PBS缓冲液配制

0.01M 磷酸盐缓冲液（PBS）配制办法

称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L便可.在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌（至少20分钟），保管存于室温或4℃冰箱中.需要注意的是，通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的.如果是用于免疫组化的话，则需要在配置的时候辨别参加100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒.

NaCl 8.0g ； KCl 0.2g ； Na2HPO4 1.44g ； KH2PO4 0.24g ；加蒸馏水至 1000ml，调节pH 到 7.4（用Na2HPO4或KH2PO4调节）.用于免疫反响时可参加 0.1%叠氮钠（0.1g/100ml PBS）;当试剂中含有辣根过氧化物酶时，严禁使用叠氮钠，可改用0.01%柳硫汞.

PBS缓冲液配方

按照经验来看，新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.27.4之间，可是在温度的影响下，尤其在夏天，其电离常数产生了改

动，在经过昼夜的时间后，PH值会明显改动（我亲自测过偏酸）.所以做实验的同学可要注意了，PH值可能会影响实验结果，甚至可能导致阴性.所以务必记得这个时候和天气，要增强实验条件控制问题.每次使用前最好用试纸测一下留宿了的PBS，如果产生偏酸或偏碱，注意重新换新液.

PBS缓冲液称取NaCl 8g，KCl 0.2g，Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温保管备用.

PBST缓冲液取300μl Tween20 参加PBS 100ml中，混匀后即刻使用.现用现配.如果是把所有固体加大十倍，配置为浓缩液，任务时候十倍稀释，那么，在刚配好浓缩液时，PH在6.5左右，明显偏酸.不克不及用盐酸调.虽然可以用氢氧化钠颗粒调，但是有更便利的办法.十倍稀释以后，PH自动升高到所需要的值.不需要其它任何处理.这个可以先取少量试一试，配好之后再测一次~

1. NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L

2. 向烧杯中参加约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解.

3. 滴加浓盐酸将pH值调节至8.0，然后参加去离子水将溶液定容至1 L.

4. 低温高压灭菌后，室温保管.注意：上述PBS Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中弥补1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2.

0.05mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution，PBS)的配制：

甲液：0.05mol/L Na2HPO4溶液：称取磷酸氢二钠9.465g 7.099g,加蒸馏水至1000ml ;

乙液：0.05mol/L KH2P04溶液: 称取磷酸二氢钾, 9.07g 6.803g,加蒸馏水至1000m1.

将甲乙液分装在棕色瓶内，于4℃冰箱中保管，用时甲、乙两液各按不合比例混杂，便可得所需pH的缓冲液,见下表:

pH 甲液ml 乙液mI 5.29 2.5 97.5 5.59 5.0 95.0 5.91 10.0 90.0 6.24 20.0 80.0 6.47 30.0 70.0 6. 40.0 60.0 6.81 50.0 50.0 6.98 60.0 40.0 7.17 70.0 30.0 7.38 80.0 20.0 7.73 90.0 10.0 8.04 95.0 5.0

你要配制pH=6.8的PBS，可用甲、乙液各50ml混杂便可.