。　１．１．３试验仪器。ＨＩ－ｉ．Ｂｌ１．４２０－ＢＳ电热恒温培养箱，上海跃　进医疗器械厂；ＴＤＺ２５．ＷＳ多管架自动平衡离心机，长沙湘仪　离心机有限公司；ｐＨ精密测量仪，上海雷磁仪器厂；ＢＳ１１０Ｓ　型电子天平，郑州长城科工贸有限公司出产；８３０２型不锈钢　手提式压力蒸汽灭菌锅，上海博迅实业有限公司医疗器　作者简介收稿日期１．２．４　嗜酸乳杆菌发酵上清液的制备及处理。将嗜酸乳杆　菌的发酵液装入离心管中，以４　０００　ｒ／ｍｉｎ的转速离心１５　ｍｉｎ。　然后用微孔滤膜过滤除菌，得到上清液，再用１　ｍｏｌ／Ｌ　ＮａＯＨ　和ｌ　ｍｏｌ／Ｌ　ＨＣ１调节嗜酸乳杆菌发酵上清液，使２种发酵液的　ＤＨ值为２、３、４…５　６　７，用于抑菌试验。用ＮａＯＨ和ＨＣ１调节　ＭＲＳ培养基，也使其ｐＨ值分别为２、３、４、５、６、７，作为抑菌试　董￣．（１９６５一），男，黑龙江佳木斯人，在读博士，教授，从事　微生物学教学及科研工作。　２Ｏ０７．１１．１３　验的对照。　１．２．５　单层琼脂平板扩散试验。向指示菌株大肠埃希氏菌　维普资讯 http://www.cqvip.com ２６３０　安徽农业科学　２００８生　（ＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉⅡｃｏｌｉ）、金黄色葡萄球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｅｏｃｕｓ　ａｔ＿ｏ＇ｅｌｌｓ）的试　管斜面培养基中倒人无菌生理盐水进行稀释混匀，使其菌浓　度达到１ｏ７个／Ｈｌｌ。用无菌吸管吸取１滴指示菌液于牛肉膏　蛋白胨平板上涂布均匀，自然晾干１　ｈ后，用无菌镊子取出在　处理过的上清液中浸泡１０　ｍｉｎ的无菌滤纸片在每个平皿中　等距离放置纸片３个，３次重复。在３７℃的温箱中倒置培养　２４　ｈ后测抑菌圈大小。　２结果与分析　２．１嗜酸乳杆菌对大肠杆菌的抑制效果　通过单层琼脂平　板扩散试验，以及对试验得到的抑菌圈大小的测量所得到的　试验结果见表１。　表１不同ｐＨ条件下嗜酸乳杆菌对大肠杆菌的抑制效果ｉＴｌｎｌ　１既Ｍｅ　１　Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｅｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｌ．ａｃ￣ｄｏｐｈＵｕｓ　ｔｏ　Ｅ．ｃｏｉｌ　Ｉ硼ｄｅｒ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｖａｌｕｅ　从试验结果看，在不加有嗜酸乳杆菌的对照培养基中，　较强的酸性环境对大肠杆菌有一定的抑制作用；而加有嗜酸　乳杆菌的培养基中，在适宜的酸性条件下，嗜酸乳杆菌对大　肠杆菌抑制作用明显，且随着ｐＨ值的减小（酸度的增强）其　抑菌效果愈加明显。从嗜酸乳杆菌生长的ｐＨ条件看，较强　的酸性条件更加利于其抑菌，在ｐＨ值为７的条件下，对照组　没有作用，而嗜酸乳杆菌仍具有一定的抑菌作用，说明嗜酸　乳杆菌抑菌效果显著。图１、２分别是在ｐＨ值为３、２时嗜酸　乳杆菌对大肠杆菌抑制效果。　图１　ｐＨ值为３时的抑制效果图２　ｐｌｌ值为２时的抑制效果　Ｆｉｇ．１　Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｅｆｆｅｃｔ　ｗｉｔｈ　Ｆｉｇ．２　Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｅｆｆｅｃｔ　ｔｈｅ　ｐＨ　ｖａｌｕｅ　ｏｆ３　ｗｉｌｈ　ｆｉｌｅ　ｐＨ　ｖａｌｕｅ　ｏｆ２　２．２嗜酸乳杆菌对金黄色葡萄球菌的抑制效果　通过单层　琼脂平板扩散试验，以及对试验得到的抑菌圈大小的测量所　得到的试验结果见表２。　试验结果表明，在不加有嗜酸乳杆菌的对照培养基中，　一定的酸性环境对金黄色葡萄球菌有一定的抑制作用；而在　加有嗜酸乳杆菌的培养基中，嗜酸乳杆菌对金黄色葡萄球菌　有明显的抑制作用，但ｐＨ值的变化对其抑菌效果影响不大。　图２—４分别是在ｐＨ值为３、２时嗜酸乳杆菌对金黄色葡萄　球菌抑制的效果。　表２不同ｐＨ条件下嗜酸乳杆菌对金黄色葡萄球菌的抑制效果ｉＦｆｎ　Ｍｅ　２　Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｅｆｅｃｔ　０ｆ　Ｌ．伽越　瑚＿ｔｏ　Ｅ．ｔｏｌｌ　ｉｎ＇ｌｄｌ＠ｒ　ｄｉｆｅｘｔｍｔ　ｐＨ　ｖａｌｕｅ　图３　ｐＨ值为３时的抑菌效果　图４　Ｉ值为２时的抑菌效果　Ｆｉｇ．３　Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｅｆｅｃｔ　ｗｉｔｈ　№．４　Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｅｆｆｅｃｔ　ｔｈｅ　ｖａｌｕｅ　０ｆ３　ｔｌｌｔｈｅ　Ｉ　ｖａｌｕｅ　ｏｆ２　３结论　（１）试验分别以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌为指示菌珠，　采用单层琼脂平板扩散法，研究嗜酸乳杆菌对大肠杆菌和金　黄色葡萄球菌的体外抑制效果。结果表明，嗜酸乳杆菌对２　种菌株均具有拮抗特性。　（２）与对照组相比较，嗜酸乳杆菌对金黄色葡萄球菌有　显著的抑菌作用，但对抑菌效果不如对大肠杆菌的抑制效　果强。　（３）酸『生环境强弱对嗜酸乳杆菌的抑菌作用影响不是绝　对的，ｐＨ值为７时嗜酸乳杆菌仍具有明显的抑菌作用。　（４）嗜酸乳杆菌在其生长中乳酸的快速积累使培养基的　ｐＨ值迅速下降，从而使不耐酸的致病菌迅速死亡而达到抑　菌效果。嗜酸乳杆菌的抑菌作用提示，采用该菌生产的微生　态制剂和生物活性食品可以调整肠道有益和有害微生物菌　群的平衡，从而充分发挥其健康促进效果。　参考文献　［１］郭本叵．益生菌［川．北京：化学工业出版社，２０（Ｂ：Ｚ３—２５，２９２—３３２．　［２］ＴＵＯＭＯＬＡ　Ｅ，ＣＰｄＩＴＥＮＤＥＮＲ，ＰＬＡＹＮＥ　Ｍ，』ｄ　ａ１．Ｑｕ　ｔｙ　ａ￥ｓｕｒｏｌｌｃｅ　ｃｒｉｔｅｒｉａ　ｆｏｒ　ｐｒｏｂｉ￣ｉｃ　ｂａｃｔｅｒｉａ［Ｊ］．Ａｍ￣ｃｆｌｎ　Ｊａｍ￣ｌ　０ｆ臼　ｃａｌ　Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ．２００１．２（７３）：　３９３—３９８．　［３］ＮＡＩＤＵ　Ａ　ｓ，ＢＩＤＬＡＣＫ　Ｗ　Ｒ，ＣＩＥＭＥＮＴ５　Ｒ　Ａ．Ｐｒｏｂｉ￣ｉｃ　ｓｐｅｃｔｒａ　０ｆｌａｃｔｉｃ　ａｃｉｄ　ｂａｃｔｅｒｉａ（ＬＡＢ）［Ｊ］．Ｃｒｉｔｉｃａｌ　Ｒｅｖｉｅｗｓ　ｉｎ　Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，１９９９，１　（３９）：１２３—１２６．　［４］赵强忠，赵谋明，蒋文真．～种分离和检测酸乳中乳酸菌的有效方法　［Ｊ］．食品与发酵工业，２Ｏ０７，３３（３）：９６—９９．　［５］ＢＥＺＫＯＲＯＶＡＩＮＹ　Ａ　Ｐｒｏｂｉ￣ｉｃｓ　ｄｅｔｅｉｎ／ｎａｎｔｓｄ　ｓｕｒｖｉｖａｌ　ａｎｄ　ｗｔｈ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｇｕｔ　［Ｊ］．ＡｍＪ　Ｃ１　ｉｎ　Ｎｕｔｒ，２００１，７３（２）：３９９～４０５．　［６］ＳＡＮＤＩＮＥＷ．Ｒｏｌｅｓ　０ｆｂｄａｂａｃｉⅡｕｓｉｎｔｈｅｉｎｔｅｓｔｉｎａｌⅡａ　Ｊ］．ＦｏｏｄＰｒｏｔ，１９９９，　４２：２５９～２６０．　［７］胡学智．益生菌的免疫调节作用［Ｊ］．江苏调味副食品，２０Ｏ６，２３（２）：１—３．　［８］李平兰，潘伟好，吕艳妮，等．微生态制剂中常用乳酸菌对抗生素的药　敏巨研究［Ｊ］．中国农业大学学报，２ＯＯ４，９（１）：１６—２０．　［９］ＡＳＨＯＯＲＳＨ，ＭＯＮＴＥＷＣ．Ｈｉ　ｐｅ　ｍ哪ｃｅｎｑｕｉｄ　ｃ　０ｇｒ叩　ｃｄｅｔｅｎｎ－　（下转第２６３５页）　维普资讯 http://www.cqvip.com ３６卷７期　童永等盘丽鱼胚胎发育的研究　２６３５　体长相近。在神经胚期，尼罗罗非鱼胚盾脑后神经沟有一缢　现在出膜后。平均水温为２７．２℃时尼罗罗非鱼孵化需要　缩，但盘丽鱼无此缢缩。尼罗罗非鱼在视泡形成期于胚体两　侧卵黄囊上有少量色素出现，但盘丽鱼身体直到出膜仍为透　明。尼罗罗非鱼在出膜前已具胸鳍芽，但盘丽鱼的胸鳍芽出　７９．１７　ｈ，而盘丽鱼则只需５０～６０　ｈ。尼罗罗非鱼胚胎发育过　程总积温为２　１５２～３　０２０℃・ｈ，较盘丽鱼多。　从两者的对比来看，盘丽鱼与尼罗罗非鱼开始时发育形　表１盘丽鱼的胚胎发育　ｒｌｌ￣ｂｌｅ　１　ｎｒ出ｒ　ｃ　ｏ￣ｖｅｌＯｌｍｍｌｔ　ｏｆ　Ｓｙｒ￣ｙｓｏｄｏｎ　ｄｉｓｃｕｓ　序号　№．　发育时期　Ｄｅｖｄｏｐｍｅｎｔ￣持续时间　Ｄｕｒ￣ｉｏｎ　累计时间　Ａｃｃｕｍ￣ｉｖｅ　图序　Ｓｅｆｉ￣ｎｕｍｂｅｒ　序号　Ｎ０．　发育时期　Ｄｅｖ￣ｏｐｍｅｎｔａｌ　持续时间　Ｄｕｒ￣ｉｏｎ　累计时间　Ａｅｅｕｍｔｄａｔｉｖｅ　图序　Ｓｅｒｉａ１　ｎ山１１ｂ盯　１　２　ｓｔａ￣ｅ　受精卵Ｚｙｇｏｔｅ　２细胞２－ｃｅｌｌ　ｈ　ｔｉｍｅ∥ｈ　ｉｎ　ｐｌａ＝【ｅ　１２　０．８３　０．８３　１３　ｓｔａ　原肠晚期Ｔｅｒｍｉｎ￣ｇａｓｔｒｕｌａ　ｈ　０．６７　０．３３　Ⅱｎ１ｅ∥ｈ　１３．６７　１４．Ｏ０　ｉｎ　ｐｌａ＝【ｅ　１—７　１—８　神经胚Ｎｅｕｒｕｌａ　３　４　５　６　７　４细胞　ｃｅｌ１　８细胞￣ｃｅｌｌ　１６细胞ｌ￣ｃｅＨ　多细胞期Ｍ　ｔｉ一ｃｅｌＭ￣ｓｔａｇｅ　０．２５　０．２５　０．４２　０．５０　１．Ｏ０　１．０８　１．３３　１．７５　２．Ｏ０　３．Ｏ０　１—１　１—２　１４　１５　１６　１７　１８　胚孔封闭Ｃｌ￣ｕｒｅ　￣ｔｏｐｏｒｅ　６．Ｏ０　２．７５　１．０８　４．Ｏ０　２．４２　０．３３　２２．７５　２３．８３　２７．８３　３ｏ．０８　１—９　１—１０　１—１１　１—１２　肌节出现　Ｓａｒｅｏｍｅｒｅ　ｅｍｅｒｇｅｎｃｅ　眼囊期ＯＮｅ　ｖ　ｄｅ　尾芽期Ｔａｉｌｂｕｄ　ｓｔａｇｅ　晶体出现期　Ｃｒｙｓｔａｌｌ￣ｄ　ｅｍｅｒｇｅｎｃｅ　１—１３　１—１４　囊胚早期Ｅａｒｌｙ　ｂｌａｓｔｕＩａ　８　９　１０　ｌ】　囊胚中期　１．Ｏ０　０．５０　５．Ｏ０　３．５０　４．Ｏ０　４．５０　９．５０　１３．Ｏ０　１—３　１—４　１～５　１～６　１９　２０　２１　２２　肌肉效应期Ｍｕｓｅｕｌ￣　龇ｓｔａｇｅ　１．９２　１．１７　１１．８３　５．Ｏ０　３２．Ｏ０　３３．１７　４５．Ｏ０　５０．Ｏ０　１—１５　１—１６　１～１７　１～ｌ８　１～１９　１～２０　Ｍｅｔａｐｈａｓｅ　ｂ１ａｓｔｕＩａ　囊胚晚期Ｔｅｒｍｉ一ｈａｌ￣ｔｕｌａ　心跳期Ｈｅａｒｔ一　ｂｅａｔｉｎｇ　ｓｔａｇｅ　原肠早期Ｅａｒｌｙ　ｇａｓｔｒｕｌａ　出膜前期Ｐｒｅ＿　ｈａｔｃＮｎｇ　ｓｔａｇｅ　原肠中期　Ｍｄａｐｈａｓｅ　ｇａｓｔｒｕｌａ　出膜期ＨａｔｃＮｎｇ　ｓｔａｇｅ　态基本一致，随着发育进程的推进，两者间的差异增多。这　（２）：６—９．　种现象符合进化和发育的规律，即动物胚胎发育实际上是进　化的一种短期时间内的一定程度的再现。这说明两者的亲　缘关系并不是很远。　参考文献　［１］周洁，周玉，郭先武．圆尾斗鱼胚胎和仔鱼发育的研究［Ｊ］．海洋湖沼通　报，１９９５，２２（２）：３０—３５．　［２］李叵颂，邬国民．银鲈胚胎和仔鱼发育的研究［Ｊ］．中国水产科学，：￣０００，７　［３］周玉，杨振国，张俊辉．神仙鱼胚胎和仔鱼发育的初步观察［Ｊ］．上海水　产大学学报，２００１，７（４）：３７０～３７３．　［４］何文辉，张美琼，鲍宝龙．七彩神仙鱼人工繁殖主要水质条件的探讨　［Ｊ］．上海水产大学学报，２００１，１０（１）：２２—２５．　［５］施振宁，吴美仙，陈亚琴．七彩神仙鱼的生物学特性研究［Ｊ］．水利渔　业，２ＯＯ３，２３（４）：２４—２５．　［６］列顷连，朱晓平，李建东，等．七彩神仙幼鱼的病害防治试验［Ｊ］．水利渔　业，２ＯＯ４，２４（６）：７６—７７．　［７］王令玲，仇潜如．尼罗罗非鱼胚胎及胚后发育的观察［Ｊ］．动物学报，　１９８１，２７（４）：３２７—３３６．　１６．　（上接第２６３０页）　ｉｎａｔｉｏｎ　０ｆ　Ｂ￣ｄｏｂａｃｔｅｒｌｕｍ　ｂ￣ｄｕｍ　Ｄｗ￡｝ｌｆａｃｔｏｒｓ　ｉｎ　ｈｍ诅ｎ　ｍ￣ｋ［Ｊ］．Ａｓｓｃｃ　Ｏｆｆ　Ａｎａｌ　０】ｅｒｎ，２ＯＯ０，６６（１）：１３５—１３９．　［１０］中国养殖网．益生素国内外应用现状［Ｊ］．中国家禽，２００１，２３（１０）：１５～　［１１］王佳丽，丁鉴锋．微生态制剂在畜禽饲料中的应用及相关作用机制　［Ｊ］．饲料广角，２ＯＯ２（１６）：２２—２３．　［１２］陈芳，靳亚平．奶制品中有益菌的分离鉴定［Ｊ］．黑龙江畜牧兽医，２０Ｏ７　（３）：１０２—１０３．