维普资讯 http://www.cqvip.com 中华传染病杂志２００２年６月第２（１卷第３期 Ｃｈｉｎ Ｊ Ｉｎｆｅｃｔ １）ｉｓ，Ｊｕｎｅ ２００２，Ｖ（）ｌ ２０，Ｎ０ ３ ｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ（、ｈｃｍｏｔｈｅｒ，２０００，４４：２２１ １—２２１３ ０ Ｈｉｇｇｉｎｓ Ｉ （，．（、ｏｌｅｎｌａｎ Ｋ，Ａｍｙｅｓ Ｓ（ Ｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌ ａｎｄ ｂａｃｔｅｒｉｏ Ｊ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，２０００，４５（Ｓｕｐｐｌ １）：７１ ７７ ｓｔａｔｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｇｅｍｉｆｌｏｘａｃｉｎ ａｇａｉｎｓｔ Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｓｐｐ ｉｎ ｖｉｔｒｏ （收稿日期：２００１ ０８一）２） （本义编辑李欣） ＳＰ法检测死胎胸腺组织中ＨＢｃＡｇ的表达 刘伟 赵伟 罗婵 乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）母婴传播是导致新牛儿发育小 良和死亡的重璺因素之一，也是形成众多慢性尤症状携带 者的重要原因 为了解Ｈｌ 通过母燮传播而引起胎儿 一结 、果 乙型月『炎产妇分娩前静脉血检测结果 胸腺封ｉ织感染的情况及其机制，我仃Ｊ进行了如下探讨 ４０例乙型肝炎产妇分娩前静脉血ＨＢＶＭ单项阳性２５ 例（１组），ＨＢｓＡｇ、抗一ＨＢｅ、抗ＨＢｃ皆阳性４例（２组），ＨＢ— ｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｃ皆阳性１１例（３组）： 二、死胎胸腺组织学榆杏 材料和方法 ・、死胎胸腺 ｉ 病理学观察和ＨＢｃＡｇ榆测 采集４０例乙型肝炎广：妇娩下的孕剧存３６～４０阍范围 的死胎，常规尸榆，取胸腺绀织，１０％中性幅尔 ５林固定， ４０例乙型肝炎产妇娩下的死胎胸腺组织胸腺小体数 量日月显减少，见表１。 蜡包埋，组织切片。光学显微镜多视野常规病理学观察， ＳＰ法检测死胎胸腺组织中ＨＢｃＡｇ。４０例乙 月十炎的产妇 中，轻度慢性片ｆ炎１０例，中度慢性肝炎２２例，重度慢性肝炎 表１ 产妇静脉血和死胎胸腺组织中胸腺小体的检测结果 ８例 病毒性肝炎诊断标准根据１９９５年北京第５次传染 病与寄生虫会议修订的诊断标准 ２ｊ 替代实验：分别用正常的兔血清和ｑ一理盐水替代第一 抗体，结果染色均为阴性、 阴性对照实验：取非乙型肝炎产妇娩下的死胎胸腺组 织，ｓｐ法染ＨＢｃＡｇ，结果为阴性＝ 沣：１组－ｑ ２组比较，Ｐ＞０ ０５，各组与３组比较，Ｊ’＜０ ０５； ｌＪＩ Ｆ：低倍视野×２０１） 胸腺小体计数标准（ ／ＬＰＦ）：（ ）：＞４个； （＋）；２～３个；（＋＋）：２个；（＋｝＋）：１个 胸腺小体计数准则： 每例随机选择５个Ｉ．ＰＦ分别进行胸腺小体计数，选择数目居中的 那个ＬＰＦ的胸腺小体数ｆｔ，作为该例的胸腺小体计数值．以减少实 验取样误差 、阳性对照实验：取乙型肝炎患者的胸腺组织，ＳＰ法染 ＨＢｃＡｇ，结果为阳件 免疫病理所需的兔抗ＨＢｓ ＳＰ试剂盒由福建迈新公司 提供。 二、乙型肝炎产立Ｊ分娩前静脉血ＨＢＶ检测 拿部乙型肝炎产立Ｊ分娩前均测静脉血ＨＢｓＡｇ、抗一 ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗一ＨＢｅ、抗ＨＢｃ，采用ＥＬＩＳＡ法检测，药盒由 深圳华元医学生物丁程公一Ｊ提供。 二、诊断标准 死胎胸腺组织ＨＢｃＡｇ阳性诊断以胸腺组织和细胞中 见刮棕黄色颗粒为准 四、统计学处理 死胎胸腺组织中的ＨＢｃＡｇ检测 ４０例乙 肝炎产妇娩下的死胎胸腺组织中ＨＢｃＡｇ阳 性１ ５例，茛中１组中５例，２组中１例，３组中９例 第１ 和第２组死胎胸腺组织中ＨＢｃＡｇ阳性率比较，差异尢显著 性（Ｐ＞０ ０５）；第２组和第３绢死胎胸腺组织中ＨＢｃＡｇ阳 性率比较，差异有显著性（Ｐ＜０ ０５） ＨＢｃＡｇ阳性颚粒在 胸腺细胞浆和细胞『日Ｊ呈点、灶状分布，少数胸腺细胞核膜上 有ＨＢｃＡｇ阳性颗粒分布，毛细血管内也口』 到棕黄色 ＨＢｃＡｇ颗粒 讨 论 取例数，行ｙ 检验。 本组资料显示乙型肝炎产妇娩下的死胎的胸腺组织中 有ｌ－ｔＢｃＡｇ的行在和胸腺组织发育小良，静脉血ＨＢｓＡｇ、 ＨＢｅＡｇ和抗ＨＢｃ阳性的孕妇更易通过母婴垂直传播，使 ＨＢｃＡｇ在胎儿胸腺组织中表达。 基金项目：铁道部２０００年自然科技资金资助项目（Ｊ２０００Ｚ０９５） 作者单位：２１０００３ 南 东南大学医学院附属南京第二医院病 理科 本研究显示，孕妇静脉血ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗一ＨＢｃ阳 性是ＨＢｃＡｇ通过母婴垂直传播在胎儿胸腺组织中表达的 高危因素。这从组织学和分子学证实．ＨＢＶＭ阳性孕妇是 维普资讯 http://www.cqvip.com ｌ７８ 华传染病杂志２００２年６月第２０卷第３期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ，Ｊｕｎｅ ２００２，Ｖｏｌ ２０，Ｎｏ．３ 否将ＨＢｃＡｇ传播给婴儿，与母亲的静脉ＨＢＶＭ的阳件表 达有关，尤其与母亲的静脉血ＨＢｃＡｇ阳性表达有关。 ＨＢｃＡｇ已被证明是含有ＨＢＶ特异性ＤＮＡ聚合酶，是有能 力合成ＤＮＡ的病毒特异性酶，是ＨＢＶ复制的标志ｌ ３ ８ｊ 死胎胸腺中ＨＢｃＡｇ的检测结果，证实ＨＢＶ对死胎胸腺有 很强的亲和力，并可能在其中复制。这还有待在死胎胸腺 中作ＨＢＶ ＤＮＡ牛物探针来进一步证实。 参 考 文 献 １朱启镕，段恕诚，徐华芳．等血源乙型肝炎疫苗阻断母婴传播 免疫效果的八年随访中华传染病杂志，１９９１，９：１４ １８ ２病毒性肝炎防治方案中华传染病杂志，１９９５，１３：２４１ ２４７ ３高寿征，罔庚善，崔振宁，等，主编病毒性肝炎．北京：北京出版 社．１９９４ ２２—３７ 胸腺是培育形成各种Ｔ细胞的器官。无胸腺小体的 胸腺不能培育功能完善的Ｔ细胞。切除新生小鼠的胸腺， 该动物即缺乏Ｔ细胞，细胞的免疫功能低下，机体产生的 抵抗力也显著降低。死胎胸腺组织发育不良（胸腺小体数 量明显减少），导致胎儿不能培育功能完善的Ｔ细胞，细胞 的免疫功能低下，机体产生的抵抗力也显著降低，血液中的 ＨＢｃＡｇ就会进入胸腺，并可能在其中复制 ’ 。 本研究证实，在死胎胸腺中有ＨＢＶ的存在和可能有 ＨＢＶ的复制及胸腺组织发育不良。这可能是ＨＢＶ通过产 妇传播，导致新生儿免疫功能低下，发育不良和死亡的重要 因素，也是新生儿因母婴传播带来乙型肝炎的高发病率和 难以治愈的重要原因。因此，我们要积极开展母婴传播的 阻断工作。 ４ 陈智，扬威．刘克洲，等９例引产死婴胸腺组织中ＨＲＶ ＤＮＡ及 ＨＩ：ｋ＇Ａｇ检测的分析浙江医科大学学报，１９９０，１ ９：２４１ ２４３ ５马晓丽，孙海基，黄海斗＝，等济南地区乙型肝炎病毒母婴传播 途径的探讨中国优生与遗传杂志，１９９９，２５，７：６７—６８ ６ Ａｂｂｏｔｔ ＷＧ，Ｇｅｕｒｓｅｎ Ａ，Ｆｒａｓｅｒ Ｊ１），ｅｔ ａｌ Ｔｈｅ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ａ ｍａ ｔｅｍａｌ ｃｈｒｏｎｉｃ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｒｅｐｅｒｔｏｉｒｅ ｏｆ ｔｒａｎ— ｓｃ ｒｉｂｅｄ Ｔ—ｃｅｌｌ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｂｅｔａ ｃｈａｉｎ ｖａｒｉａｂｌｅ ｒｅｇｉｏｎ ｇｅｎｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｃｏｒｄ ｂｌｏｏｄ Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，１ ９９５．２２（４ Ｐｔ １）：１０３４ １０３９ ７王珊珊，姜普林，彭桂福，等乙型肝炎病毒的父儿传播与肝外 定位中华肝脏病杂志，１９９９，７：２０３ ２０６ ８赵淑华，韩丽英，张 会，等乙型肝炎病毒携带者妊娠对母婴 的危害及预防措施的研究白求恩医科大学学报，２０００，２６：７５— ７６ （收稿日期：２００１ ０６ ０５） （本文编辑 沈漱瑜） 草仙乙肝胶囊抗病毒作用的实验研究 郑关淑 姜锺求 南相允 草仙乙肝胶囊是由延边大学草仙药业有限公司乍产的 治疗慢性乙型肝炎的纯中药制剂。实验研究表明，争仙乙 肝胶囊对鸭乙肝病毒ＤＮＡ有明显的抑制作用［ 。本研究 （一）实验分组 将３２只小鼠随机分为４组，每组８ 只，第１组为牛理盐水组，第２组为ＭＨＶ ２组，第３组为拉 米夫定组，０．０１ ｇ／ｋｇ，第４组为、草仙乙肝组，１ ｇ／ｋｇ。当第 ２组全部死亡时结束试验。 （二）ＭＨＶ ２接种量 小鼠服用上述药物３ ｄ后在 ＭＥＭ培养基中以５×１０ ＰＦＵ／鼠浓度取０ ２ ｍｌ对第２～４ 组小鼠腹腔内接利Ｉ。 旨在观察该药对小鼠肝炎病毒２（ＭＨＶ ２）的抗病毒作用， 现将实验结果报道如下。 材料与方法 一、实验材料 （ ）ＡＩ Ｔ、ＡＳＴ的测定 在小鼠腹部大静脉采血，放 草仙乙肝胶囊，由延边大学草仙药业 置凝固３０ ｍｉｎ，以３ ０００ ｒ／ｒａｉｎ离心２ ｍｉｎ分离血清，用自动 分析仪测定ＡＩ Ｔ和ＡＳＴ （四）肉眼观察及光学显微镜观察 取小鼠肝脏经 １ｏ％固定３ ｄ以上，切片，苏木精 伊红染色，在光 学显微镜下观察。 （一）实验药物有限公司提供；拉米夫定（Ｌａｍｉｖｕｄｉｎｅ），由葛兰素史克公司 生产。草仙乙肝胶囊和拉米夫定均用灭菌的生理盐水稀释 至所需浓度后使用，小鼠用量分别为１ ｇ／ｋｇ ｎ０．０１ ｇ／ｋｇ。 （二）ＭＨＶ ２株 为Ｎｅｌｓｏｎ＿２ｊ首次分离的病毒，给小 鼠注射后可引起肝细胞溶解及坏死，在４～７ｄ内全部死亡。 （三）实验动物 出生４周的雌性小白鼠，体重（２３士 ２）ｇ。 （五）病毒抗原的观察将肝脏石蜡切片，十燥后用二 甲苯和乙醇处理。３７℃，放置含０ ３％的过氧化氢的甲醇 溶液，３０ ｒａｉｎ后，用０ ０１ｍｏｌ／Ｉ ＰＢＳ洗涤３次，每次５ ｍｉｎ， 再用１．５％马血清３７℃反应６０ ｍｉｎ，用０．０１ ｔｏｏｌ／Ｌ ＰＢＳ稀 释为１：４４的第一抗体溶液（抗ＭＨＶ血清）置４℃过夜进行 二、实验方法 作者单位：１３３４００吉林延吉市，延边大学草仙药业有限公司（郑 美淑）；韩国忠北大学动物医学研究所（姜锺求、南相允） 反应。利用０．０１ ｍｏｉ／Ｌ ＰＢＳ洗涤３次，每次５ ｍｉｎ，再用第 二抗体溶液把生物素标记的抗小鼠［ｇＧ（Ｖｅｃｔａｓｔａｉｎ试剂
