青藤碱联合甲氨蝶呤对类风湿关节炎患者IL-1,IL-17和TNF-α表达的影响

・２０６６・　现代中西医结合杂志Ｍｏｄｅｒｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ａｎｄ　Ｗｅｓｔｅｒｎ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　２０１４　Ｊｕｌ，２３（１９）　青藤碱联合甲氨蝶呤对类风湿关节炎患者ＩＬ一１，　ＩＬ一１７和ＴＮＦ一０【表达的影响　周　彬　，周迎莉　，林为民　，石　鹏　，付　宇　，曹家月　（１．解放军第４５１医院，陕西西安７１００５４；２．　解放军第３２３医院，陕西西安７１００５４）　［摘要］　目的　研究青藤碱联合甲氨蝶吟对类风湿关节炎（ＲＡ）患者体内ＩＬ一１，ＩＬ一　１７和ＴＮＦ—　表达的影响。方法　ＲＡ患者６Ｏ例随机分为２组：对照组３０例给予甲氨蝶呤　治疗，治疗组３０例给予甲氨蝶呤联合青藤碱治疗，观察２组治疗前后的体征和相关临床指标　（如ＤＡＳ２８、ＥＳＲ、ＲＦ、ＣＲＰ）变化；采用ｑＲＴ—ＰＣＲ法检测治疗前后ＩＬ一１，ＩＬ一１７和ＴＮＦ—ｏ【　ｍＲＮＡ的表达情况。结果　治疗后２组患者的体征、相关临床指标均有明显改善，治疗后治　疗组外周血淋巴细胞中ＩＬ一１，ＩＬ一１７和ＴＮＦ—ｄ　ｍＲＮＡ的表达水平较治疗前及对照组更低。　结论青藤碱联合甲氨蝶呤治疗可通过调节外周血淋巴细胞的免疫功能而对ＲＡ患者起到　显著治疗效果。　［关键词］　青藤碱；类风湿性关节炎；免疫调节　ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００８—８８４９．２０１４．１９．００６　［中图分类号］　Ｒ５９３．２２　［文献标识码］　Ａ　［文章编号］　１００８—８８４９（２０１４）１９—２０６６—０３　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｓｉｎｏｍｅｎｉｎｅ　ｃｏｍｂｉｎｅｄ　ｗｉｔｈ　ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＩＬ一１，　ＩＬ一１７　ａｎｄ　ＴＮＦ—　ｉｎ　ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ　ａｒｔｈｒｉｔｉｓ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　Ｚｈｏｕ　Ｂｉｎ　，Ｚｈｏｕ　Ｙｉｎｇｌｉ　，Ｌｉｎ　Ｗｅｉｍｉｎ‘，Ｓｈｉ　Ｐｅｎｇ　，Ｆｕ　Ｙｕ　，Ｃａｏ　Ｊｉａｙｕｅ　（１．Ｔｈｅ　４５１　ｓｔ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　ＰＬＡ，Ｘｉｈｎ　７１００５４，Ｓｈａａｎｘｉ，Ｃｈｉｎａ；２．Ｔｈｅ　３２３ｒｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　ＰＬＡ，Ｘｉｈｎ　７１００５４，Ｓｈａａｎｘｉ，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｉｔ　ｉｓ　ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｓｉｎｏｍｅｎｉｎｅ　ｃｏｍｂｉｎｅｄ　ｗｉｔｈ　ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＩＬ一１，　ＩＬ一１７　ａｎｄ　ＴＮＦ—ａ　ｉｎ　ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ　ａｒｔｈｒｉｔｉｓ（ＲＡ）ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　６０　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ＲＡ　ｗｅｒｅ　ｒａｎｄｏｍｌｙ　ｄｉｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ　２　ｇｒｏｕｐｓ：ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ（ｎ＝３０）ｗａｓ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐ（ｎ＝３０）ｗａｓ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｓｉｎｏｍｅｎ—　ｉｎｅ　ｃｏｍｂｉｎｅｄ　ｗｉｔｈ　ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ．Ｔｈｅ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｏｆ　ｓｉｇｎｓ　ａｎｄ　ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｉｎｄｅｘｅｓ　ｓｕｃｈ　ａｓ　ＤＡＳ２８，ＥＳＲ，ＲＦ　ａｎｄ　ＣＲＰ　ｂｅ－　ｆｏｒｅ　ａｎｄ　ａｆｔｅｒ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｗｅｒｅ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ｉｎ　ｂｏｔｈ　ｇｒｏｕｐｓ，ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＩＬ一１．ＩＬ一１７　ａｎｄ　ＴＮＦ—ａ　ｍＲＮＡ　ｂｅｆｏｒｅ　ａｎｄ　ａｆｔｅｒ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ｑＲＴ—ＰＣＲ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ａｆｔｅｒ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｔｈｅ　ｓｉｇｎｓ　ａｎｄ　ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｉｎｄｅｘｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ａｌｌ　ｉｍｐｒｏｖｅｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｉｎ　ｂｏｔｈ　ｇｒｏｕｐｓ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ＩＬ一１，ＩＬ一１７　ａｎｄ　ＴＮＦ一　ｍＲＮＡ　ｉｎ　ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ　ｉｎ　ｐｅ—　ｒｉｐｈｅｒａｌ　ｂｌｏｏｄ　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｌｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｂｅｆｏｒｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ａｎｄ　ｉｎ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｓｉｎｏｍｅｎｉｎｅ　ｃｏｍｂｉｎｅｄ　ｗｉｔｈ　ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ　ｔｈｅｒａｐｙ　ｈａｓ　ａ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｃｕｒａｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ＲＡ　ｂｙ　ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ　ｔｈｅ　ｉｍｍｕｎｅ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ　ｂｌｏｏｄ　ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｓｉｎｏｍｅｎｉｎｅ；ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ　ａｒｔｈｒｉｔｉｓ；ｉｍｍｕｎｅ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　类风湿关节炎（ＲＡ）是一种全身性的自身免疫性疾病，与　１　临床资料　遗传、感染、环境、激素等因素相关，对于其确切病因至今不　１．１一般资料选择２０１１年８月一２０１３年３月于解放军第　明。此病在中医学中归属于“痹证”的范畴。ＲＡ患者主要表　４５１医院就诊的ＲＡ患者６０例，诊断均符合１９８７年美国风湿　现出慢性进行性关节病变，并以非化脓性、增生性滑膜炎，局　病学会ＲＡ的分类标准，均为初治者，确诊前均未用激素及免　部关节反复发作为特点，逐渐导致关节软骨的破坏，最后以关　疫抑制剂等药物，无合并其他系统性疾病。将患者随机分为　节功能损失而致残。在病变发展过程中，ＲＡ患者还常见有　２组：治疗组３０例，男１２例，女１８例；年龄２２—６３岁，平均　骨质疏松、骨质破坏。青藤碱（ＳＮ）是由防己科植物青风藤及　４２．５岁；病程（３８．４±２４．６）个月。对照组３Ｏ例，男１１例，女　毛青藤的藤茎中提取的生物碱单体，具有抗炎、镇痛、抗风湿、　１９例；年龄２４～６５岁，平均４３．１岁；病程（３７．２±２１．３）个　免疫抑制等药理作用。临床实践证明ＳＮ具有治疗ＲＡ的作　月。２组患者的性别、年龄、病程以及治疗前的关节肿胀个　用…，但具体机制仍未明确。本研究利用ｓＮ联合甲氨蝶呤　数、关节压痛个数、晨僵时间、握力大小、患者评价、医生评价、　（ＭＴＸ）治疗ＲＡ患者，观察ＳＮ对ＲＡ患者外周血ＩＬ一１、ＩＬ—　ＤＡＳ２８评分等基本资料比较均无显著性差异（Ｐ均＞０．０５），　ｌ７和ＴＮＦ一０【表达水平的影响，为阐明相关机制提供参考。　具有可比性。　［作者简介］　周彬，女，副主任医师，主要从事肾脏疾病及风湿　１．２治疗方法对照组给予甲氨蝶呤（甲氨蝶呤片，上海信　免疫系统疾病临床工作。　谊）１０　ｍｇ口服，每周１次，连用８周；治疗组在甲氨蝶呤口服　现代中西医结合杂志Ｍｏｄｅｒｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ａｎｄ　Ｗｅｓｔｅｒｎ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　２０１４　Ｊｕｌ，２３（１９）　・２０６７・　治疗基础上服用青藤碱（商品名：正清风痛宁，湖南华纳大药　厂有限公司）６０　ｍｇ／次，２次／ｄ，连用８周。　１．３观察指标　１．３．１　ＲＡ活动性评价用ＤＡＳ２８指数评价活动度。　℃预变性１０　ａｒｉｎ。９４℃ＤＮＡ变性２０　Ｓ，引物在５０℃退火３０　Ｓ，７２℃延伸３０　ｓ，３６个循环，７２℃后延伸１０　ｍｉｎ。取３次重复　的平均值，用目的基因的拷贝数除以Ｂ—ａｃｔｉｎ的拷贝数作为　靶基因的相对表达量。　１．３．２临床检查指标　患者于治疗前和治疗８周后各进行　１次体检，并记录患者关节肿胀个数、关节压痛个数、晨僵时　间、握力大小、患者评价、医生评价、ＤＡＳ２８评分，同时进行红　细胞沉降率（ＥＳＲ）、ｃ反应蛋白（ＣＲＰ）、类风湿因子（ＲＦ）等　检查。　１．４疗效评定标准２组各项临床指标的比较采用改善值　（治疗前值一治疗后值）和改善率（改善值／治疗前值×　１００％），将各项临床指标改善率相加求平均值，以平均改善率　进行疗效评价。显效：平均改善率＞７５％；有效：平均改善率　３０％一７５％；无效：平均改善率＜３０％。　１．３．３淋巴细胞的分离无菌采取服药治疗前ＲＡ患者６—　１．５统计学处理　实验数据采用统计学软件ＳＰＳＳ　１３．０分　８　ｍＬ肝素抗凝静脉血，１　０００　ｒ／ｒａｉｎ离心５　ｍｉｎ，收集血细胞，去　血浆后的血细胞用生理盐水重悬，用淋巴细胞分离液密度梯　度（２　１００　ｒ／ｍｉｎ，离心２５　ｍｉｎ）离心，用移液器缓慢吸取白雾状　析，计量资料采用均数４－标准差（　４－ｓ）表示，２组均数间比较　采用ｔ检验，多组均数间的比较采用单因素方差分析和两两　比较（ＬＳＤ），Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。　２　结　果　见表１。　淋巴细胞层，并将淋巴细胞集中于１０　ｍＬ离心管中备用。　１．３．４　ｑＲＴ—ＰＣＲ分析利用ＲＮＡ—Ｓｏｌｖｅ　Ｒｅａｇｅｎｔ试剂盒　２．１　２组疗效比较提取淋巴细胞的总ＲＮＡ，反转录ＰＣＲ合成ｃＤＮＡ。定量分析　合成引物序列，ＩＬ一１　Ｐ１：ＧＡＴＣＣＡＣＡＣＴＣＴＣＣＡＧＣＴＧＣＡ；Ｐ２：　ＣＡＡ　ＣＣＡＡＣＡＡＧＴＧＡＴＡＴＴＣＴＣＣＡＴＧ；ＩＬ一１　７　Ｐ３：ＡＣＴＣＣＴＧＧ—　ＧＡＡＧＡＣＣＴＣＡＴＴＧ；Ｐ４：ＧＧＣＣＡＣＡＴＧＧＴＧＧＡＣＡＡＴＣＧ：ＴＮＦ—　ｄ　Ｐ５：ＧＧＴＣＣＣＣＡＡＡＧＧＧＡＴＧＡＧＡＡＧＴＴＣ；Ｐ６：ＣＣＡＣＴＴＧＧＴＧ—　表１　２组治疗后疗效比较　例　ＧＴＴＴＧＣＴＡＣＧＡＣＧ；Ｂ—ａｃｔｉｎ　Ｐ７：ＴＧＧＣＡＣＣＡＣＡＣＣＴＩ＇ＣＴＡＣＡＡ；　注：①与对照组比较，Ｐ＜０．０５。　Ｐ８：ＴＣＧＴＣＡＴＡＣＴＣＣＴＧＣＴＴＧＣＴ。采用ＤＮＡ　Ｅｎｇｉｎｅ　Ｏｐｔｉｃｏｎ—　ＴＭ２荧光检测系统和ＤｙＮＡｍｏ　ＳＹＢＲ　Ｇｒｅｅｎ　ｑＰＣＲ试剂盒进行　２．２　２组治疗前后主要体征与患者、医生评价比较　治疗　后，２组患者各项临床指标都得到显著改善（Ｐ均＜０．０５），且　治疗组较对照组改善更明显（Ｐ均＜０．０５）。见表２。　基因表达的测定。反应条件为：ＵＮＧ酶５０℃孵育２　ｒａｉｎ，９４　表２　２组治疗前后主要症状及体征变化（　４－ｓ）　注：①与治疗前比较，Ｐ＜０．０５；②与对照组治疗后比较，Ｐ＜０．０５；１　ｍｍＨｇ＝０．１３３　ｋＰａ。　２．３　２组治疗前后各项实验室检查指标比较　２组治疗后　的表达下调（Ｐ＜０．０５），且治疗组表达水平更低（Ｐ均＜　ＤＡＳ２８、ＥＳＲ、ＲＦ、ＣＲＰ均有显著改善，且治疗组改善程度更明显，２组患者治疗后外周血淋巴细胞中ＩＬ一１，ＩＬ一１７和ＴＮＦ—ｄ　０．０５）。见表３。　３讨　论　表３　２组治疗前后各项实验室检查指标比较（ｉ　－ｓ）４　注：①与治疗前比较，Ｐ＜０．０５；②与对照组治疗后比较，Ｐ＜０．０５。　目前治疗ＲＡ的主要方式包括非甾体抗炎药、慢作用抗　风湿药、糖皮质激素、生物制剂、自体干细胞移植和基因治疗　等　“ｊ。这些方式主要通过调节机体免疫以达到减缓病情发　展的目的。但各种西药治疗只能治标而无法根除病症，长期　服用也易使患者产生依赖性和毒副作用。生物免疫抑制剂如　细胞因子抗体具有明确的疗效，但由于其较大的毒副作用以　及昂贵的医疗价格等特点限制了在临床上的应用。因此研究　治疗效果好、治疗成本低、毒副作用小的传统中药如青藤碱具　有重要的现实意义。　ＥＳＲ、ＣＲＰ、ＲＦ是３个常用的ＲＡ临床检测指标，三者在　．２０６８・　现代中西医结合杂志Ｍｏｄｅｒｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ａｎｄ　Ｗｅｓｔｅｒｎ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　２０１４　Ｊｕｌ，２３（１９）　能的调节作用。免疫调节是一种多种细胞和因子参与的复杂　过程，因此青藤碱参与免疫调节的具体机制还需进一步探讨。　［　参　考　文　献　］　［１］Ｃｈｅｎｇ　Ｙ，Ｚｈａｎｇ　Ｊ，Ｈｏｕ　Ｗ，ｅｔ　ａ１．Ｉｍｍｕｎｏｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｓｉｎｏ－　ｍｅｎｉｎｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　Ｔ—－ｂｅｔ／ＧＡＴＡ—－３　ｒａｔｉｏ　ａｎｄ　Ｔｈｌ／Ｔｈ２　ｃｙｔｏｋｉｎｅ　ｂａｌ－・　评估ＲＡ患者病情状况中有重要作用　。有研究者认为在　ＲＡ疾病活动指标的评价中，ＤＡＳ２８评分的敏感性和特异性　要比ＣＲＰ、ＥＳＲ、ＲＦ好，且ＤＡＳ２８评分与调节性Ｔ细胞（ｒｅｇｕ・　ｌａｔｏｒｙ　Ｔ　ｃｅｌｌ，Ｔｒｅｇ）增高及Ｔｈｌ７细胞降低具有明显的相关　性　］。本研究结果也证明了青藤碱联合甲氨蝶呤治疗能够　改善ＲＡ患者中ＥＳＲ、ＣＲＰ、ＲＦ、ＤＡＳ２８评分等几项临床指标，　与周洁如等　研究相符。　研究显示细胞因子网络在ＲＡ的发病机制中起到重要作　用，患者外周血血清和关节滑膜及滑液中显著增高的促炎因　ａｎｃｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｍｅｓａｎｇｉａｌ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ　ｎｅｐｈｒｉｔｉｓ［Ｊ］．Ｉｎｔ　Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ，２００９，９（７／８）：８９４—８９９　［２］　徐胜前，徐建华，王芬，等．糖皮质激素治疗类风湿关节炎的初　步ｆ临床分析［Ｊ］．中国实用医药，２００８，２４（３）：１６　［３］Ｄｕｒｅｚ　Ｐ，Ｔｏｕｎｇｏｕｚ　Ｍ，Ｓｃｈａｎｄｅｎｅ　Ｌ，ｅｔ　ａ１．Ｒｅｍｉｓｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｍｍｕｎｅ　ｒｅｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎ　ａｆｔｅｒ　Ｔ—ｃｅｌｌ—ｄｅｐｌｅｔｅｄ　ｓｔｅｍ—ｃｅｌｌ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　子如ＩＬ一１、ＴＮＦ—　等是ＲＡ病变持续存在迁延进展的关　键…。ＩＬ一１主要在单核巨噬细胞中合成分泌，也可由内皮　细胞、Ｂ细胞和活化的Ｔ细胞表达生成。ＩＬ一１具有促进滑膜　细胞和淋巴细胞增殖和分化的能力，同时能促进滑膜细胞和　软骨细胞合成并释放前列腺素Ｅ　和胶原酶。ＩＬ一１７是ＲＡ　发病早期炎症因子，由Ｔｈ１７细胞产生，具有很强促炎症作用。　ＩＬ一１７可以上调软骨细胞及滑膜成纤维细胞基质金属蛋白　ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ　ａｒｔｈｒｉｔｉｓ［Ｊ］．Ｌａｎｃｅｔ，１９９８，３５２（９ｌ３１）：８８１　［４］　ｖａｎ　ｄｅｒ　Ｈｅｉｊｄｅ　Ｄ，Ｋｌａｒｅｓｋｏｇ　Ｌ，Ｓｉｎｇｈ　Ａ，ｃｔ　ａ１．Ｐａｔｉｅｎｔ　ｒｅｐｏｒｔｅｄ　ｏｕｔ－　ｃｏｍｅｓ　ｉｎ　ａ　ｔｒｉａｌ　ｏｆ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ　ｔｈｅｒａｐｙ　ｗｉｔｈ　ｅｔａｎｅｒｃｅｐｔ　ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｃ　ｆｏｒ　ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ　ａｒｔｈｒｉｔｉｓ：ｔｈｅ　ｔｅｍｐｏ　ｔｒｉａｌ［Ｊ］．Ｒｈｅｕｍ　Ｄｉｓ，２００６，６　（５）：３２８—３３４　［５］　Ｍｏｔｔｏｎｅｎ　ＴＴ．Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｒｏｆｌｉｖｅｎｅｓｓ　ａｎｄ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　酶（ＭＭＰｓ）的表达，增强聚合素酶和胶原酶活性　。研究发　现ＩＬ一１与ＩＬ一１７之间具有相互促进与相互减弱的交叉调　控作用　］。ＴＮＦ—ｏｔ主要由单核巨噬细胞合成，Ｔ细胞、Ｂ细　ｎｅｗ　ｅｒｏｓｉｏｎｓ　ｉｎ　ｅａｒｌｙ　ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ　ａｒｔｈｒｉｔｉｓ［Ｊ］．Ａｎｎａｌｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｒｈｅｕ—　ｍａｔｉｃ　Ｄｉｓｅａｓｅｓ，１９８８，４７：６４８—６５３　［６］　周洁如，邓筠，李凝，等．青藤碱联合甲氨蝶呤对ＲＡ患者外周　血Ｔｒｅｇ及Ｔｈｌ７细胞的影响及其临床意义［Ｊ］．现代免疫学，　２０１３，３（１）：４６—５０　胞和成纤维细胞也可以合成一部分。ＴＮＦ一　也具有许多与　ＩＬ一１相似的作用，引起骨和软骨的吸收破坏，促进成纤维母　细胞的增生　。本研究显示青藤碱联合甲氨蝶呤治疗能够　显著降低ＲＡ患者外周血淋巴细胞ＩＬ一１、ＩＬ一１７和ＴＮＦ—　的表达，且其降低程度要明显大于单独使用甲氨蝶呤治疗组，　说明青藤碱可以通过调节淋巴细胞中相关细胞因子的表达进　而调节免疫来治疗ＲＡ。　近年来研究发现，青藤碱的可能作用机制包括：调控淋巴　细胞的免疫功能，抑制炎症反应；抑制病患处细胞如纤维样滑　膜细胞炎性因子的释放；抑制滑膜细胞增殖。本研究结果显　示，青藤碱联合甲氨蝶呤可以有效改善ＲＡ患者的临床症状，　并且可以显著降低患者外周血淋巴细胞表达ＩＬ一１、ＩＬ一１７和　［７］　Ｆｅｌｄｍａｎｎ　Ｍ，Ｂｒｅｎｎａｎ　Ｆ，Ｍａｉｎｉ　Ｒ．Ｒｏｌｅ　ｏｆ　ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ　ｉｎｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ　ａｒｔｈｒｉｔｉｓ［Ｊ］．Ｍａｉｎ　Ａｎｎｕ　Ｒｅｖ　Ｉｍｍｕｎｏｌ，１９９６，１４：３９７—４４０　［８］Ｗｅａｖｅｒ　ＣＴ，Ｈａｔｔｏｎ　ＲＤ，Ｍａｎｇａｎ　ＰＲ，ｅｔ　ａ１．ＩＬ一１７　ｆａｍｉｌｙ　ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｅｘｐａｎｄｉｎｇ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　ｅｆｆｅｃｔｏｒ　Ｔ　ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅａｇｅｓ［Ｊ］．Ａｎｎｕ　Ｒｅｖ　Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００７，２５：８２１—８５２　［９］　成冰燕，王占元．细胞因子与类风湿性关节炎治疗的研究进展　［Ｊ］．药学实践杂志，２０００，１８（３）：１４３—１４４　［１０］Ｈｅｎｄｅ￣ｏｎ　Ｂ，Ｐｅｔｔｉｐｈｅｒ　ＥＲ．Ａｒｔｈｒｉｔｏｇｅｎｉｃ　ａｃｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ　ＩＬ一　１　ａｎｄ　ｔｕｍｏｕｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ　ａｌｐｈａ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｂｂｉｔ：ｅｖｉｄｅｎｃｅ　ｆｏｒ　ｓｙｎｅｒ—　ｇｉｓｔｉｃ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ　ｉｎ　ｖｉｖｏ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ　Ｅｘｐ　Ｉｍｍｕｎｏｌ，　１９８９，７５（２）：３０６—３１０　ＴＮＦ—ｏｒ．ｍＲＮＡ，显示出青藤碱具有对外周血淋巴细胞免疫功　［收稿日期］２０１３—１１—１５　（上接第２０６５页）　［２］　Ｒｉｔｚ　Ｅ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｍａｎｉｆｅｓｔａｔｉｏｎｓ　ａｎｄ　ｎａｔｕｒａｌ　ｈｉｓｔｏｒｙ　ｏｆ　ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｋｉｄｎｅｙ　ｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］．Ｍｅｄ　Ｃｌｉｎ　Ｎｏｒｔｈ　Ａｍ，２０１３，９７：１９—２９　用中医内科杂志，２００５，１９（１）：８０　［８］Ｌｕｏ　ＷＢ，Ｄｏｎｇ　Ｌ，Ｗａｎｇ　ＹＰ．Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｍａｇｎｅｓｉｕｍ　ｌｉｔｈｏｓｐｅｍａｔｅ　Ｂ　ｏｎ　ｃａｌｉｕｍ　ａｎｄ　ｎｉｔｒｉｃ　ｏｘｉｄｅ　ｉｎ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｃｅｌｌｓ　ｕｐｏｎ　ｈｙｐｏｘｉａ／ｒｅｏｘｙｇｅｎ—　［３］　Ｎａｊａｆｉａｎ　Ｂ，Ａｌｐｅｒｓ　ＣＥ，Ｆｏｇｏ　ＡＢ．Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｎｅ－　ｐｈｒｏｐａｔｈｙ［Ｊ］．Ｃｏｎｔｒｉｂ　Ｎｅｐｈｒｏｌ，２０１１，１７０：３６—４７　［４］Ｔｒｉｐａｔｈｉ　ＹＢ，Ｙａｄａｖ　Ｄ．Ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ：ｃａｕｓｅｓ　ａｎｄ　ｍａｎａｇｅ－　ａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｅａ　Ｓｉｎｃｉｃａ，２００２，２３（１０）：９３０—９３６　［９］　徐曼，王逸平，孙伟康，等．丹参多酚酸盐对大鼠慢性肾衰时肾　功能及内源性内皮素释放的影响［Ｊ］．中国药理学与毒理学杂　志，２００１，１５（１）：３９—４２　ｍｅｎｔｓ［Ｊ］．Ｒｅｃｅｎｔ　Ｐａｔ　Ｅｎｄｏｃｒ　Ｍｅｔａｂ　Ｉｍｍｕｎｅ　Ｄｒｕｇ　Ｄｉｓｃｏｖ，２０１３，７　（１）：５７—６４　［１Ｏ］曲荣广．糖尿病肾病药物治疗进展［Ｊ］．中华现代临床医学杂　志，２０１２，１０（３）：３０—３２　［５］　卞镝，李敬林，董天宝．从瘀论治糖尿病肾病［Ｊ］．辽宁中医杂　志，２００６，３３（１０）：１２６６—１２６７　［１Ｉ］Ｗａｎｇ　Ｈ，Ｄｅｎｇ　ＪＬ，Ｙｕｅ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ　Ｅ１　ｆｏｒ　ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ　ｔｈｅ　ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｋｉｄｎｅｙ　ｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］．Ｃｏｃｈｒａｎｅ　Ｄａｔａｂａｓｅ　Ｓｙｓｔ　Ｒｅｖ，２０１０，１２（５）：ＣＤ００６８７２　［６］　张李兴，曹田梅．活血化瘀法治疗糖尿病肾病经验［Ｊ］．吉林中　医药，２００８，１０（２８）：７１３—７１４　［７］　李文红．活血化瘀法在糖尿病肾病治疗中的重要作用［Ｊ］．实　［收稿日期］２０１３—１２—０８