1 原理
将样品溶于乙酸乙酯中并于100℃水浴上蒸干后，加入5%香草醛-冰醋酸溶液和高氯酸，于60℃水浴加热，再加入冰醋酸。在一定浓度范围内其吸光度与三萜类化合物的含量成正比，以此进行比色定量。 2 仪器和试剂 2.1仪器
2.1.1紫外可见分光光度计 2.1.2超声波清洗器 2.1.3电热恒温水浴锅 2.2试剂
2.2.1熊果酸标准品 2.2.2高氯酸（分析纯）
2.2.3冰醋酸（分析纯），香草醛（分析纯） 2.2.4乙酸乙酯（分析纯）
2.2.5熊果酸对照品溶液：精密称取经五氧化二磷减压干燥12小时的熊果酸对照品一定量，置容量瓶中，用乙酸乙酯溶解，超声15min,并稀释至刻度，摇匀，制成0.1mg/ml的对照品溶液。 3 分析步骤 3.1标准曲线的绘制
分别精密吸取0.00ml、0.10ml、0.30ml、0.50ml、0.70ml、0.90ml对照品溶液于10ml试管中，于100℃水浴上蒸干后，加入0.20ml 5%香草醛-冰醋酸和1.0ml高氯酸，摇均，在60℃水浴中加热20min并移入冰水浴中冷却3min，再加入5.00ml冰醋
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酸, 摇匀并置于室温。15min后用用分光光度计于548nm波长下测定对照品溶液的吸光度。分别以熊果酸质量为横坐标和吸光度值为纵坐标绘制标准曲线。 3.2样品溶液的制备与测定
取混合均匀的固体样品0.1g，精密称定，置100ml容量瓶中，用乙酸乙酯溶解，超声30min,并稀释至刻度，摇匀，过滤。精密吸取1.0ml滤液于10ml的试管中，于100℃水浴上蒸干后，加入0.20ml 5%香草醛-冰醋酸和1.0ml高氯酸，摇均，在60℃水浴中加热20min并移入冰水浴中冷却3min，再加入5.00ml冰醋酸, 摇匀并置于室温。15min后用用分光光度计于548nm波长下测定样品溶液的吸光度。 4 含量计算
灵芝三萜（以熊果酸计，）=
样品相当于对照品的量（mg）
样品重（mg）
×100%
2
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