尿微量白蛋白检测试剂盒性能评价

中国卫生检验杂志２０１５年６月第２５卷第１１期Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｈｅａｌｔｈ　Ｌａｂ　Ｔｅｃ，Ｊｕｎ．２０１５，Ｖｏ１．２５，Ｎｏ．１１　・临床检验・　尿微量白蛋白检测试剂盒性能评价　解春宝　，传良敏　，罗江蓉　，黄鼓　，黄文芳　１．四川省医学科学院四川省人民医院检验科，四川成都６１００７２；　２．四川省医学科学院四川省人民医院急诊科，四川成都６１００７２　摘要：目的评价深圳迈瑞免疫比浊法检测尿微量白蛋白的性能。方法评价深圳迈瑞免疫透射比浊法检测尿微量　白蛋白的正确度、日内不精密度、日间不精密度、线性范围以及最大稀释度。结果迈瑞尿微量白蛋白检测试剂盒与西　门子特定蛋白分析仪及配套试剂检测结果的偏倚为０．０１７　５　ｍｇ／Ｌ，相关系数（ｒ）为０．９９６，决定系数（ｒ　）为０．９９３。精密　度试验显示，迈瑞尿微量白蛋白检测试剂盒的日内不精密度为１．０４％一１．１７％，日间不精密度为１．７４％～２．７１％。线　性试验显示，该试剂盒在浓度为４　ｍｇ／Ｌ一３００　ｍｇ／Ｌ时呈线性。如果以回收率≤（１００％４－２０％）作为判定标准，则最大　稀释度试验显示该试剂盒的最大稀释度为３０倍。结论深圳迈瑞尿微量白蛋白检测试剂盒正确度高、精密度好、线性　范围宽、最大稀释度高，其性能完全能满足临床的使用要求。　关键词：尿微量白蛋白：性能；评价　中图分类号：Ｒ４４６．１２　文献标识码：Ａ　文章编号：１００４—８６８５（２０１５）１１—１７７０—０２　Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｕｒｉｎｅ　ｍｉｃｒｏａｌｂｕｍｉｎｕｒｉａ　ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ　ｋｉｔ　ＸＩＥ　Ｃｈｕｎ—ｂａｏ　，ＣＨＵＡＮ　Ｌｉａｎｇ—ｒａｉｎ，ＬＵＯ　Ｊｉａｎｇ—ｒｏｎｇ，ＨＵＡＮＧ　Ｙｉ，ＨＵＡＮＧ　Ｗｅｎ—ｆａｎｇ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ．Ｓｉｃｈｕａｎ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ＆Ｓｉｃｈｕａｎ　Ｐｒｏｖｉｃｉｎａｌ　Ｐｅｏｐｌｅ’Ｓ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｃｈｅｎｇｄｕ，Ｓｉｃｈｕａｎ　６１００７２，Ｃｈｉｎａ　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｅｖａｌｕａｔｅ　ｔｈｅ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｏｆ　Ｓｈｅｎｚｈｅｎ　ｍｉｎｄｒａｙ　ｉｍｍｕｎｅ　ｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｙ　ｆｏｒ　ｍｉｃｒｏａｌｂｕｍｉｎｕｒｉａ　ｍｅａｓｕｒｅ—　ｍｅｎｔ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅ　ａｃｃｕｒａｃｙ，ｗｉｔｈｉｎ—ｄａｙ　ｉｍｐｒｅｃｉｓｉｏｎ，ｉｎｔｅｒ—ｄａｙ　ｉｍｐｒｅｃｉｓｉｏｎ，ｌｉｎｅａｒｉｔｙ　ａｎｄ　ｍａｘｉｍｕｍ　ｄｉｌｕｔｉｏｎ　ｄｅｇｒｅｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｓｈｅｎｚｈｅｎ　ｍｉｎｄｒａｙ　ｉｍｍｕｎｏｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｉｃ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｎ　ｍｉｃｒｏａｌｂｕｍｉｎｕｒｉａ　ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ　ｗｅｒｅ　ｅｖａｌｕａｔｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｓｈｅｎｚ—　ｈｅｎ　ｍｉｎｄｒａｙ　ｒｅｇｅｎｔ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｒｅａｇｅｎｔ　ｏｆ　Ｓｉｅｍｅｎｓ　ｓｐｅｃｉｉｆｃ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ａｎａｌｙｚｅｒ，ｔｈｅ　ｂｉａｓ，ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｃｏｅｆｉｃｉｆｅｎｔ（ｒ），ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｃｏ—　ｅｆｉｃｉｆｅｎｔ（ｒ　）ｗａｓ　０．０１７　５　ｍｇ／Ｌ，０．９９６　ａｎｄ　０．９９３，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ　ａｃｃｕｒａｃｙ　ｔｅｓｔ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｗｉｔｈｉｎ—ｄａｙ　ＣＶ　ｏｆ　Ｓｈｅｎｚｈｅｎ　ｍｉｎｄｒａｙ　ｒｅｇｅｎｔ　ｗａｓ　１．Ｏ４％一１．１７％．Ｔｈｅ　ｉｎｔｅｒ—ｄａｙ　ＣＶ　ｏｆ　Ｓｈｅｎｚｈｅｎ　ｍｉｎｄｒａｙ　ｒｅｇｅｎｔ　ｗａｓ　１．７４％一２．７１％．Ｔｈｅ　ｋｉｔ　ｗａｓ　ｌｉｎｅａｒ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　４　ｍｇ／Ｌ一３００　ｍｇ／Ｌ．Ｉｆ　ｔｈｅ　ｃｒｉｔｅｒｉａ　ｗａｓ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ≤（１００％±２０％），ｔｈｅ　ｄｉｌｕｔｉｏｎ　ｔｅｓｔ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｍａｘｉｍｕｍ　ｄｉｌｕｔｉｏｎ　ｄｅｇｒｅｅ　ｗａｓ　３０　ｔｉｍｅｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｓｈｅｎｚｈｅｎ　ｍｉｎｄｒａｙ　ｉｍｍｕｎｅ　ｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｙ　ｋｉｔ　ｈａｓ　ｇｏｏｄ　ａｃｃｕｒａｃｙ，ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ，ｌｉｎｅａｒ　ｒａｎｇｅ，ｍａｘｉｍｕｍ　ｄｉｌｕｔｉｏｎ　ｄｅｇｒｅｅ　ｆｏｒ　ｍｉｃｒｏａｌｂｕｍｉｎｕｒｉａ　ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ，ａｎｄ　ｓｕｉｔｂｌａｅ　ｆｏｒ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｕｓｅ．　Ｋｅｙ　Ｗｏｒｄｓ：Ｍｉｅｒｏａｌｂｕｍｉｎｕｒｉａ；Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ；Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　尿微量白蛋白（ｍｉｃｒｏａｌｂｕｍｉｎｕｒｉａ，ｍＡＬＢ）是一种　小分子蛋白，人体正常状态下９５％的ｍＡＬＢ在近曲小　管被重吸收…。如果肾小球滤过的功能受损，尿中　ｍＡＬＢ的量超过肾小管重吸收的能力时，尿液中　ｍＡＬＢ含量就会升高。因此ｍＡＬＢ在诊断早期或轻　微肾脏损害方面具有重要的提示作用。检测ｍＡＬＢ　的方法较多，试剂质量参差不齐。本研究旨在评价深　圳迈瑞免疫比浊法检测ｍＡＬＢ的方法学性能是否满　足临床的需求。　１材料与方法　剂盒（批号：０４６０１４００２）及配套校准品、质控品。　１．２　方法　１．１仪器与试剂　西门子ＢＮ　ｌＩ特定蛋白分析仪及　配套ｍＡＬＢ检测试剂盒（批号：１５３９９１Ｃ），奥林帕斯　ＡＵ５４００全自动生化分析仪，深圳迈瑞ｍＡＬＢ检测试　作者简介：解春宝（１９８５一），男，硕士，检验师，主要从事临床生物　化学和细菌耐药机制方面的研究。　通讯作者：黄文芳，Ｅ—ｍａｉｌ：ｈｕａｎｇｗ￣２００２＠２１ｃｎ．ｔｏｍ　１．２．１检测方法按照仪器要求设置参数，用各自　配套的校准品对ｍＡＬＢ进行定标。采用各自配套质　控品分别作室内质控，确保室内质控的结果在允许范　围内，按照仪器、试剂说明书对试验标本进行检测。　１．２．２评价方案　１．２．２．１　正确度　按照ｗｓ／Ｔ　４２０－－２０１３文件要　求　Ｊ，每天选取１０份新鲜尿标本分别在西门子特定　蛋白分析仪和奥林帕斯ＡＵ５４００上检测，连续检测　４　ｄ，以西门子特定蛋白分析仪上的结果为参考，计算　回归方程及偏倚。　１．２．２．２精密度按照ＣＬＳＩ　ＥＰ５一Ａ２文件中的要　求　，准备高浓度、低浓度标本各１份。连续测定标　本２０次，评价Ｆｔ内不精密度。将标本每天进行２个　批次测定，两批之间的时问间隔２　ｈ以上，持续２０　ｄ，　对所有数据进行统计学分析评价日间不精密度。　１．２．２．３线性范围按ＣＬＳＩ　ＥＰ６一Ａ文件要求　，　中国卫生检验杂志２０１５年６月第２５卷第１１期Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｈｅａｌｔｈ　Ｌａｂ　Ｔｅｃ，Ｊｕｎ．２０１５，Ｖｏ１．２５，Ｎｏ．１１　收集ｌ临床尿标本高值和低值各１份（选取的标本符合　深圳迈瑞检测试剂盒给定的线性范围），低值样本为　１号，高值样本为５号。按照低值样本和高值样本的　比例稀释如下：３：１混合为２号；１：１混合为３号；　１：３混合为４号。５份不同浓度的样本先按照低浓度　３讨论　至高浓度的顺序检测，重复测定３次。再按照高浓度　至低浓度的顺序检测，重复测定３次。将计算得到的　预期值定为　，测量的实际值定为Ｙ，做散点图并进行　直线回归分析。　ｍＡＬＢ其实就是微量的白蛋白出现在尿液中。　白蛋白在血液中的浓度很高，当肾脏功能良好时白蛋　白不会渗漏人尿液，但肾脏如果出现损伤，就会失去　尿液中蛋白质滤过功能　Ｊ，尿液中出现蛋白质。据文　献报道ｍＡＬＢ是肾脏早期损害的一个敏感指标，其敏　感性高于尿素氮和肌酐。据文献报道，在妊娠早期特　别是妊娠１２周开始对妊娠妇女的ｍＡＬＢ和血清白蛋　１．２．２．４最大稀释度收集接近产品推荐的线性范　围上限的高值标本１份。用生理盐水按照２倍、４倍、　５倍、ｌＯ倍、２０倍、３０倍稀释。分别检测原液和稀释　后的样本４次，测定结果的平均值为实测值。根据稀　释倍数关系计算出预期值。以“实测值／预期值”计算　稀释回收率。如某个稀释倍数的稀释回收率≤　（１００％±２０％），则该稀释度为最大稀释度。　１．３统计学处理采用Ｅｘｃｅｌ　２００３对均数、标准差、　变异系数和偏倚进行处理。采用ＳＰＳＳ　１０．０进行直　线回归分析。　２　结　果　２．１正确度迈瑞试剂盒在奥林帕斯ＡＵ５４００上的　检测结果与西门子特定蛋白分析仪及配套试剂检测　结果的绝对偏倚为０．０１７　５　ｍｇ／Ｌ。其线性回归方程　为Ｙ＝０．９８５ｘ＋０．９０９，相关系数（ｒ）为０．９９６，决定系　数（ｒ　）为０．９９３，提示两组数据相关性很好。　２．２精密度高浓度、低浓度标本的日内不精密度　分别为１．０４％和１．１７％，日间不精密度分别为　１．７４％和２．７１％。　２．３线性范围　其线性范围评价ｒ为１．０００，ｒ　为　０．９９９，说明预期值与实测值之间的相关性很好。其　回归方程为Ｙ＝０．９９２ｘ＋３．２７７，斜率为０．９９２，截距为　３．２７７，提示迈瑞尿微量白蛋白检测试剂盒在浓度为　４　ｍｇ／Ｌ一３００　ｍｇ／Ｌ时呈线性。　２．４最大稀释度经过最大稀释度试验发现回收率　较好，在３０倍稀释时的回收率尚能够达到１１９．４１％。　如果以回收率超过２０％作为判定标准，则该试剂检测　尿微量白蛋白的最大稀释度为３０倍（表１）。　表１迈瑞尿微量白蛋白检测试剂最大稀释度结果　白水平进行检测，能够及早发现妊高征，为早期妊高　征的诊断提供可靠的生物学指标　。据Ｒｏｓｈａｎ报　道，ｍＡＬＢ与糖尿病肾病（ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ，ＤＮ）　有着密切的关系　Ｊ，在未来的很多年里，ｍＡＬＢ仍是　预测和监控ＤＮ的可靠指标。因此检测ｍＡＬＢ具有　重要的临床意义。　ｍＡＬＢ的检测方法较多，如放射免疫法、化学发　光法、ＥＬＩＳＡ法、免疫透射比浊法等。目前，放射免疫　法被认为是检测ｍＡＬＢ的金标准，这种方法应用最　早，灵敏度和准确性较好　Ｊ。但缺点是使用的仪器较　贵，且存在放射性污染问题，在临床应用上具有局限　性。化学发光法是近年使用较多的方法，这种方法的　灵敏度和准确性也较好，但缺点是成本较贵。ＥＬＩＳＡ　法虽然成本较低，但是操作繁琐，影响因素较多，结果　的可靠性较差。深圳迈瑞ｍＡＬＢ检测试剂盒是利用　免疫透射比浊法检测尿微量白蛋白。经过对深圳迈　瑞ｍＡＬＢ检测试剂盒性能的评价发现该试剂盒的正　确度高、精密度好、线性范围宽、最大稀释度高。该试　剂盒在奥林帕斯ＡＵ５４００全自动生化分析仪上能满　足临床检验的要求。　参考文献　［１］　范世珍，陈安彬，林松青．尿微量白蛋白在高血压和糖尿病肾病　早期诊断中意义［Ｊ］．中国实验诊断学，２０１３，１７（２）：３０４—　３０６．　［２］　中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会．ＷＳ／Ｔ　４２０—２０１３　临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证［ｓ］．北京：中国　标准出版社，２０１３．　『３］　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｓｔａｎｄａｒｄｓ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ．ＥＰ５一Ａ２　Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｏｆ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ｄｅｖｉｃｅｓ：ａｐｐｒｏｖｅｄ　ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ［Ｓ］．Ａｍｅｒｉｃａ：ＣＬＳＩ，１９９９．　［４］Ｃｌｉｎｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｓｔｎａｄａｒｄｓ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ．ＥＰ６一Ａ　Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｌｉｎｅａｒｉｔｙ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ａｎａｌｙｔｉｃａｌ　ｍｅｔｈｏｄｓ：ａ　ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ　ａｐｐｒｏａｃｈ；　ａｐｐｒｏｖｅｄ　ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ［Ｓ］．Ａｍｅｒｉｃａ：ＣＬＳＩ，２００３．　［５］　尚红，潘柏申．医学检验项目指南［Ｍ］．北京：人民卫生出版　社，２０１１：６２２．　［６］　汪艳红，田晓勤．妊高征患者血清白蛋白、尿微量白蛋白检测意　义分析［Ｊ］．中国实验诊断学，２０１３，１７（６）：１１０６—１１０７．　［７］　Ｒｏｓｈａｎ　Ｂ，Ｓｔａｎｔｏｎ　ＲＣ．Ａ　ｓｔｏｒｙ　ｏｆ　ｍｉｃｒｏａｌｂｕｍｉｎｕｒｉａ　ａｎｄ　ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ［Ｊ］．Ｊ　Ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｏｌ，２０１３，２（４）：２３４—２４０．　［８］鲍利民，齐若梅，高欣，等．ＥＬＩＳＡ法检测尿微量白蛋白的临床　应用与评价［Ｊ］．中国卫生检验杂志，２００６，１６（２）：２２７—２２８．　收稿日期：２０１４—１０—３１