中国药理通讯２０１０年第二十七卷第四期 改善实验性糖尿病大鼠的脂代谢紊乱，还能纠正糖代谢异常，显著降低空腹血糖，为吉非罗齐治疗 糖尿病伴高脂血症提供基础实验数据，对指导临床合理用药具有一定的意义。 ＣＹＰ４５０表氧化酶激活剂高通量筛选模型的建立 王守宝宋俊科孙加琳杜冠华 北京１０００５０ 中国医学科学院北京协和医学院药物研究所 国家药物筛选中心目的：本研究拟建立以人细胞色素蛋白４５０（ＣＹＰ４５Ｏ）表氧化酶激活剂的高通量筛选模型， 用于发现能够ＥＥＴｓ代谢的活性化合物，为新药研究提供源头。 背景：环氧二十碳三烯酸（ＥＥＴｓ）是花生四烯酸经细胞色素Ｐ４５０表氧化酶代谢的产物， 具有抗缺血损伤、舒张血管、抗炎和镇痛等作用。最新研究证明ＥＥＴｓ即内皮源性超极化因子 （ＥＤＨＦ）。花生四烯酸可被ＣＹＰ４５０表氧化酶代谢为环氧二十碳三烯酸（ＥＥＴ）或被ＣＹＰ 羟 化酶代谢为２０一羟基二十碳四烯酸（２０一ＨＥＴＥ）。已证实ＣＹＰ４５０表氧化酶广泛存在于心脏与血 管中，但对其功能的研究刚刚开始。ＣＹＰ２Ｊ２基因活性降低的多态性与ＣＡＤ危险性增加相关， 表明ＣＹＰ２Ｊ２有心脏保护功能。具有稀有遗传变异的ＣＹＰ２Ｃ８或ＣＹＰ２Ｃ９会增加心肌梗死危险 性。抽雪茄烟的人群中ＣＹＰ１Ａ１的基因变化也可小幅度增加血管疾病的危险性，提示ＣＹＰ１Ａ１ 参与动脉硬化的发生。深入研究心血管系统中存在的ＣＹＰ４５０表氧化酶及其功能，并探讨其作 为心血管疾病药物的新靶标的可能性，对于心血管疾病的治疗具有重要意义。 方法：利用基因组中含有ＮＡＤＰＨ—ＣＹＰ４５０还原酶（ＣＰＲ）基因的ＷＨＴ酵母菌对人细胞 色素蛋白４５０（ＣＹＰ４５０）表氧化酶进行克隆、表达，从而解决了需要外源加人ＣＰＲ的问题。使 用异源重组的人ＣＹＰ４５０表氧化及荧光探针底物进行高通量筛选。其底物为甲虫萤光素的衍生 物，为发光前体物质，甲虫萤光素是萤光素酶的底物。未发生反应时，该衍生物不是萤光素酶 的底物，当ＣＹＰ４５０酶将该物质转换成萤光素时，即成为萤光素酶的底物，并与萤光素酶作用 而发光，发光的强度与Ｐ４５０酶的活性直接呈正比。采用黑色Ｃｏｓｔａｒ ３８４孔板，利用Ｈａｍｉｌｔｏｎ Ｍｉｃｒｏｌａｂ￣ＳＴＡＲ全自动液体处理工作站对本中心的样品库进行高通量筛选。 结论：本研究建立的细胞色素蛋白４５０（ＣＹＰ４５０）表氧化酶激活剂高通量筛选方法操作简 便，方法稳定、灵敏，特异性较高，符合高通量筛选要求，为大规模筛选能够ＥＥＴｓ代谢的 活性化合物提供了保障。 昂丹斯琼临床用药安全相关研究 王月华杨海光李莉玄昭红郭晶童元峰吴松杜冠华 中国医学科学院北京协和医学院药物研究所北京１０００５０ 本研究以完善临床用药安全检测技术标准为基础，攻克我国药品标准中相关杂质检测的关键技 术。昂丹司琼为一种高度选择性的５一羟色胺３（５－ＨＴ３）受体拮抗剂，临床用于化疗和放疗引起的恶
